Page 83 - 2019年9月第30卷第18期
P. 83
和疼痛 [4-5] 。流行病学资料显示,有70%~80%的女性患 供理论依据。
有不同程度的乳腺增生,且多见于 25~45 岁的女性,其 1 资料与方法
癌变率约为10%~20% [6-7] ,给患者生理和心理健康带来 1.1 药物活性成分的获取
了严重的危害。 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP,
乳腺增生疾病最早见于汉代华佗著《中藏经》,称为 http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php),分别以“柴胡”“白术”
“乳癖”。中医认为其发病病机主要是肝气郁结导致肝 “Bupleurum”“Atractylodes”等为中英文关键词,以OB值
[16]
脾两伤、痰气互结,气血双亏导致气血瘀滞 。同时,现 (口服吸收度)≥30%、DL值(类药性)≥0.18 为限定条
[8]
代临床研究也发现,肝气郁结是乳腺增生的常见发病机 件检索,获得该药对具有抗乳腺增生作用的活性成分。
[9]
制 。因此,对于乳腺增生,中医的主要治法是疏肝健脾 1.2 药物活性成分的预测靶标及对应基因的获取
疗法,以达到调理肝脾、舒畅气机的目的。“柴胡-白术” 利用Chembiodraw Ultra 12.0软件绘制“柴胡-白术”
是疏肝健脾疗法中的常用药对,本课题组通过临床实践 药对活性成分的 3D 结构图,并将其结构文件上传至
观察发现,运用“柴胡-白术”药对治疗乳腺增生可取得 DRAR-CPI 服务器(https://omictools.com/drar-cpi-tool),
[17]
[10]
良好的效果 。现代药理学研究表明,以柴胡、白术为 选取“Z-score<-0.5”的蛋白 ,剔除重复部分后,将所
君臣药组方的逍遥散对雌性小鼠具有拟雌激素样作用, 得结果作为“柴胡-白术”药对活性成分的预测靶标。在
可增加正常小鼠子宫的质量,提高其雌二醇水平;而对 Uniprot 数据库(https://www.uniprot.org/)中输入各预测
于某些由于雌激素过高导致的疾病,如乳腺增生和子宫 靶标的具体名称,限定物种为“Human”,获取预测靶标
的对应基因。
肌瘤,逍遥散又能发挥拮抗雌激素的作用,降低血清中
1.3 “柴胡-白术”药对治疗乳腺增生的潜在作用靶标的
雌二醇水平,并调节孕酮含量 [11-12] 。因此,本团队认为
获取
“柴胡-白术”药对对雌激素水平具有双向调节作用,这
分别以“Hyperplasia of mammary glands”“Mamma-
可能与其治疗乳腺增生的作用机制相关。然而,目前对
ry hyperplasia”“Breast hyperplasia”为关键词,在 Gene-
“柴胡-白术”药对的药理作用机制研究尚不够深入,即
cards 数据库(https://www.genecards.org/)和 OMIM 数据
使有较多关于其抗乳腺增生方面的机制研究,却只停留
库(https://www.omim.org/)中检索获得乳腺增生的疾病
在该药对调节内分泌以及改善乳腺组织形态结构层面,
相关靶标及其对应基因。采用Excel 2013软件录入所获
而关于该药对如何减轻乳腺组织对高浓度雌激素的反
疾病相关靶标和“1.2”项下获得的“柴胡-白术”药对活性
应,调节血清中雌激素、孕酮、雌二醇水平等机制尚未阐
成分预测靶标的对应基因,并进行两者对比,筛选出交
明,也未对该药对中的有效成分在体内抗乳腺增生的多
集部分,根据交集基因筛选出对应的靶标,作为“柴胡-
靶点整合协同作用机制进行深入探讨。
白术”药对治疗乳腺增生的潜在作用靶标(下文中均以
一般认为,中药具有“多成分、多靶点、低亲和力、低
非斜体的基因名代表其对应的靶标)。
选择性”的作用特点 ,所以使用现代药理学理论阐述
[13]
1.4 活性成分-潜在作用靶标网络的构建与分析
中药的药效物质基础和作用机制一直是研究的难点和
将“1.3”项下获得的“柴胡-白术”药对活性成分治疗
关键点。网络药理学是基于系统生物学理论对生物系
乳腺增生的潜在作用靶标导入 Cytoscape 3.6.0 软件,构
统进行网络分析,选取特定信息节点进行多靶点药物分
建活性成分-潜在作用靶标网络。通过网络图直观展示
子设计的新学科,其融合了系统生物学、多向药理学、生
活性成分与潜在作用靶标之间的关系,并分析“柴胡-白
物信息学、计算机科学等多学科的技术和内容,能够进 术”药对治疗乳腺增生的作用特点。
行“疾病表型-基因-靶点-药物”等多层次网络的构建,探 1.5 潜在作用靶标的相互作用网络构建与分析
[14]
索药物与疾病间的关联性,阐明药物作用机制 。其整 将“1.3”项下获得的“柴胡-白术”药对活性成分治疗
体性、系统性及复杂性的研究角度和研究方法,正好与 乳腺增生的潜在作用靶标导入 String 数据库(https://
中医药的作用特点相符合 。 string-db.org),将物种限定为“Homo sapiens”,获取潜在
[15]
本研究基于网络药理学方法,以“柴胡-白术”药对 作用靶标的相互作用关系。将该关系文件导入 Cyto-
中具有抗乳腺增生作用的主要活性成分为研究对象,通 scape 3.6.0软件,绘制潜在作用靶标相互作用网络,并利
过构建“药物-成分-靶点-疾病”网络,全面系统地预测和 用 Cytoscape 3.6.0 软件中的“NetworkAnalyzer”工具对
挖掘其作用靶点,同时结合基因本体(Gene ontology, 该网络进行分析,获取潜在作用靶标之间的连接度(De-
GO)分类富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyo- gree 值),并根据 Degree 值绘制最终的潜在作用靶标相
to encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集 互作用网络图。
分析,对“柴胡-白术”药对治疗乳腺增生的潜在作用机 1.6 核心靶标的筛选及验证
制进行分析和预测,以期为该药对的进一步开发利用提 基于“1.5”项下构建的潜在作用靶标相互作用网络,
·2526 · China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18 中国药房 2019年第30卷第18期