Page 56 - 《中国药房》2026年7期
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the  relative  expression  levels  of  GRB2，  CRLS1，ND1， TAZ，  and  PLSCR3  mRNA，  and  the  content  of ATP  in  hippocampal  tissue
          were significantly decreased （P＜0.05）. Compared with the model group， the above pathological changes in the hippocampal tissue
          of  each  administration  group  were  alleviated，  and  the  quantitative  indicators  were  significantly  restored  （P＜0.05）.
          CONCLUSIONS  YFXF  may  improve  hippocampal  neuron  injury  in  VAD  rats  by  activating  the  GRB2/ERK/CRLS1  pathway,
          maintaining cardiolipin homeostasis， and improving mitochondrial energy metabolism.
          KEYWORDS     Yifei  xuanfei  jiangzhuo  formula；  vascular  dementia；  neuron  injury；  GRB2/ERK/CRLS1  pathway；  mitochondria；
          cardiolipin


              血管性痴呆（vascular dementia，VAD）是由脑血管病              CRLS1 通路的靶向调节作用，为阐明该方改善 VAD 的
          变引起的认知功能障碍综合征，其病理机制涉及线粒体                            作用机制提供新依据。
          能量代谢紊乱、神经细胞凋亡等              [1―2] 。近年来的研究发          1 材料
          现，心磷脂作为线粒体内膜特有的磷脂成分，其稳态失                            1.1 主要仪器
          衡可导致线粒体膜电位崩溃、活性氧蓄积及神经元死                                 本研究所用的主要仪器有 DM IL LED 型光学显微
                                         [3]
          亡，在神经退行性疾病中起关键作用 。临床证据显示，                           镜（德国 Leica 公司）、UNHOOD Ⅱ型凝胶成像系统（美
                                                                                   ®
                                                    [4]
          抗心磷脂抗体水平异常升高是 VAD 的危险因素 。抗                          国 Bio-Rad 公司）、Infinite  M200 Pro 型全波长多功能酶
          心磷脂抗体可与心磷脂特异性结合，阻断心磷脂外化至                            标仪（瑞士 Tecan 公司）、Axio Imager A2 型荧光显微镜
                                                        [5]
          细胞线粒体外膜表面，导致神经元线粒体功能障碍 。                           （德国 Zeiss 公司）、LightCycler  480 Ⅱ型实时荧光定量
                                                                                        ®
          这提示心磷脂代谢与VAD病理进程密切相关。心磷脂                            聚合酶链式反应（PCR）仪（瑞士 Roche 公司）、Histocen‐
          生物合成的终末步骤由心磷脂合成酶1（cardiolipin syn‐                  tre3型组织包埋机（美国Thermo Fisher Scientific公司）、
          thase 1，CRLS1）催化完成，若 CRLS1 存在功能缺陷，将                 SE250型垂直电泳仪（美国GE公司）等。
                                                        [6]
          直接导致心磷脂含量减少及多系统线粒体肌病发生 。                            1.2 主要药品与试剂
          因此，恢复 CRLS1 介导的心磷脂稳态可能为 VAD 治疗                          黄芪、人参、麦冬、桔梗、苦杏仁、三七、苏子、石菖
          的新靶点。                                               蒲、酒大黄药材均购自广西中医药大学第一附属医院，
              生长因子受体结合蛋白 2（growth factor receptor-            经该院药学部主任中药师田元春鉴定均为真品。盐酸
          bound protein 2，GRB2）作为衔接蛋白，能通过激活下游                 多奈哌齐片（规格 5 mg/片，批号 2203026）购自卫材（中
          胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase，     国）药业有限公司。
                                           [7]
          ERK）通路参与细胞存活与凋亡的调控 。研究表明，在                              苏木精、伊红染液（批号分别为BA-4041、BA-4024）
          缺血性脑卒中模型小鼠中，GRB2 功能抑制可诱发神经                          均购自珠海贝索生物技术有限公司；腺苷三磷酸（adeno-
                                         [8]
          元自噬失调，导致认知功能障碍加重 。值得注意的是，                           sine triphosphate，ATP）试剂盒（批号 E-BC-F002）购自武
          GRB2可调节ERK磷酸化级联反应，进而介导CRLS1启                        汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司；RIPA裂解液、白细
                                                        [4]
          动子结合并增强其转录活性，从而维持心磷脂稳态 。                            胞 介 素 4（interleukin-4，IL-4）酶 联 免 疫 吸 附 分 析
          这提示 GRB2/ERK/CRLS1 通路在脑血管性认知障碍中                    （ELISA）试剂盒、肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis factor-
          具有重要地位。                                             α，TNF-α）ELISA 试剂盒、兔源甘油醛-3-磷酸脱氢酶
              中医药在VAD防治中具有悠久历史和多成分、多靶                        （GAPDH）抗 体（ 批 号 分 别 为 G2002、GB300005、
          点、多途径的独特优势。益肺宣肺降浊方（后文简写为                            GER0004、GB11002）均购自武汉赛维尔生物科技有限
         “YFXF”）是广西中医药大学第一附属医院的常用协定                           公司；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔、山羊抗鼠二抗
          方，基于“从肺论治”理论拟定。该方含黄芪、人参等9味                         （批号分别为 926-32211、926-32210）均购自北京博奥森
          中药，具有益肺宣肺、祛痰降浊之效，用于治疗痴呆。临                           生物技术有限公司；鼠源 ERK 抗体（批号 MA5-15227）
          床证实该方可改善VAD患者认知功能，其机制与调控表                           购自美国 Thermo Fisher Scientific 公司；兔源 GRB2、磷
          皮生长因子受体介导的磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B-                          酸化 ERK（p-ERK）、CRLS1 抗体（批号分别为 10254-2-
          丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein ki‐            AP、28733-1-AP、14845-1-AP）均购自武汉三鹰生物技术
          nase，MAPK）/ERK 通路相关      [9―10] 。鉴于 MAPK/ERK 通      有限公司；实时定量PCR试剂盒、逆转录试剂盒（批号分
                                        [7]
          路与GRB2相关通路存在交互作用 ，且YFXF的核心成                         别为 22204、22107）均购自上海吐露港生物科技有限公
          分人参皂苷Rg3被证实可通过调控GRB2表达恢复心磷                          司。NADH 脱氢酶亚基 1（NADH dehydrogenase subunit
          脂稳态 ，本课题组推测该方可能通过调节 GRB2/ERK/                       1，ND1）、Tafazzin（线粒体心磷脂代谢关键酶，后文简写
                [4]
          CRLS1 通路维护心磷脂代谢平衡，进而拮抗 VAD 神经                       为“TAZ”）、磷脂移位酶 3（phospholipid scramblase 3，
          元损伤。鉴于此，本研究拟整合心磷脂稳态调控与VAD                           PLSCR3）等 PCR 引物由南宁捷尼斯生物科技有限公司
          中医治疗机制，通过体内实验探讨YFXF对GRB2/ERK/                       设计、合成。


          · 878 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 7                               中国药房  2026年第37卷第7期
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