Page 102 - 2019年1月第30卷第2期

对坐叶药材采集于贵州各地区，经遵义医药高等专 6），表明供试品溶液在室温下放置12 h内稳定性良好。
科学校刘亮副教授鉴定为茜草科植物对坐叶（Hedyotis 2.3.3 重复性试验 取同一批样品（编号：S4）适量，按
uncinella Hook.et Arn.）的干燥全草。药材来源及信息见 “2.2.2”项下方法制备供试品溶液，共 6 份，再按“2.1”项

表 1。芦丁对照品（批号：100080-200707，纯度：100％， 下色谱条件进样测定，以14号峰芦丁为参照，记录各共
购于中国食品药品检定研究院）；乙腈为色谱纯，其余试 有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，各共有峰相
剂均为分析纯，水为纯水。 对保留时间和相对保留峰面积的 RSD 分别为 1.7％和
表1 药材来源及信息 2.3％（n＝6），表明本方法重复性良好。
2.4 HPLC指纹图谱的生成与相似度、共有峰相关数据
Tab 1 Source and information of medicinal material
分析
编号 产地 采集时间
S1 贵州省黔东南苗族侗族自治州黄平县 2017年7月28日 2.4.1 HPLC 指纹图谱生成 取 10 批对坐叶药材各适
S2 贵州省铜仁市石阡县 2017年7月15日 量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下
S3 贵州省黔南布依族苗族自治州贵定县 2017年7月18日
S4 贵州省安顺市紫云县 2017年7月20日 色谱条件进行测定，采用《中药色谱指纹图谱相似度评
S5 贵州省黔南布依族苗族自治州贵定县 2017年7月22日 价系统》（2004A版）对10批药材样品的HPLC图谱进行
S6 贵州省黔南布依族苗族自治州平塘县 2017年7月25日 分析，得HPLC指纹图谱，详见图1～图3。
S7 贵州省安顺市平坝县 2017年7月26日
S8 贵州省黔南布依族苗族自治州龙里县 2017年7月13日 70
60
S9 贵州省安顺市紫云县 2017年7月10日 50
40
S10 贵州省黔西南布依族苗族自治州普安县 2017年7月5日 mAU 30 芦丁（S）
20
10
2 方法与结果 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
2.1 色谱条件 t，min
图1 芦丁对照HPLC图谱
色谱柱：Agilent Eclipse XDB C18 （250 mm×4.6 mm，
Fig 1 HPLC chromatogram of rutin
5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.2％磷酸溶液（B），梯度洗脱
70
（0～5 min，5％A→10％A；5～15 min，10％A→15％A； 60
50
15～25 min，15％A→20％A；25～35 min，20％A→30％ mAU 40 2 3 5 7 9 13 14（S）
30
20 1 4 6 16
A；35～40 min，30％A→5％A；40～45 min，5％A）；流速： 10 0 8 10 11 12 15 17
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：235 nm；进样量为15 t，min
μL；运行时间：45 min [2-6] 。 图2 药材HPLC对照指纹图谱
2.2 溶液的制备 Fig 2 HPLC control fingerprint of medicinal material
2.2.1 对照品溶液 精密称取芦丁对照品适量，加甲醇
溶解制成每1 mL含0.1 mg的对照品溶液。 165.55
2.2.2 供试品溶液 精密称取对坐叶药材粉末（过 3 号
135.55
筛）约1.0 g，置于锥形瓶中，加甲醇20 mL，密塞，称定质
14（S）
量，超声处理60 min，取出，放置至室温，再次称定质量， mAU 92.00
用甲醇补足质量，过滤，取续滤液，即得。 R S10
S9
45.54 S8
2.3 方法学考察 S7
S6
S5
S4
2.3.1 精密度试验 取供试品溶液（编号：S4）适量，按 －3.13 S3
S2
S1
0 6.67 13.33 20.00 26.67 33.34 40.00 46.67
“2.1”项下色谱条件连续进样 6 次，以 14 号峰芦丁为参 t，min
照，记录各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结 注：S1～S10为对坐叶；R为共有模式
Note：S1-S10 were H. uncinella；R was common mode
果，各共有峰相对保留时间和相对保留峰面积的RSD分
图3 10批对坐叶药材样品HPLC指纹图谱
别为1.5％和2.1％（n＝6），表明本方法精密度良好。
Fig 3 HPLC fingerprint of 10 batches of H. uncinella
2.3.2 稳定性试验 取供试品溶液（编号：S4）适量，分 2.4.2 相似度分析 采用《中药色谱指纹图谱相似度评
别于室温下放置 0、2、4、6、8、12 h 时按“2.1”项下色谱条 价系统》（2004A 版）进行相似度评价结果显示，10 批对
件进样测定，以14号峰芦丁为参照，记录各共有峰的相 坐叶药材样品的相似度均大于0.90，且与对照指纹图谱
对保留时间和相对峰面积。结果，各共有峰相对保留时 具有较好的一致性，表明药材样品间差异较小，质量稳
间和相对保留峰面积的 RSD 分别为 1.4％和 2.0％（n＝ 定性良好，详见表2～表4。

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