Page 106 - 2019年11月第30卷第21期

马海治瘫胶囊是本院（即陕西省中医院）脑内科前 分析纯。
辈依据中医阴阳平衡理论创立的具有中医药特色的制
剂方之一，由黄芪、大黄、制马钱子、水蛭、当归、海风藤、
千年健等七味药组成，具有益气通络、活血化瘀、醒脑开
窍和健肢回语的功效，其在临床使用了四十余年，治疗
软瘫中风病的总有效率达 95％以上 [1-2] 。相关药理研究
也表明，马海治瘫胶囊不仅具有延长小鼠缺氧存活时
间、延长凝血时间以及有效改善机体微循环的作用，并
能显著改善神经功能症状和行为学障碍、减轻脑水肿程
度、缩小脑梗死面积 [3-4] 。但目前，该制剂质量标准仅有
[5]
大黄和黄芪的薄层鉴别 ，无法全面控制药品的质量，更
无法全面阐释本制剂治疗中风疾病的物质基础及其多
靶点治疗的整体性和复杂性内涵。基于此，本研究采用
高效液相色谱（HPLC）法建立马海治瘫胶囊的指纹图
谱，确认指纹特征峰物质，同时对方中二味君药制马钱
子与大黄中含有的马钱苷酸、士的宁、马钱子碱、大黄素
和大黄酚5个成分建立含量测定方法，为马海治瘫胶囊
制剂工艺稳定性考察和质量评价与控制提供参考。
1 材料
1.1 仪器
1260 Infinity HPLC 仪（美国 Agilent 公司）；KQ-100
超声波清洗机（昆山市超声仪器有限公司）；BT25S电子
分析天平（北京赛多利斯天平有限公司，d＝0.01 mg）。
1.2 药品与试剂
10 批马海治瘫胶囊均由本院制剂室制备（批号：
2017060101、 2017060102、 2017060103、 2017060104、
2017060105、 2017060106、2017060107、2017060108、
2017060109、2017060110，依次编号为S1～S10，规格：0.3
g/粒，每1 g中含生药量2.91 g）；药材黄芪、大黄、制马钱
子、水蛭、当归、海风藤、千年健（陕西兴盛德药业有限责
任公司，批号：20170101、20170203、20170206、20170210、
20170311、20170306、20170216），经陕西省中医医院石
会丽研究员鉴定均符合药典标准；对照品马钱苷酸（批
号：MUST-18040209，纯度：99.52％）、士的宁（批号：
MUST-16053101，纯 度 ：99.51％）、马 钱 子 碱（批 号 ：
MUST-16041906，纯度：99.31％）、芦荟大黄素（批号：
MUST-17030605，纯 度 ：98.65％）、大 黄 素（批 号 ：
MUST-16110712，纯度：99.10％）、大黄素甲醚（批号：
MUST-17030622，纯度：99.21％）均购自成都曼斯特生物
科技有限公司；对照品阿魏酸（批号：0757-9804，纯度：
99.41％）、大黄酚（批号：0796-20006，纯度：98.61％）、大
黄酸（批号：0757-9804，纯度：98.65％）均购自中国食品
药 品 检 定 研 究 院 ；对 照 品 没 食 子 酸 为 自 制（批 号 ：
20180201，纯度：99.1％）；乙腈（美国 Honeywell 公司，色
谱纯）；甲酸（天津市科密欧化学试剂有限公司，分析
纯）；甲醇（成都市科隆化学品有限公司，分析纯）；磷酸
（国药集团化学有限责任公司，分析纯）；其余试剂均为
中国药房 2019年第30卷第21期
2 方法与结果
2.1 马海治瘫胶囊指纹图谱的研究
2.1.1 色谱条件
色谱柱为 Inertsil ODS-3（250 mm×4.6 mm，5 μm）；
柱温为30 ℃；流动相为乙腈（A）-0.1％磷酸（B）溶液，梯
度 洗 脱（0～10 min，5％ A；10～70 min，5％ →30％ A；
70～120 min，30％→100％A）；检测波长为 250 nm（0～
23 min 和 31～120 min）、230 nm（23～31 min）；流速为
1.0 mL/min；进样量为10 μL。
2.1.2 溶液的制备
（1）供试品溶液的制备。取马海治瘫胶囊内容物
1.0 g，精密称定，置于50 mL具塞三角瓶中，加75％甲醇
25 mL，密塞，称定质量，超声（频率：250 W、40 kHz）30
min，放至室温；再次称定质量，用 75％甲醇补足减失的
质量，摇匀，用微孔滤膜（0.45 µm）滤过，取续滤液，
即得。
（2）单味药材样品溶液的制备。分别取 7 种单味药
材粉末0.5 g，精密称定，依照“2.1.2（1）”项下供试品溶液
的制备方法，制得各单味药材样品溶液。
（3）对照品溶液的制备。精密称取各对照品适量，
分别置于 10 mL 量瓶中，用 75％甲醇溶解并定容至刻
度，制成每 1 mL 分别含没食子酸 0.80 mg、马钱苷酸
0.456 mg、士的宁 0.15 mg、马钱子碱 0.15 mg、阿魏酸
0.21 mg、芦荟大黄素0.203 mg、大黄酸0.091 mg、大黄素
0.475 mg、大黄酚 0.36 mg 和大黄素甲醚 0.11 mg 的单一
对照品溶液。
（4）缺味药材阴性样品溶液的制备 按处方比例分
别称取其中6味药材，照制剂工艺制得缺味药材阴性样
品，再按“2.1.2（1）”项下方法分别制得各药材的缺味药
材阴性样品溶液。
2.1.3 指纹图谱建立的方法学考察
（1）精密度试验。精密称取马海治瘫胶囊（批号：
2017060104）内容物1.0 g，采用“2.1.2（1）”项下方法制备
供试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样6次，以峰
19 为参照峰（峰面积居中、分离度良好），计算得到各共
有峰相对保留时间的 RSD 均小于 1.02％（n＝6）、相对
峰面积的 RSD 均小于 2.0％（n＝6），表明仪器精密度
良好。
（2）重复性试验。取同一批马海治瘫胶囊（批号：
2017060104）内容物 1.0 g，精密称定，平行 6 份，采用
“2.1.2（1）”项下方法制备供试品溶液，按“2.1.1”项下色
谱条件进样测定，以峰19为参照峰计算得到各共有峰相
对保留时间的RSD均小于0.99％（n＝6）、相对峰面积的
RSD均小于3.01％（n＝6），表明该方法重复性良好。
（3）稳定性试验。取同一供试品溶液（样品批号：
2017060104），分别在室温放置 0、2、4、8、12、24 h 后，按
China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 21 ·2981 ·