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楂酸、科罗索酸、桦木酸、齐墩果酸、熊果酸的平均含量 40 ℃）等条件]进行测定，记录峰面积并计算样品中各成
分别为106.9、112.0、236.4、2 513.5、2 572.6 µg/g，RSD分 分的含量。结果表明，各成分含量的 RSD 均小于 3％，
别为 1.65％、1.59％、1.53％、1.22％、1.43％（n＝6），路路 本方法可满足试验要求，耐用性良好。
通酸未检出，表明本方法重复性良好。 2.11 样品含量测定
2.9 加样回收率试验 取各批药材样品适量，按“2.2.2”项下方法制备供试
取药材样品（茎，批号：20170801）约0.04 g，共6份， 品溶液，按“2.3”项下方法进行衍生化处理，再按“2.1”项
分别加入一定量的混合对照品溶液适量，按“2.2.2”项下 下试验条件进行测定，记录峰面积并按外标法计算样品
方法制备供试品溶液，按“2.3”项下方法进行衍生化处 中6种成分的含量，结果见表3。
理，再按“2.1”项下试验条件进行测定，记录峰面积并按 表3 样品含量测定结果（n＝6，µg/g）
外标法计算含量及加样回收率，结果见表2。 Tab 3 Results of content determination of samples
表2 加样回收率试验结果（n＝6） （n＝6，µg/g）
Tab 2 Results of recovery tests（n＝6） 批号 部位 山楂酸 科罗索酸 桦木酸 路路通酸 齐墩果酸 熊果酸
20170801 根 11.3 23.1 未检出 未检出 40.9 66.3
取样量， 样品含量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回收率， RSD，
待测成分 茎 105.2 110.0 234.2 未检出 2 512.7 2 574.7
g μg μg μg ％ ％ ％
叶 46.2 129.5 11.9 未检出 100.3 226.7
山楂酸 0.038 3.998 2.0 5.983 99.25 99.28 1.00 20170802 根 9.3 26.5 未检出 未检出 34.2 60.7
0.039 4.103 2.0 6.072 98.45 茎 112.8 101.5 203.4 未检出 2 420.7 2 378.6
0.041 4.313 2.0 6.324 100.55 叶 35.1 138.3 5.2 未检出 102.3 253.1
0.040 4.208 2.0 6.211 100.15 20170803 根 13.2 35.1 未检出 未检出 55.4 80.7
0.042 4.418 2.0 6.376 97.90 茎 132.7 111.2 261.8 未检出 2 106.3 2 369.4
0.038 3.998 2.0 5.985 99.35 叶 46.1 130.1 11.8 未检出 101.7 325.7
科罗索酸 0.038 4.184 2.0 6.167 99.15 99.79 1.74 20170804 根 12.4 20.8 未检出 未检出 37.3 52.8
0.039 4.294 2.0 6.268 98.70 茎 142.3 130.4 262.7 未检出 2 732.5 2 598.3
0.041 4.514 2.0 6.520 100.30 叶 52.2 128.8 14.1 未检出 98.7 212.6
0.040 4.404 2.0 6.398 99.70 20170805 根 18.2 35.6 未检出 未检出 54.2 80.9
0.042 4.624 2.0 6.683 102.95 茎 104.6 109.5 231.7 未检出 2 548.3 2 231.3
0.038 4.184 2.0 6.143 97.95 叶 68.5 112.9 50.8 未检出 145.3 226.3
桦木酸 0.038 8.900 2.0 10.820 96.00 98.71 2.00 20170806 根 22.3 36.1 未检出 未检出 45.3 70.2
0.039 9.134 2.0 11.139 100.25
茎 106.3 111.2 236.5 未检出 1 943.2 2 365.6
0.041 9.602 2.0 11.586 99.20 叶 66.3 148.1 11.7 未检出 100.5 256.7
0.040 9.368 2.0 11.392 101.20
0.042 9.836 2.0 11.811 98.75 3 讨论
0.038 8.900 2.0 10.837 96.85 有研究认为，三萜酸类成分本身并无共轭体系，因
路路通酸 0.038 0. 2.0 1.936 96.80 99.20 4.25 此采用紫外-分光光度法很难准确地测定其含量 [15-16] 。
0.039 0. 2.0 1.985 99.25
0.041 0. 2.0 2.078 103.90 此外，由于熊果酸与齐墩果酸、山楂酸与科罗索酸互为
0.040 0. 2.0 1.865 93.25 同分异构体，采用液相、气相等色谱法很难将这两对同
0.042 0. 2.0 2.084 104.20 分异构体分离。而有研究发现，采用柱前衍生荧光标记
0.038 0. 2.0 1.956 97.80 技术可增大同分异构体间的差异，从而实现其在液相色
齐墩果酸 0.038 95.483 2.0 97.435 97.60 98.24 3.58
[15]
0.039 97.995 2.0 99.982 99.35 谱上的分离 。为此，本研究参考上述文献，采用HPLC/
0.041 103.021 2.0 104.983 98.10 FLD-APCI/MS法对悬钩木中 6 种三萜酸类成分进行测
0.040 100.508 2.0 102.352 92.20 定，结果表明，该方法灵敏度高、选择性强。
0.042 105.533 2.0 107.599 103.30
0.038 95.483 2.0 97.461 98.90 本研究考察了不同色谱柱（Agilent Hypersil C18、Agi-
熊果酸 0.038 97.839 2.0 99.802 98.15 99.70 2.03 lent Hypersil BDS C8、Agilent Hypersil BDS C18、Agilent
0.039 100.413 2.0 102.369 97.80 Spherisorb C18 ）的分离效果，结果显示，以Agilent Hyper-
0.041 105.563 2.0 107.558 99.75
0.040 102.990 2.0 105.060 103.50 silC18为色谱柱时的分离度最好。同时，对甲醇-水、乙
0.042 108.137 2.0 110.125 99.40 腈-水等不同流动相体系进行了比较，结果发现，以甲醇
0.038 97.839 2.0 99.831 99.60 为流动相时柱压较高、基线偏移较大，而以5％乙腈水溶
2.10 耐用性试验 液-乙腈洗脱效果最好、基线平稳，因此选择 5％乙腈水
取药材样品（茎，批号：20170801）适量，按“2.2.2”项 溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱。
下方法制备供试品溶液，按“2.3”项下方法进行衍生化处 含量测定结果显示，悬钩木各部位中三萜酸类成分
理，再按“2.1”项下试验条件[分别改变不同色谱柱（Agi- 含量存在明显差异，悬钩木茎中齐墩果酸和熊果酸含量
lent Hypersil C18、Agilent Hypersil BDS C8、Agilent Hyper- 较高，分别为 2 732.5、2 598.3 µg/g，其次为悬钩木叶，而
sil BDS C18 ）、流速（0.9、1.0、1.1 mL/min）、柱温（30 、35、 悬钩木根中含量最低；悬钩木茎中的山楂酸、桦木酸和

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