Page 24 - 2019年10月第30卷第20期
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稀释后，精密量取 3 mL，置于石英比色池，采用 808 nm
                                                           激光以 2.0 W/cm 的强度进行照射，每分钟记录温度 。
                                                                                                        [19]
                                                                          2
                                                           以时间（t，min）为横坐标、温度（T，℃）为纵坐标，采用
            未加磁场                              外加磁场         Origin 8.5 软件绘制光-热转换曲线。结果显示，随激光
                                                           照射时间的增加，DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 的温度持续
                                                           升高，详见图 6。这表明 TiO2@Fe3O4-MTSL 具有明显的
                                                           光热转换特性，可为该脂质体用于肿瘤的PTT治疗提供
                                                           基础。
           图4 DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL的顺磁性示意图
        Fig 4 Paramagnetic schematic diagram of DOX-TiO 2@           45
              Fe3O4-MTSL
                                                                     40
        2.3 DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL的体外释放度考察                             ℃  T，
                                                                     35
            精密量取 DOX 溶液（1 mg/mL，以水为溶剂配制）、
                                                                     30
        DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 各 1 mL，置于透析袋（截留分
        子量：12 kDa）中，释放介质为水 100 mL，设定恒温振荡                             25
        器的温度为 37 ℃、转速为 100 r/min 。分别于透析                              20
                                         [18]
                                                                       0      5     10     15     20
        0.5、1、2、4、6、12、24 h 时取样，每次取样后补充等温、同                                         t，min
        体积的水。按“2.2”项下HPLC法测定取样液中DOX的                       图 6 DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 的光-热转换曲线（808
        浓度（c，mg/mL），按公式计算累积释放率：累积释放率                             nm）
       （％）＝（c×V）/W 总 ×100％，其中，V 为释放介质体积                    Fig 6 Photothermal conversion curve of DOX-TiO 2@
       （mL），W 总为DOX的总量（mg）。另取DOX-TiO 2@Fe 3O 4-                   Fe3O4-MTSL（808 nm）
        MTSL 适量，其他条件不变，设定恒温振荡器的温度为                         2.5  DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 对 MCF-7 细 胞 中 ROS
            [13]
        43 ℃ ，按上述同样方法进行释放度试验。以时间（t，                        产生的影响考察
        min）为横坐标、累积释放率（Q，％）为纵坐标，采用 Ori-                        以 MCF-7 细胞为模型，考察 DOX-TiO2@Fe3O4-MT-
        gin 8.5软件绘制释药曲线，结果见图5。                             SL 对细胞中 ROS 产生的影响。将细胞接种于含 100
         100  DOX溶液                                        μg/mL 青霉素、100 μg/mL 链霉素、10％胎牛血清的 RP-
              DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL  40  37 ℃
                                       43 ℃
          80
                                  30                       MI 1640培养基（以下简称“培养液”），在37 ℃、5％ CO2
          60
                                                                                                      4
         ％                                                 培养箱中培养。待细胞生长至对数期时，按5×10 个/孔
         Q，  40                   ％  Q，  20                铺于 6 孔板（6 孔板底部铺上无水乙醇处理过的载玻
          20                      10
                                                           片）。当细胞融合度达到70％时，弃去原培养基，分别加
          0                        0
           0  4  8  12  16  20  24  0  4  8  12  16  20  24  入空白培养液以及含Fe3O4或TiO2@Fe3O4或DOX-TiO2@
                     t，h                     t，h           Fe3O4-MTSL 的培养液（20 μg/mL，均以 Fe3O4的量计算，
           A. DOX溶液和DOX-TiO2@Fe3O4-  B. 不同温度条件下的DOX-
              MTSL的释药曲线（37 ℃）       TiO2@Fe3O4-MTSL的释药曲线   给药浓度参照预试验结果制定）2 mL，继续培养4 h。各
        图 5 DOX 溶液和 DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 的体外释               组细胞采用808 nm激光以2.0 W/cm 的强度照射 5 min，
                                                                                          2
             药曲线                                           然后加入ROS试剂盒，于37 ℃下避光孵育30 min；弃去
        Fig 5  in vitro drug release profiles of DOX solution  培养液，以pH 7.2的磷酸盐缓冲液冲洗3次后，取出细胞
              and DOX-TiO2@Fe3O4-TSL                       爬片，在倒置显微镜下观察细胞中 ROS 的产生情况（绿
                                                                                        [20]
            由图 5A 可见，在 37 ℃条件下，DOX 溶液中药物释                  色荧光越强，则表示ROS量越多） ，结果见图7。
        放速度较快，DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL释药速度较慢，表                      由图7可见，与空白对照组比较，Fe3O4、TiO2@Fe3O4
        明后者具有明显的缓释特性。由图5B可见，在43 ℃条                         和 DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 在 808 nm 激光照射下均能
        件下，DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 的释药速度明显高于其                  产生一定量的ROS，但Fe3O4组细胞ROS荧光信号较弱，
        在 37 ℃条件下的释药速度；在第 24 h 时，其在 37、43 ℃                TiO2@Fe3O4 和 DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 组细胞中 ROS
        条件下的累积释放率分别为12.3％、36.7％，表明其体外                      的荧光信号则明显增强。这表明DOX-TiO 2@Fe 3O 4-MTSL
        释药行为具有温度依赖性，即在人体温（37 ℃）条件下释                        结合近红外激光照射可使MCF-7细胞中ROS的含量明
        放较慢，而当温度升高至其相变温度（43 ℃）时则释药速                        显增多，可为该脂质体用于肿瘤的PDT治疗提供基础。
        度明显加快。                                             3 讨论
        2.4  DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL的光热转换性能考察                      磁性纳米材料在MTSL中主要起导向和定位作用，
            取 DOX-TiO2@Fe3O4-MTSL 适量，加入 5 倍体积水             理想的磁性纳米材料应具备较小的粒径（10～20 nm）、


        中国药房    2019年第30卷第20期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20  ·2755  ·
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