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筛选出Degree值最高的5个靶标（即网络图上节点面积                        腺增生的活性成分-潜在作用靶标47个，详见表2。
        最大的5个节点），作为潜在核心靶标，并进行分子对接                                   表1 “柴胡-白术”药对的活性成分
        验证。将潜在核心靶标导入SystemsDock Web Site服务                 Tab 1 Active components of couplet medicine of“Bu-
        器（http：//systemsdock.unit.oist.jp/iddp/home/index）与“柴     pleuri Radix-A. macrocephalea Rhizoma”
        胡-白术”药对的活性成分进行分子对接，得到两者之间                          序号 来源药材 中文名（英文全称）                        OB，％  DL
        的对接评分（Docking Score）。当对接评分＜4.25，则表                  1   柴胡  乙酸芳樟酯（Linoleyl acetate）         42.10  0.20
                                                            2   柴胡  黄芩苷（Baicalin）                   40.12  0.75
        示活性成分分子和潜在核心靶标具有较弱的结合亲和                             3   柴胡  豆甾醇（Stigmasterol）               43.83  0.76
        性；对接评分为 4.25～＜5.0，则表示两者之间具有一定                       4   柴胡  异鼠李素（Isorhamnetin）              49.60  0.31
        的结合亲和性；对接评分为5.0～＜7.0，则表示两者之间                        5   柴胡  山柰素（Kaempferol）                 41.88  0.24
                                                            6   柴胡  3，5，6，7-四甲基化-2-（3，4，5-三甲氧苯基）色酮苷（3，5，6， 31.97  0.59
        具有较强的结合亲和性；对接评分≥7.0 则表示两者之                                  7-tetramethoxy-2-（3，4，5-trimethoxyphenyl）chromone）（简称为“色酮
                              [18]
        间具有很强的结合亲和性 。根据对接评分≥4.25的活                                  苷”）
                                                            7   柴胡  茵陈黄酮（Areapillin）                48.96  0.41
        性成分所占比例评价上述5个潜在核心靶标与活性成分
                                                            8   柴胡  过荜澄茄素（Cubebin）                  57.13  0.64
        之间的结合亲和性，进而验证潜在核心靶标的真实性。                            9   柴胡  长贝壳杉素A（Longikaurin A）           47.72  0.53
        1.7 “柴胡-白术”药对治疗乳腺增生相关生物学过程与                        10   柴胡  （+）-川白芷内酯[（+）-anomalin]         46.06  0.66
                                                           11   柴胡  α-菠菜甾醇（α-spinasterol）           42.98  0.76
        通路分析
                                                           12   柴胡  牵牛花色素（Petunidin）                30.05  0.31
            将“1.3”项下获取的潜在作用靶标导入DAVID数据                     13   柴胡  槲皮素（Quercetin）                  46.43  0.28
        库（https：//david.ncifcrf.gov/），选择“Select identifier”为  14  白术  14-乙酰基-12-异戊烯酰基-2E，8Z，10E-白术三醇（14-acetyl-12- 63.37  0.30
                                                                    senecioyl-2E，8Z，10E-atractylentriol）（简称为“白术三醇”）
       “Official gene symbol”、“List type”为“Gene list”、物种为
                                                           15   白术  3S，8S，9S，10R，13R，14S，17R）-10，13-二甲基-17-[（2R，5S）-5-丙 36.23  0.78
       “Human”，进行 GO 分类富集分析和 KEGG 通路富集分                             烷-2-yloctan-2- yl]-2，3，4，7，8，9，11，12，14，15，16，17-十二面体-1H-
                                                                    环戊基[a]菲-3-ol（简称为“菲-3-ol”）
        析。GO 分类富集分析结果包括分子功能（Molecular
                                                           16   白术  3β-乙酸化苍术酮（3β-acetoxyatractylone）  54.07  0.22
        function，MF）、生物过程（Biological process，BP）和细胞        17   白术  8β-乙氧基白术内酯Ⅲ（8β-ethoxy atractylenolide Ⅲ）  35.95  0.21
        组分（Cellular component，CC）三部分。对所获得的P＜               2.3  活性成分-潜在作用靶标网络构建结果
            [19]
        0.001 的生物学过程与通路，根据富集靶标数量由多到                           “柴胡-白术”药对治疗乳腺增生的活性成分-潜在作
        少进行排序，再选取富集靶标数量最多的前10条生物学                          用靶标网络图见图 1。由图 1 可见，该网络上有节点 64
        过程与通路，作为本研究的主要分析对象。结合相关研                           个、边线 257 条，其中六边形节点代表“柴胡-白术”药对
        究文献对该10条通路进行分析，筛选出可能与治疗乳腺                          活性成分，圆形节点代表潜在作用靶标，边线代表两者
        增生相关的通路，作为关键通路。                                    的相互关联。由该网络图可知，同一活性成分可以作用
        1.8  活性成分-潜在作用靶标-关键通路网络构建                          于不同靶标，而同一靶标也可对应不同活性成分，体现
            通过DAVID数据库获取富集于“1.7”项所获关键通                     出“柴胡-白术”药对能通过多成分、多靶标发挥抗乳腺
        路上的潜在作用靶标，并与相应的活性成分相匹配，得                           增生作用的特点。
        出三者之间的网络关系，并采用 Cytoscape 3.6.0 软件绘                 2.4  潜在作用靶标相互作用网络构建
        制活性成分-潜在作用靶标-关键通路网络，直观地展现                              潜在作用靶标的相互作用网络见图 2。由图 2 可
       “柴胡-白术”药对治疗乳腺增生的成分、靶标、通路三者                          见，该相互作用网络上共有节点47个、边线352条，其中
        之间的复杂网络关系，多方面阐释该药对治疗乳腺增生                           圆形节点代表潜在作用靶标，边线代表各靶标之间的相
        的作用机制。                                             互关联。根据该网络图可知，潜在作用靶标之间存在复
        2 结果                                               杂的相互作用关系，因此本团队推测“柴胡-白术”药对
        2.1 “柴胡-白术”药对活性成分获取结果                              治疗乳腺增生不仅是通过多成分作用于多靶标来发挥
            共检索获得“柴胡-白术”药对活性成分 17 个，其中                     网络调节作用，还可能会通过潜在作用靶标之间的相互
        柴胡活性成分 13 个、白术活性成分 4 个，主要包括乙酸                      影响，进而产生了复杂的调节关系，发挥治疗作用。
        芳樟酯、黄芩苷、3β-乙酸化苍术酮、8β-乙氧基白术内酯                       2.5 核心靶标的筛选及验证结果
        Ⅲ等，详见表1。                                               由图2可见，潜在核心靶标（即节点面积最大的5个
        2.2 活性成分-潜在作用靶标的获取结果                               节点）分别为 PRKCE、PRKCA、AKT1、PIK3CA、HRas。
            根据 DRAR-CPI 服务器检索结果，共获得“柴胡-白                   上述靶标与“柴胡-白术”药对的17个活性成分的分子对
        术”药对活性成分的预测靶标 128 个；与 Genecards 数据                 接结果显示，PRKCE、PRKCA 与 15 个活性成分（均占
        库和 OMIM 数据库中获得的乳腺增生的疾病相关靶标                         88.2％）具有一定或更强的结合亲和性，AKT1、PIK3A、
        进行对比取交集后，共筛选出“柴胡-白术”药对治疗乳                          HRas与14个活性成分（均占82.4％）具有一定或更强的


        中国药房    2019年第30卷第18期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18  ·2527  ·
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