Page 84 - 2019年1月第30卷第2期
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0.30                             7            2.6 精密度试验
             0.25                                              精密量取“2.2.1”项下混合对照品溶液 10 μL,按
             0.20
            AU  0.15                                      “2.1”项下色谱条件连续进样测定6次,记录峰面积。结
             0.10          3        5                      果,儿茶素、栀子苷、二氢杨梅素、花旗松素、芦丁、杨梅
             0.05     1  2         4     6
               0                                           素、槲皮素峰面积的 RSD 值分别为 0.82%、0.64%、
                0  10  20  30  40  50  60  70  80  90  100  110  1.22%、0.90%、0.38%、1.71%、0.84%(n=6),表明仪器
                                t,min
                            A.混合对照品溶液                      精密度良好。
             2.50                                          2.7 稳定性试验
             2.00                                              取“2.2.2”项下供试品溶液(批号:20160130)10 μL,
                           3
             1.50                  4
            AU           2                                 分别于室温下放置 0、2、4、12、24、48 h 时按“2.1”项下
             1.00
                                                           色谱条件进样测定,记录峰面积。结果,儿茶素、栀子
             0.50     1             5    6   7
               0                                           苷、二氢杨梅素、花旗松素、芦丁、杨梅素、槲皮素的峰面
                0  10  20  30  40  50  60  70  80  90  100  110  积RSD值分别为0.67%、0.89%、1.00%、1.31%、0.51%、
                                t,min
                              B.供试品溶液                      0.29%、1.90%(n=6),表明供试品溶液在室温下放置
                                                           48 h内稳定性良好。
             2.50
                                                           2.8 重复性试验
             2.00
             1.50                                              精密称取同一批森登-4汤散样品(批号:20160130)
            AU
             1.00                                          适量,按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,共 6 份,再按
             0.50                                         “2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面积并计算样品平
              0                                            均含量。结果,儿茶素、栀子苷、二氢杨梅素、花旗松素、
               0  10  20  30  40  50  60  70  80  90  100  110
                                 t,min                     芦丁、杨梅素、槲皮素峰面积 RSD 值分别为 0.16%、
                             C.阴性对照品溶液
           注:1.儿茶素;2.栀子苷;3.二氢杨梅素;4.花旗松素;5.芦丁;6.杨梅素;7.槲皮素   0.18%、0.12%、0.007 5%、0.005 2%、0.004 8%、0.006 3%
           Note:1. catechin;2. jasminoidin;3. dihydromyricetin;4. texifolin;5. rutin;  (n=6),含量的平均值分别为1.592、3.978、3.866、0.367 8、
        6. myricetin;7. quercetin                          0.125 4、0.543 3、0.187 6 mg/g,表明本方法重复性良好。
                      图1   高效液相色谱图                         2.9  加样回收率试验
                   Fig 1  HPLC chromatograms                   取森登-4汤散样品(批号:20160130)适量,共6份,
        6次,取平均值。以待测成分质量浓度(x,μg/mL)为横坐                      每份约 1.000 0 g,共 6 份,精密称定,分别置于 25.00 mL
        标、峰面积(y)为纵坐标进行线性回归,线性关系考察                          量瓶中,分别精密加入儿茶素(0.358 5 mg/mL)、栀子苷
        结果详见表1。                                            (0.215 5 mg/mL)、二氢杨梅素(0.545 0 mg/mL)、花旗松
                  表1   线性关系考察结果(n=6)                       素(0.651 5 mg/mL)、芦 丁(0.265 5 mg/mL)、杨 梅 素
        Tab 1 Results of linear relationship investigation(n=6)  (0.375 3 mg/mL)和槲皮素(0.338 0 mg/mL)单一对照品
        待测成分           回归方程             r      线性范围,μg/mL  溶液,其中低浓度组加1.00 mL、中浓度组加2.00 mL、高
                        7
        儿茶素         y=1×10 x-1.013×10 3  0.999 6  8.590~2 290  浓度组加 3.00 mL。按“2.2.2”项下方法制备供试品溶
        栀子苷         y=1×10 x+2.552×10 5  0.999 7  10.56~3 901  液,再按“2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面积并计
                        7
                        7
        二氢杨梅素       y=2×10 x+4.845×10 5  0.999 2  13.00~3 958  算加样回收率,详见表2。
                        7
        花旗松素        y=2×10 x-1.197×10 5  0.999 9  8.815~564.2
                        7
        芦丁          y=1×10 x-6.300×10 4  0.999 7  4.030~257.8  2.10  样品含量测定
        杨梅素         y=2×10 x+2.956×10 5  0.999 1  8.130~750.5  取 6 批样品各适量,分别按“2.2.2”项下方法制备供
                        7
                        7
        槲皮素         y=3×10 x-1.417×10 5  0.999 4  7.075~454.2
                                                           试品溶液,再按“2.1”项下色谱条件进样测定,并行测定
            结果表明,7种成分在一定浓度范围内,其质量浓度                        3次,记录峰面积并计算样品平均含量,测定结果见表3。
        与峰面积之间具有良好的线性关系。                                   3 讨论
        2.5 检测限与定量限考察                                      3.1 供试品溶液制备方法的选择
            精密量取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量,倍比稀                         本试验分别用 95%乙醇回流提取法(回流提取 2
        释,按“2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次,记录峰面                      次,每次 1.5 h)和超声提取法提取(功率:300 W,频率:
        积。当信噪比为3 ∶ 1时得检测限;当信噪比10 ∶ 1时得定                    50 kHz,超声2次,每次20 min)供试品中7种成分,对所
        量限。结果,儿茶素、栀子苷、二氢杨梅素、花旗松素、芦                         得到的提取物的HPLC谱图做了比较,从中选择供试品
        丁、杨梅素、槲皮素的检测限分别为 0.429 5、0.264 0、                  提取方法。结果发现,采用超声提取法制备供试品溶液
        0.325 0、0.220 4、0.201 5、0.203 2、0.176 9 μg/mL,定量限  的 HPLC 谱图中 7 种成分的干扰成分少,色谱峰形和分
        分别为 1.030、1.321、1.302、1.397、1.637、0.813 0、0.707 5  离度均优于乙醇回流提取方法所提取物。因此,本试验
        μg/mL。                                             选择超声提取法制备供试品溶液。


        中国药房    2019年第30卷第2期                                               China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 2  ·223  ·
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