Page 58 - 《中国药房》2026年7期

以 GAPDH 为内参，通过 2 －ΔΔCt 法分析 GRB2、CRLS1、 60 8
ND1、TAZ、PLSCR3 mRNA的相对表达量。引物序列及 40 6
扩增产物长度见表1。 逃避潜伏期/s 穿越平台次数/次 4
表1 PCR引物序列及扩增产物长度 20 2
引物 序列（5′→3′） 产物大小/bp 0 0
GAPDH 上游：GACATGCCGCCTGGAGAAAC 138 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
下游：AGCCCAGGATGCCCTTTAGT A.逃避潜伏期 B.穿越平台次数
Ⅰ：SHAM组；Ⅱ：MOD组；Ⅲ：YFXF-L组；Ⅳ：YFXF-H组；Ⅴ：DH
GRB2 上游：TTCAAGGTGCTTCGTGACGG 139
下游：CCTGTTCTATGTCCCGGAGG 组；a：与SHAM组比较，P＜0.05；b：与MOD组比较，P＜0.05。
CRLS1 上游：GGCTAACGGATTTGTTGGAT 159 图2 各组大鼠的逃避潜伏期及穿越平台次数比较（x±
下游：TGTAAGTGAGTGGGACTGGAAT s，n＝12）
ND1 上游：GGCTACATACAACTACGCAAAGGC 110
100 80
下游：GTTAGGGGGCGTATGGGTTCT
TAZ 上游：AAATGGGGAATTGGACGGCT 165 （ pg/mL ） 80 （ pg/mL ） 60
下游：AGGGAGTGTACTGAAGGGCT 60 40
PLSCR3 上游：TCGCCAACCTGTTCTACGAG 152 TNF-α含量/ 40 IL-4含量/
下游：CATCTGTGAGGGCTTCTCGG 20 20
2.10 大鼠海马组织中ATP含量检测 0 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
采用比色法检测。取“2.4”项下每组 3 只大鼠的海 A. TNF-α B. IL-4
Ⅰ：SHAM组；Ⅱ：MOD组；Ⅲ：YFXF-L组；Ⅳ：YFXF-H组；Ⅴ：DH
马组织，经磷酸盐缓冲液漂洗后，冰浴匀浆，低温离心
组；a：与SHAM组比较，P＜0.05；b：与MOD组比较，P＜0.05。
（10 000×g，10 min，4 ℃）获取上清液，经10%三氯醋酸 图3 各组大鼠血清中 TNF-α 和 IL-4 含量比较（x±s，
沉淀后二次离心。参照试剂盒标准，将ATP检测工作液 n＝6，pg/mL）
（按1∶9稀释）与样本（50 μL）于检测孔中共孵育，采用比
3.3 大鼠海马组织病理形态学观察结果
色法结合标准曲线测定海马组织中ATP含量。 SHAM组大鼠海马组织形态结构完整，CA1区锥体
2.11 统计学方法 细胞排列规整致密，细胞核形态饱满、核仁清晰且染色
采用SPSS 25.0软件进行数据处理。计量资料符合 均一，尼氏小体数量较为丰富，未见细胞凋亡、坏死及炎
正态分布，以 x±s 表示；多组间比较采用单因素方差分 症细胞浸润。MOD 组大鼠海马组织呈现严重病理损
析，并根据方差齐与否分别选用 LSD 法（方差齐）或 伤，CA1 区细胞排列散乱，锥体细胞和尼氏小体数量锐
Games-Howell 法（方差不齐）进行两两比较。检验水准 减，大量神经元出现核固缩、深染现象。与 MOD 组相
比，YFXF-L、YFXF-H 与 DH 组大鼠海马组织锥体细胞
α＝0.05。
排列有序，尼氏小体数量较多，仅偶见少量固缩、深染细
3 结果
胞。结果见图4、图5。
3.1 大鼠空间认知能力评估结果
与 SHAM 组比较，MOD 组大鼠的逃避潜伏期显著
延长（P＜0.05），穿越平台次数显著减少（P＜0.05）。与
MOD 组比较，各给药组大鼠的逃避潜伏期均显著缩短
（P＜0.05），穿越平台次数均显著增加（P＜0.05）。结果 A. SHAM组 B. MOD组 C. YFXF-L组
见图1、图2。

D. YFXF-H组 E. DH组
注：黑色箭头所指为锥体细胞，黄色箭头所指为固缩的神经元。
A. SHAM组 B. MOD组 C. YFXF-L组 D. YFXF-H组 E. DH组
图4 各组大鼠海马组织HE染色显微图
图1 各组大鼠的空间探索测试运动轨迹图
3.4 大鼠海马组织中 GRB2、p-ERK、ERK 和 CRLS1
3.2 大鼠血清中TNF-α和IL-4含量测定结果
蛋白表达检测结果
与 SHAM 组比较，MOD 组大鼠血清中 TNF-α 含量
与 SHAM 组比较，MOD 组大鼠海马组织中 GRB2、
显著升高（P＜0.05），IL-4 含量显著降低（P＜0.05）。与 CRLS1蛋白表达水平及ERK蛋白的磷酸化水平均显著
MOD 组比较，各给药组大鼠血清中 TNF-α 含量均显著 降低（P＜0.05）。与MOD组比较，各给药组大鼠海马组
降低（P＜0.05），IL-4 含量均显著升高（P＜0.05）。结果 织中GRB2、CRLS1蛋白表达水平及ERK蛋白的磷酸化
见图3。 水平均显著升高（P＜0.05）。结果见图6、图7、表2。

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