Page 89 - 2019年8月第30卷第16期

藏药悬钩木收载于《医学四续》 、《月王药诊》 和 取药材将其根、茎、叶分离后晾干，分别粉碎后过 40 目
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《晶珠本草》 等典籍中，为常用藏药之一，藏文译音为 筛，室温贮存，备用。
“干扎嘎日”，为蔷薇科悬钩子属植物粉枝莓（Rubus bi- 2 方法与结果
florus Buch.-Ham. ex Smith）的干燥、去皮茎或枝，分布 2.1 试验条件
于我国陕西、甘肃、四川、青海、西藏等地 [4-5] 。《晶珠本草》 2.1.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil C18 （200 mm×4.6
中记载：“悬钩木根苦，茎微甘苦，皮微辛，叶苦涩，果实 mm，5 µm）；流动相：5％乙腈水溶液（A）-乙腈（B），梯度
甜如蜜，根、茎、叶、果治隆热病和痰病，尤其对肺病特 洗脱（0～15 min，60％B→75％B；15～30 min，75％B→
[3]
效，也治热性时疫，叶子可清胆病”。有研究发现，悬钩 90％B；30～35 min，90％B→100％B），洗脱时间40 min；
木中含有多种生物活性成分，如黄酮类、二萜类、三萜及 流速：1.0 mL/min；荧光激发波长：300 nm，发射波长：
三萜酸类、鞣质类等成分 [6-8] ，具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗 395 nm；柱温：35 ℃；进样量：10 μL。在该色谱条件下，
过敏及保肝等作用 [9-10] 。三萜酸类成分为其特征成分， 所有待测成分理论板数均不低于 3 000，分离度均大于
具有抗人类免疫缺陷病毒、抗肿瘤、降血脂、抗氧化和抗 1.5，空白溶液对测定无干扰，详见图1。
菌等作用 [11-12] 。然而，目前对于悬钩木的质量控制存在
600
一定的局限性，如《藏药标准》中仅有其性状鉴别，未见
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有其他相关规定 ；《青海省藏药标准》中也未设有含量 信号强度 400 1 2 3 4 6
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测定项或理化鉴别项 。因悬钩木中的三萜酸类成分 200 5
不具有荧光性，采用衍生化可以使三萜酸类成分与衍生 0 5 10 15 20 25 30 35
化试剂的荧光团结合，以提高检测灵敏度，故为更好地 时间，min
A.混合对照品溶液
[15]
控制悬钩木的质量，本研究参考相关文献 ，采用柱前
60
衍生高效液相色谱-荧光检测/质谱联用法（HPLC/FLD- 50
APCI/MS）同时测定了藏药悬钩木中山楂酸、科罗索酸、 信号强度 40 6
30
桦木酸、路路通酸、齐墩果酸、熊果酸等6种三萜酸类成 20 1 2 5
分的含量，旨在为完善其质量标准提供参考。
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1 材料 时间，min
B.供试品溶液（根）
1.1 仪器 1 400
1 200
1100型离子阱液相色谱-质谱联用仪，包括G1311A 1 000 6
型四元梯度泵、G1322A 型在线真空脱气机、G1321A 型 信号强度 800 5
600
荧光检测器、G1316A 型自动进样器（美国 Agilent 公 400
200 1 2 3
司）；MS204TS型、MS403TS型电子分析天平[梅特勒-托
5 10 15 20 25 30 35
利多国际贸易（上海）有限公司]；KQ-100DE型数控超声 时间，min
C.供试品溶液（茎）
波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 200
1.2 药品与试剂 150
齐 墩 果 酸 对 照 品（批 号 ：110709-201808，纯 度 ： 信号强度 100 6
91.1％）、熊果酸对照品（批号：110742-201823，纯度： 50 1 2 5
3
99.9％）、路路通酸对照品（批号：111735-201602，纯度：
5 10 15 20 25 30 35
96.8％）均购自中国食品药品检定研究院；山楂酸对照品 时间，min
D.供试品溶液（叶）
（批号：4373-41-5，纯度：＞98％）、科罗索酸对照品（批
号：4547-24-4，纯度：＞98％）、桦木酸对照品（批号： 600
472-15-1，纯度：＞98％）均购自北京万佳首化生物科技 信号强度 400
有限公司；2-（7H-二苯并[a，g]咔唑）乙基对甲苯磺酸酯 200
（DBCETS，衍生化试剂，曲阜师范大学生命有机分析重 0
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点实验室自制）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯， 时间，min
E.空白溶液
水为纯净水。
注：1.山楂酸；2.科罗索酸；3.桦木酸；4.路路通酸；5.齐墩果酸；6.熊
1.3 药材
果酸
悬钩木药材采自青海、甘肃和西藏等地（批号： Note：1. haw acid；2. corosolic acid；3. betula acid；4. betulonic
20170801、20170802、20170803、20170804、20170805、 acid；5. oleanolic acid；6. ursolic acid
20170806），经青海省藏医药研究院多杰研究员鉴定为蔷 图 1 高效液相色谱图
薇科植物粉枝莓（Rubus biflorus Buch.-Ham.ex Smith）。 Fig 1 HPLC chromatograms

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