Page 41 - 《中国药房》2026年10期

以 p-mTOR/mTOR、p-S6K/S6K 比值评价 mTOR、S6K 蛋 3.2.3 柴芪益肝颗粒含药血清对 Huh-7 细胞中 mTOR、
白的磷酸化水平。实验重复3次。 SREBP1、SCD1 mRNA表达影响
2.2.7 统计学分析 与 CON 组比较，CQYGKL 组、RSL3 组、RMC-5552
采用 SPSS 26.0 软件进行统计分析，使用 GraphPad 组 Huh-7 细胞中 mTOR、SREBP1、SCD1 mRNA 表达量
Prism 10.1.2 软件作图。定量资料用 x±s 表示。多组间 均 显 著 降 低（P＜0.05），CCT007093 组 Huh-7 细 胞 中
比较采用单因素方差分析，方差齐时组间两两比较采用 mTOR、SREBP1、SCD1 mRNA 表达量均显著升高（P＜
LSD-t检验，方差不齐时组间两两比较采用Dunnett’s T3 0.05）。与CCT007093组比较，CCT007093+CQYGKL组
检验。检验水准α＝0.05。 Huh-7 细胞中 mTOR、SREBP1、SCD1 mRNA 表达量均
3 结果 显著降低（P＜0.05）。结果见图2。
3.1 网络药理学分析结果 b b 2.5 b
2.0 a 2.0 a a
3.1.1 柴芪益肝颗粒-铁死亡-肝癌交集靶点、关键靶点 1.5 1.5 2.0
及主要有效成分 mTOR/GAPDH 1.0 SREBP1/GAPDH 1.0 SCD1/GAPDH 1.5
1.0
经筛选，共获得柴芪益肝颗粒药物靶点532个，铁死 0.5 a a a 0.5 a a a 0.5 a a a
亡靶点484个，肝癌疾病靶点15 134个。取三者交集后， 0 0 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
得到73个柴芪益肝颗粒-铁死亡-肝癌交集靶点。PPI网 A. mTOR B. SREBP1 C. SCD1
络分析显示，mTOR、SREBP1、SCD1 等均为关键靶点； Ⅰ：CON组；Ⅱ：CQYGKL组；Ⅲ：RSL3组；Ⅳ：RMC-5552组；Ⅴ：
CCT007093组；Ⅵ：CCT007093+CQYGKL组；a：与CON组比较，P＜
药物-成分-靶点网络分析显示，柴芪益肝颗粒的主要有
0.05；b：与CCT007093组比较，P＜0.05。
效成分包括槲皮素、丹参酮ⅡA、黄芩素等。 图2 各组细胞中 mTOR、SREBP1、SCD1 mRNA 表达
3.1.2 分子对接分析结果
量比较（x±s，n＝3）
关键靶点mTOR、SREBP1、SCD1与槲皮素、丹参酮
ⅡA、黄芩素进行分子对接的结合能为－7.456 6～－5.175 3 3.2.4 柴 芪 益 肝 颗 粒 含 药 血 清 对 Huh-7 细 胞 中
kJ/mol，且均小于－5 kJ/mol，表明各有效成分与关键靶 mTORC1/SREBP1/SCD1轴相关蛋白表达的影响
与 CON 组比较，CQYGKL 组、RSL3 组、RMC-5552
点的结合相对稳定。
3.2 细胞实验验证结果 组 Huh-7 细胞中 SREBP1、SCD1 蛋白表达量和 mTOR、
S6K 蛋 白 磷 酸 化 水 平 均 显 著 降 低（P＜0.05），而
3.2.1 柴芪益肝颗粒含药血清给药浓度和干预时间
不同浓度柴芪益肝颗粒含药血清分别干预Huh-7细 CCT007093组Huh-7细胞中SREBP1、SCD1蛋白表达量
和 mTOR、S6K 蛋白磷酸化水平均显著升高（P＜0.05）。
胞24、48 h的结果（表2）显示，该含药血清对细胞的增殖
抑制作用呈剂量与时间依赖趋势，其中30%柴芪益肝颗 与 CCT007093 组比较，CCT007093+CQYGKL 组 Huh-7
细胞中 SREBP1、SCD1 蛋白表达量和 mTOR、S6K 蛋白
粒含药血清干预细胞48 h的抑制效果最为显著，故后续选
用30%柴芪益肝颗粒含药血清干预48 h进行后续实验。 磷酸化水平均显著降低（P＜0.05）。结果见图3。
4 讨论
表2 不同浓度柴芪益肝颗粒含药血清对Huh-7细胞存
活率的影响（x±s，n＝6，%%） 肝癌病机归属于“正虚瘀毒”，临床治疗以扶正培
本、化瘀解毒贯穿全程 [4，11] 。柴芪益肝颗粒以扶正化瘀
干预时间/h 0 10% 20% 30%
24 98.15±10.30 91.33±2.89 67.31±5.48 63.19±5.70 解毒为核心治则，临床常用于治疗辨证属正虚瘀毒证的
48 99.07±3.87 88.10±9.30 57.84±10.16 47.81±7.24 肝癌患者。近年来的研究证实，“正虚瘀毒证”的现代生
3.2.2 柴芪益肝颗粒含药血清对Huh-7细胞中铁死亡指 物学内涵与细胞铁死亡机制高度契合：一方面，“正气亏
标的影响 虚”对应机体抗病能力减弱，与现代医学氧化防御系统
与CON组比较，CQYGKL组和RSL3组Huh-7细胞 功能减退相契合；另一方面，铁死亡以脂质活性氧过量
中 Fe 、MDA 水平均显著升高，GSH 水平均显著降低 蓄积、细胞膜脂质过氧化损伤为核心特征，与中医“瘀
2+
（P＜0.05），结果见图1。 毒”致病特点高度吻合 [12―13] 。
a a a 本研究基于网络药理学，筛选得到73个柴芪益肝颗
100 a 4 a 粒-铁死亡-肝癌交集靶点，其中 mTOR、SREBP1、SCD1
（ nmol/mg prot ） 2.0 （ μmol/L ） 60 （ nmol/mg prot ） 3 2 为柴芪益肝颗粒通过铁死亡途径抗肝癌的关键靶点，槲
a
2.5
80
1.5
40
皮素、丹参酮ⅡA、黄芩素为主要有效成分。分子对接分
1.0
Fe 2+ / 0.5 GSH/ 20 MDA/ 1 析显示，柴芪益肝颗粒中主要活性成分槲皮素、丹参酮
0 0 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅰ Ⅱ Ⅲ ⅡA、黄芩素，与 mTOR、SCD1、SREBP1 关键靶点均有良
A. Fe 2+ B. GSH C. MDA
好的结合稳定性。
Ⅰ：CON组；Ⅱ：CQYGKL组；Ⅲ：RSL3组；a：与CON组比较，P＜
0.05。 铁死亡的发生常伴随特异性生化标志物的改变，其
2+
图1 3组细胞中铁死亡指标比较（x±s，n＝6） 中胞内 Fe 蓄积、GSH 耗竭及 MDA 水平上调被视为评
中国药房 2026年第37卷第10期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 10 · 1275 ·