Page 96 - 2019年8月第30卷第16期
P. 96

3.1.2  骨吸收功能      空白对照组骨吸收陷窝数量较多,                  表 2   女贞子提取物对成骨细胞增殖和 APK 活性的影
        且面积较大。与空白对照组比较,各给药组骨吸收陷窝                                 响(x±±s,n=3)
        数及面积均有不同程度的变化;其中,女贞子醇提物各                           Tab 2 Effects of L. lucidi Fructus extract on osteo-
        剂量组和水煎物高剂量组细胞的骨吸收陷窝数量及骨                                    blast proliferation and AKP activity(x ±± s,
        吸收陷窝面积百分率,以及水煎物中剂量组细胞骨陷窝                                   n=3)
        面积百分率均显著减少或降低,而水煎物低剂量组细胞                           组别                  相对增殖率,%          APK活性,U/g prot
        骨吸收陷窝数量显著增多,差异均有统计学意义(P<                           空白对照组                0.                1.440±0.196
                                                           女贞子醇提物低剂量组          19.142±0.291 **   12.554±0.231 **
        0.05或P<0.01),详见图2、表1。                              女贞子醇提物中剂量组          23.354±0.229 **   15.995±0.244 **
                                                           女贞子醇提物高剂量组         -84.631±0.163 **   23.246±0.743 **
                                                           女贞子水煎物低剂量组          20.815±0.418 **    5.276±0.132 **
                                                           女贞子水煎物中剂量组          15.527±0.261 **   21.279±0.589 **
                                                           女贞子水煎物高剂量组         -19.144±0.633 **   15.549±0.267 **
                                                               注:与空白对照组比较, P<0.01
                                                                               **
                                                                                   **
                                                               Note:vs. blank control group, P<0.01
                 A.空白对照组          B.女贞子醇提物低剂量组
                                                           齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、环烯醚萜苷、酪醇特女贞苷
                                                           等)都具有抗OP的活性          [12-13] 。目前学者普遍认为,女贞
                                                           子提取物可通过促进成骨细胞分化、阻滞破骨细胞激活
                                                           或增殖、抑制基质金属酶表达等途径来发挥抗 OP 作
                                                           用  [14-15] ,但目前尚鲜见其对破骨细胞分化及成骨细胞增
             C.女贞子醇提物中剂量组         D.女贞子醇提物高剂量组             殖影响的相关报道。
                                                               本研究以 1α,25-(OH) 2VitD3诱导兔原代骨髓细胞
                                                           来获取破骨细胞,以抗坏血酸、甘油磷酸钠、地塞米松诱
                                                           导 MC3T3-E1Subclone 14 细胞来获取成骨细胞,初步探
                                                           讨了不同剂量女贞子醇提物和水煎物对破骨细胞分化
              E.女贞子水煎物低剂量组        F.女贞子水煎物中剂量组             及骨吸收功能、破骨细胞增殖及相关酶活性的影响。
                                                           1α,25-(OH) 2VitD3是参与破骨细胞形成与激活过程的
                                                           必要因子,可通过诱导骨髓干细胞分化而形成破骨细
                                                           胞;同时,其可诱导破骨细胞前体细胞(如骨髓单核细胞)
                                                                                                     [16]
                                                           形成阳性多核细胞,并使破骨细胞具有骨吸收功能 。其
                        G.女贞子水煎物高剂量组                       中,TRACP 活性可用以衡量破骨细胞分化及其骨吸收
        图2   女贞子提取物对破骨细胞骨吸收功能影响的显微                         能力,该酶被公认为破骨细胞的标志性酶 。此外,骨
                                                                                                [17]
             图(甲苯胺蓝染色,×100)                                吸收陷窝是破骨细胞骨吸收直接作用的结果,其数量及
        Fig 2  Micrographs of the effects of L. lucidi Fructus  面积大小亦可直接反映破骨细胞的骨吸收功能 。为
                                                                                                     [18]
              extract on osteoclast resorption function(tolui-  此,本研究考察了女贞子提取物对破骨细胞分化和骨吸
              dine blue staining,×100)                     收功能的影响。结果显示,女贞子醇提物及水煎液各剂

        3.2 女贞子提取物对成骨细胞增殖的影响                               量组 TRACP 阳性细胞、骨吸收陷窝数及面积均有不同
            与空白对照组比较,女贞子醇提物和水煎物低、中                         程度的变化,其中女贞子醇提物各剂量组和水煎物高剂
        剂量组细胞的相对增殖率(>0)均显著升高,而两者高                          量组的 TRACP 活性及阳性细胞数、骨吸收陷窝数量及
        剂量组细胞的相对增殖率(<0)均显著降低,差异均有                          面积百分率,以及水煎物中剂量组的 TRACP 活性及阳
        统计学意义(P<0.01),详见表2。                                性细胞数、骨吸收陷窝面积百分率均较空白对照组均显
        3.3 女贞子提取物对成骨细胞APK活性的影响                            著降低或减少,而水煎物低剂量组细胞的骨吸收陷窝数
            与空白对照组比较,女贞子醇提物和水煎物各剂量                         量显著增多。这提示不同剂量女贞子提取物可不同程
        组细胞的 APK 活性均显著升高,差异均有统计学意义                         度地抑制破骨细胞分化,且醇提物和水煎物对其骨吸收
       (P<0.01),详见表2。                                      功能的影响存在差异,这可能与提取物中的成分差异有
        4 讨论                                               关,但有待后续研究予以证实。
            现代药理研究表明,女贞子具有保肝、调节免疫、强                            当骨吸收大于骨形成时,可使机体骨量丢失从而导
        心、抗炎、抗 OP 及抗肿瘤等作用,且其多种活性成分(如                       致 OP 等相关骨疾病的发生 。成骨细胞是骨形成的物
                                                                                   [4]

        中国药房    2019年第30卷第16期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 16  ·2251  ·
   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101