Page 83 - 2019年1月第30卷第2期

物质基础及其抗风湿作用机制及组方原理，内蒙古民族
大学许良课题组研究建立了同时测定 森登-4汤散中儿
[9]
茶素、栀子苷、二氢杨梅素、花旗松素、芦丁、杨梅素和槲
皮素 7 种活性成分的高效液相色谱-二极管阵列检测法
（HPLC-DAD）。
1 材料
1.1 仪器
600型高效液相色谱仪，配有2996型光电二极管检
测器、717 型自动进样器、600 型四元泵（美国 Waters 公
司）；AB-135S 型电子天平（瑞士 Mettler-Toledo 公司）；
HH-S26S型数显恒温水浴锅（常州市金坛大地自动化仪
器厂）；KQ-250DE 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪
器有限公司）；2B型玻璃仪器气流烘干器（山东华鲁电热
仪器有限公司）；SHZ-CB 型循环水式多用真空泵（巩义
市予华仪器有限责任公司）；B-220 型恒温水浴锅、
RE-52CS型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）。
1.2 药材、药品与试剂
4 种蒙药材文冠木（批号：20150812）、诃子（批号：
20161002）、栀 子（批 号 ：20151101）、川 楝 子（批 号 ：
20160108）均购自通辽市北方药材市场，由内蒙古民族
大学附属医院蒙药制剂室苏日塔拉图副主任蒙药师鉴
定，其中文冠木药材为无患子科植物文冠木（Xanthoc-
eras sorbifolia Bunge.）的干燥茎干；川楝子药材为楝科
植物川楝（MeLia toosendan Sieb.et Zucc.）的干燥成熟果
实；栀子药材为茜草科植物栀子（Gardenia jasminoides
Ellis.）的成熟果实；诃子药材为使君子科植物诃子（Ter-
minalia chebula Retz.）的成熟果实。按文冠木15 g、川楝
子9 g、栀子3 g、诃子3 g的处方比例，制成粗粉，过筛，混
匀，即得 6 批样品（批号分别为 20160115、20160130、
20160215、20160228、20160302、20160510）。
花旗松素对照品（批号：A0082，纯度：99.2％）由成
都曼思特生物科技有限公司提供；槲皮素对照品（批号：
110081-200907，纯度：98.6％）、栀子苷对照品（批号：
110749-200511，纯 度 ：98％）、儿 茶 素 对 照 品（批 号 ：
110877-201203，纯 度 ：98.5％）、芦 丁 对 照 品（批 号 ：
00809705，纯度：99％）均由中国食品药品检定研究院提
供；杨梅素对照品（批号：100504，纯度：＞98％）、二氢杨
梅素对照品（批号：101206，纯度：98.9％）均购自上海融
禾医药科技发展有限公司；甲醇、乙腈为色谱纯，乙醇为
分析纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Sil Green C18 （250 mm×4.6 mm，5 µm）；流
动相：乙腈（A）-0.1％磷酸溶液（B），梯度洗脱（0～4 min，
8％A→9％A；4～13 min，9％A→10％A；13～33 min，
10％ A→14％ A；33～45 min，14％ A→16％ A；45～48
min，16％A→20％A ；48～70 min，20％A→21％A；70～
80 min，21％A→30％A ；80～90 min，30％A→32％A；
90～100 min，32％A→100％A；100～105 min，100％A；
·222 · China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 2
105～106 min，100％A→8％A ；106～110 min，8％A）；
流速：1 mL/min；检测波长：238 nm；柱温：30 ℃；进样量：
10 μL。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品及混合对照品溶液 精密称取对照品杨
梅素1.876 5 mg、儿茶素1.792 5 mg、槲皮素1.690 0 mg、
花旗松素 3.257 5 mg、二氢杨梅素 2.725 0 mg、栀子苷
1.077 5 mg、芦丁 1.327 5 mg，分别置于 5 mL 量瓶中，用
甲醇定容，摇匀，即得单一对照品溶液。精密称取单一
对照品杨梅素3.753 mg、儿茶素11.45 mg、槲皮素2.271
mg、花旗松素 2.821 mg、二氢杨梅素 19.79 mg、栀子苷
19.50 mg、芦丁1.289 mg，置于同一5 mL量瓶中，以甲醇
定容，摇匀，即得混合对照品溶液。根据所需将混合对
照品溶液用甲醇稀释不同的倍数，即得到7种浓度的混
合对照品溶液。
7 种混合对照品溶液中，杨梅素质量浓度分别为
0.008 130、0.032 50、0.130 0、0.260 0、0.404 5、0.509 9、
0.750 5 mg/mL；儿 茶 素 质 量 浓 度 分 别 为 0.008 590、
0.034 44、0.137 5、0.275 0、1.038、1.600、2.290 mg/mL；栀
子苷质量浓度分别为0.010 56、0.042 25、0.169 0、0.338 0、
0.975 1、1.950、3.901 mg/mL；二氢杨梅素质量浓度分别
为 0.013 00、0.052 00、0.104 0、0.416 0、0.989 5、1.980、
3.958 mg/mL；花 旗 松 素 质量浓 度 分 别 为 0.008 815、
0.017 63、0.035 26、0.070 53、0.141 1、0.282 1、0.564 2
mg/mL；芦 丁 质 量 浓 度 分 别 为 0.004 03、0.008 060、
0.016 11、0.032 23、0.064 45、0.128 9、0.257 8 mg/mL；杨
梅素质量浓度分别为0.008 130、0.032 50、0.130 0、0.260 0、
0.404 5、0.509 9、0.750 5 mg/mL；槲皮素质量浓度分别为
0.007 075、0.014 19、0.028 39、0.056 78、0.113 6、0.227 1、
0.454 2 mg/mL。以上溶液均于4 ℃冷藏、备用。
2.2.2 供试品溶液 精密称取森登-4样品1.000 0 g，置
于具塞锥形瓶中，精密加入95％乙醇10 mL，称定质量，
超声（功率：300 W，频率：50 kHz）2 次，每次 20 min，放
冷，再称定质量，用 95％乙醇补足减失的质量，摇匀，用
0.45 µm微孔滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液。
2.2.3 阴性对照品溶液 精密称取缺文冠木和栀子的
森登-4 样品 1.000 0 g，按“2.2.2”项下方法处理和操作，
得阴性对照品溶液。
2.3 系统适用性试验
分别精密量取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品溶
液和阴性对照品溶液各 10 μL，按“2.1”项下色谱条件进
行测定，记录色谱图。结果，在该色谱条件下，各被测成
分之间、被测成分与杂质峰均基线分离，7种成分的分离
度均大于 1.5，理论板数按栀子苷峰计大于 5 000，详见
图 1。
2.4 线性关系考察
分别精密量取“2.2.1”项下混合对照品溶液 10 μL，
按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并行进样
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