Page 90 - 2019年8月第30卷第16期

2.1.2 质谱条件 大气压化学电离源（APCI），正离子模
式；喷雾压力：60 psi；干燥气流量：9 L/min；干燥气温度：
350 ℃；气化温度：450 ℃；毛细管电压：3 500 V。在该质
谱条件下，三萜酸类成分（以齐墩果酸为例）衍生物的
桦木酸
一、二级质谱图及相关裂解模式见图2。 衍生化
DBCETS 衍生化产物
图3 DBCETS与桦木酸的衍生反应
2.5×10 7 m/z＝294.4 1.0×10 8 MS Fig 3 Derivatization reaction of DBCETS with betula
m/z＝409.3 0.8×10 8 747.8
+
2.0×10 7 MS/MS 409.3 0.6×10 8 M ：m/z＝747.8 acid
Interns 1.5×10 7 7 [M-H2O] + 730.0 0.4×10 8 8 按“2.1”项下试验条件进行测定，记录峰面积。以各待测
0.2×10
1.0×10
294.4 0 成分质量浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标
528.1 200 600 1 000 1 400
0.5×10 7
m/z 进行线性回归，结果见表1。
863.9
0 表1 回归方程与线性范围
200 400 600 800 1 000 1 200 1 400
m/z Tab 1 Regression equation and linear range
图2 齐墩果酸衍生物的MS/MS图谱及裂解模式
待测成分 回归方程 线性范围，μg/mL r
Fig 2 MS/MS spectrum and pyrolysis model of olea- 山楂酸 y＝25.72x－0.49 0.025～6.4 0.999 6
nolic acid derivative 科罗索酸 y＝25.27x－13.49 0.025～6.4 0.999 8
桦木酸 y＝34.52x－1.96 0.025～6.4 0.999 8
2.2 溶液的制备
路路通酸 y＝27.53x－4.95 0.025～6.4 0.999 7
2.2.1 混合对照品溶液 精密称取山楂酸、科罗索酸、 齐墩果酸 y＝26.36x－4.59 0.025～6.4 0.999 9
桦木酸、路路通酸、齐墩果酸、熊果酸对照品各适量，分 熊果酸 y＝30.38x－0.89 0.025～6.4 0.999 8
别置于10 mL量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀， 2.5 定量限与检测限考察
制成质量浓度均为2.0 mg/mL的单一对照品贮备液。分 取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，用乙腈倍比稀
别精密吸取上述单一对照品贮备液各1 mL，置于100 mL 释，按“2.3”项下方法进行衍生化处理，再按“2.1”项下试
量瓶中，加乙腈定容，摇匀，制得质量浓度均为20 µg/mL 验条件进行测定，以信噪比10 ∶ 1、3 ∶ 1分别计算定量限、
的混合对照品溶液。 检测限。结果，山楂酸、科罗索酸、桦木酸、路路通酸、齐
2.2.2 供试品溶液 精密称取药材样品（茎）40 mg，置 墩果酸、熊果酸的定量限分别为 5.11、4.78、4.42、4.22、
于 10 mL 玻璃试管中，加乙醇 5 mL，水浴超声（功率： 4.29、4.51 ng/mL，检测限分别为 1.42、1.27、1.30、1.28、
200 W，频率：40 kHz）处理 30 min，以 3 000 r/min 离心 5 1.16、1.22 ng/mL。
min；取下层残渣，加乙醇2 mL，水浴超声；合并2次超声 2.6 精密度试验
提取液，置于10 mL玻璃试管中，氮气流下吹干后，加乙 取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，按“2.3”项下方
腈1 mL复溶，即得供试品溶液。 法进行衍生化处理，再按“2.1”项下试验条件连续测定6
2.2.3 空白溶液 以乙腈为空白溶液。 次，记录峰面积。结果，山楂酸、科罗索酸、桦木酸、路路
2.2.4 衍生化试液 精密称取DBCETS 23.25 mg，置于 通酸、齐墩果酸、熊果酸峰面积的 RSD 分别为 2.55％、
10 mL量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀，制得浓 3.20％、2.72％、4.30％、2.10％、3.30％（n＝6），表明仪器
度为 5.0×10 － 3 mol/L 的 DBCETS 溶液，于 4 ℃保存， 精密度良好。
备用。 2.7 稳定性试验
2.3 衍生化处理 取“2.2.2”项下供试品溶液（茎，批号：20170801）适
取“2.2.1”项下混合对照品溶液50 µL，置于2 mL安 量，按“2.3”项下方法进行衍生化处理，分别于室温下放
瓿瓶中，加入干燥催化剂（K2CO3 ）30 mg、“2.2.4”项下衍 置0、3、6、9、12 h时按“2.1”项下试验条件进行测定，记录
生化试液150 µL、二甲基甲酰胺100 µL，封口后于90 ℃ 峰面积。结果，山楂酸、科罗索酸、桦木酸、齐墩果酸、熊
水浴反应 30 min；待反应结束后，加乙腈 300 µL 稀释， 果酸峰面积的RSD分别为1.48％、1.01％、1.43％、1.11％、
经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，按“2.1”项下试验 1.72％（n＝5），路路通酸未检出，表明供试品溶液于室温
条件进行测定。DBCETS与三萜酸类成分（以桦木酸为 下放置12 h内稳定性良好。
例）的衍生反应见图3。 2.8 重复性试验
2.4 线性关系考察 取药材样品（茎，批号：20170801）适量，共 6 份，按
取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，加乙腈稀释， “2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.3”项下方法进行
制得质量浓度为0.025、0.1、0.4、1.6、6.4 μg/mL的系列线 衍生化处理，再按“2.1”项下试验条件进行测定，记录峰
性关系工作溶液，按“2.3”项下方法进行衍生化处理，再 面积并按外标法计算样品中6种成分的含量。结果，山

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