Page 90 - 2019年10月第30卷第20期

μL。取“2.4.1”项下混合对照品溶液、供试品溶液（批号： 骆驼蓬碱峰面积的 RSD 分别为 0.57％、2.76％（n＝6），
20180818）按上述色谱条件进样检测。结果，待测成分 表明供试品溶液在上述条件下放置24 h稳定性良好。
的分离度均大于1.5，空白溶剂无干扰，理论板数按骆驼 2.4.7 回收率试验 分别精密称取骆驼蓬碱、去氢骆驼
蓬碱峰计应不低于3 000，色谱见图4。 蓬碱对照品各适量，以甲醇溶解制成质量浓度分别为
0.050 0.050 2 0.304 2、0.288 5 mg/mL 的混合对照品溶液。精密称取
0.040 0.040
0.030 2 0.030 1 已准确测得含量的药材样品（批号：20180818）细粉0.06
AU 0.020 1 AU 0.020 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，分别加入上述混合对
0.010 0.010
0 0 照品溶液适量，制备低、中、高3个浓度样品，均平行3份
－0.010 －0.010
0 5 10 15 20 25 30 35 0 5 10 15 20 25 30 35 操作，然后按“2.4.5”项下方法配制供试品溶液、进样测
t，min t，min
A.混合对照品溶液 B.供试品溶液 定并计算含量及回收率。结果，骆驼蓬碱平均回收率为
0.050 100.22％（RSD＝0.51％，n＝9），去氢骆驼蓬碱平均回收
0.040
0.030 率为100.94％（RSD＝1.75％，n＝9），表明本方法准确度
AU 0.020
0.010 良好，详见表3。
0 表3 回收率试验结果（n＝9）
－0.010
0 5 10 15 20 25 30 35 Tab 3 Results of recovery tests（n＝9）
t，min
C.空白对照溶液 待测 试验 称样量， 样品含量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均回收率， RSD，
注：1.骆驼蓬碱；2.去氢骆驼蓬碱 成分 序号 g mg mg mg ％ ％ ％
骆驼蓬碱 1 0.065 39 0.706 2 0.304 2 1.012 5 100.69 100.22 0.51
Note：1.harmaline；2.harmine
2 0.067 89 0.733 2 0.304 2 1.037 7 100.10
图4 系统适用性HPLC色谱图
3 0.067 79 0.732 1 0.304 2 1.035 9 99.87
Fig 4 HPLC chromatograms of system suitability 4 0.064 23 0.693 7 0.456 3 1.151 1 100.24
5 0.062 39 0.673 8 0.456 3 1.130 2 100.02
2.4.3 线性关系考察 精密量取“2.4.1”项下混合对照
6 0.064 22 0.693 6 0.456 3 1.149 5 99.91
品溶液，以甲醇稀释制成骆驼蓬碱质量浓度分别为 7 0.066 98 0.723 4 0.152 1 0.877 0 100.99
15.22、30.44、38.05、60.88、152.20、301.40 μg/mL，去氢骆 8 0.065 96 0.712 4 0.152 1 0.863 6 99.41
驼 蓬 碱 质 量 浓 度 分 别 为 15.09、30.18、37.72、60.36、 9 0.065 94 0.712 2 0.152 1 0.865 5 100.79
去氢骆驼蓬碱 1 0.065 39 0.381 9 0.288 5 0.671 7 100.45 100.94 1.75
150.90、301.80 μg/mL的系列混合对照品溶液，按“2.4.2”
2 0.067 89 0.396 5 0.288 5 0.692 8 102.70
项下色谱条件进样测定。以对照品溶液的质量浓度（x， 3 0.067 79 0.395 9 0.288 5 0.685 2 100.28
μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，得 4 0.064 23 0.375 1 0.432 8 0.824 6 103.86
5 0.062 39 0.364 4 0.432 8 0.805 6 101.94
骆驼蓬碱的标准曲线方程为 y＝7 414.2x－35 968（r=
6 0.064 22 0.375 0 0.432 8 0.814 8 101.62
0.998 8），去氢骆驼蓬碱的标准曲线方程为y＝15 536x－ 7 0.066 98 0.391 2 0.144 3 0.535 6 100.07
88 850（r＝0.999 0）。结果表明，骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬 8 0.065 96 0.385 2 0.144 3 0.526 7 98.06
碱质量浓度分别在15.22～301.40、15.09～301.80 μg/mL 9 0.065 94 0.385 1 0.144 3 0.528 7 99.51
范围内线性关系良好。 2.4.8 样品含量测定 取 10 个批次药材样品细粉各
2.4.4 精 密 度 试 验 精 密 称 取 药 材 样 品（批 号 ： 0.1 g，按“2.4.5”项下方法制备供试品溶液、进样测定，并
20180818）细粉0.1 g，按“2.4.1（2）”项下方法制备供试品 计算样品含量。结果，10批药材的骆驼蓬碱含量范围为
溶液，再按“2.4.2”项下色谱条件连续进样6次。结果，骆 2.88～10.80 mg/g，去氢骆驼蓬碱含量范围为 5.26～7.43
驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱峰面积的 RSD 分别为 2.40％、 mg/g；以骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱的含量之和计算总生
3.10％（n＝6），表明仪器精密度良好。 物碱含量，结果详见表4。
2.4.5 重 复 性 试 验 精 密 称 取 药 材 样 品（批 号 ： 由表4可见，10批次骆驼蓬草药材的总生物碱含量
20180818）细粉 0.1 g，平行 6 份，按“2.4.1（2）”项下方法 为8.28～16.64 mg/g，故拟定该药材总生物碱含量（以骆
制备供试品溶液，再按“2.4.2”项下色谱条件进样测定， 驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱合计）不得低于6.5 mg/g。
并以标准曲线法计算含量。结果，骆驼蓬碱平均含量为 3 讨论
10.80 mg/g（RSD＝3.76％，n＝6），去氢骆驼蓬碱平均含 3.1 TLC法鉴别条件筛选
量为 5.84 mg/g（RSD＝3.62％，n＝6），表明本方法重复 骆驼蓬草中主要含有生物碱类、黄酮类等成分，本
性良好。 研究初步建立了鉴别药材中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱
2.4.6 稳 定 性 试 验 精 密 称 取 药 材 样 品（批 号 ： 的TLC法，考察了乙酸乙酯-甲醇（4 ∶ 1，V/V）、乙酸乙酯-
20180818）细粉0.1 g，按“2.4.1（2）”项下方法制备供试品 甲醇-氨水（20∶5∶1，V/V/V）等展开系统。结果显示，乙酸
溶液，分别在室温条件下放置 0、4、8、10、12、24 h 时，按 乙酯-甲醇-氨水（20 ∶ 5 ∶ 1，V/V/V）为展开系统时分离效果
“2.4.2”项下色谱条件进样测定。结果，骆驼蓬碱、去氢 较好 [7，15] 。

中国药房 2019年第30卷第20期 China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20 ·2821 ·