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氟康唑（Fluconazole）是通过抑制真菌麦角甾醇合                    051A1，纯度：98.7％）；脂肪乳注射液（C14～24）[20％，
        成而抑制或杀灭真菌的三唑类抗真菌药物，对深部真菌                            费森尤斯卡比华瑞制药有限公司，批号：80LA004，规格：
        感染特别是白色念珠菌和新型隐球菌感染具有显著疗                             250 mL ∶ 50 g（大豆油）∶ 3 g（卵磷脂）]；二甲基亚砜
        效 。该药自 1988 年上市以来，因具有抗真菌谱广、肝                       （DMSO）、乙腈、甲酸为色谱纯，其余试剂均为分析纯，
          [1]
        毒性小、口服吸收好、生物利用度高、组织分布广等优                            水为自制超纯水。
        点，其临床应用十分广泛 。氟康唑用药过量易导致患                            1.3 空白血浆
                              [2]
        者肝肾功能异常，且与其他药物（如氢氯噻嗪、异烟肼、                               来自于我院体检中心，经肝素抗凝后，分离上层血
        利福平等）联合使用时，也可能会导致氟康唑血药浓度                            浆即得。
        发生改变     [3-4] ；同时有文献指出，在联合使用氟康唑和部                  2 方法与结果
        分降脂、降糖、降压药物（如辛伐他汀、格列吡嗪、硝苯地                          2.1 色谱与质谱条件
        平等）时，累及患者肝脏、肾脏及骨骼、心血管、内分泌系                          2.1.1  色谱条件      色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18
                                         [5]
        统的不良反应的发生率将会有所增高 。因此对于联合                           （100 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流动相：0.1％甲酸溶液（A）-
        使用氟康唑及其他药物治疗的患者，有必要对其体内氟                            乙腈（B），梯度洗脱[0～1.2 min，20％B→50％B；1.2～
        康唑的血药浓度进行治疗药物监测（TDM），并结合监测                          1.8 min，50％B→90％B；1.8～3.1 min，90％B；每针进样

        结果及患者症状优化个体治疗方案，以保证用药的安                             前以初始比例（20％B）平衡 2 min]；自动进样器温度：
                     [6]
        全、有效、合理 。目前文献报道的血药浓度检测方法主                           15 ℃；流速：0.3 mL/min；柱温：40 ℃；进样量：3 μL。
        要有高效液相色谱法（HPLC）和液质联用法（LC-MS），                       2.1.2  质谱条件      电喷雾离子源，正离子方式检测
                                                                +
        所用到的内标化合物包括甲磺酸酚妥拉明、甲硝唑和非                           （ESI ）；离子源温度：600 ℃；离子源喷射电压：4 500 V；
        那西丁等     [7-10] 。液相色谱-串联质谱技术（LC-MS/MS）在             雾化气（Gas 1，N2 ）和加热气（Gas 2，N2 ）压力：55 psi；气
        靶 向 定 量 分 析 领 域 中 的 应 用 独 具 优 势 ；与 传 统 的            帘气（N2 ）压力：35 psi；采用多反应监测（MRM）模式扫
        LC-MS/MS 法相比，超高效液相色谱-串联质谱技术                         描。用于定量分析的离子对分别为m/z 307.1→220.0[氟
        （UPLC-MS/MS）显著提高了复杂体系中药物定量分析                        康唑，去簇电压（DP）：130 V，碰撞能量（CE）：20 eV]、
                                     [11]
        的效率，并逐渐得到了广泛应用 。此外，上述内标的                            m/z 311.1→223.0（内标，DP：100 V，CE：25 eV）。氟康唑
        应用可能会受到类似联用药物的干扰，而同位素内标则                            和内标的化学结构式与质谱图见图1。
        可有效避免这种干扰，有助于实现复杂体系中某一药物                                                      1.5×10 7
                                                              3.0×10 6
                   [12]
        的准确定量 。为此，本研究建立了测定人血浆中氟康
                                                             cps  2.0×10 6           cps  1.0×10 7
        唑浓度的同位素稀释-UPLC-MS/MS 法，以期为该药的                        intensity，              intensity，
        TDM和临床合理应用提供参考。                                       1.0×10 6                5.0×10 6
        1 材料                                                     0  100   200   300      0  100   200   300
                                                                          m/z                     m/z
        1.1  仪器                                                         A.氟康唑                    B.内标
            LC-30A 型 UPLC 系统，配有 LC-30AD 型二元高压                    图1 氟康唑和内标的化学结构式及质谱图
        梯度泵、CTO-30A 型柱温箱、SIL-30AC 型自动进样器                    Fig 1 Chemical structures and MS spectra of fluco-
                                                                   nazole and internal standard
        （日本Shimadzu公司）；AB Sciex Triple Quad   TM  5500型三
        重四极杆 MS 仪，配有 Turbo Ⅴ 型离子源、AcQuRate            TM    2.2 溶液的制备
                                   TM
        型脉冲离子计数检测器和Analyst 1.6数据采集系统（美                      2.2.1  对照品贮备液        取氟康唑对照品 10 mg，精密称
        国 AB Sciex 公司）；BP211D 型分析天平（北京赛多利斯                  定，置于10 mL量瓶中，加DMSO溶解并定容，配制成质
        仪器系统有限公司）；Elmasonic S150实验室应用型超声                    量浓度为1.0 mg/mL的对照品贮备液。
        波清洗器（德国 Elma 公司）；Sorvall ST16R 型高速冷冻                2.2.2  标准曲线和质控工作溶液             取“2.2.1”项下对照
        离心机（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）；MIULAB          品贮备液适量，用 50％乙腈稀释，配制成质量浓度分别
        MIX-25P型涡旋仪（杭州米欧仪器有限公司）。                            为 0.2、0.4、1.0、3.0、10.0、30.0、80.0、100.0 μg/mL 的系列
        1.2  药品与试剂                                          溶液，作为标准曲线工作溶液。另取“2.2.1”项下对照品
            氟康唑对照品（中国食品药品检定研究院，批号：                          贮备液适量，用 50％乙腈稀释，配制成质量浓度分别为
        100314-201605，纯度：99.7％）；氟康唑-d4对照品（内标，               0.2、0.6、7.5、40.0、75.0、500.0 μg/mL的系列溶液，作为质
        加拿大 TLC Pharmaceutical Standards 公司，批号：1132-        控工作溶液。


        ·236  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 2                                   中国药房    2019年第30卷第2期
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