Page 47 - 《中国药房》2026年6期

2.3 色谱条件 2.4.5 加样回收率试验
色谱柱为 XBridge Shield RP18（4.6 mm×250 mm， 精密称取已知含量的生栀子、黄芩饮片粉末（饮片
5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B），梯度洗脱 编号分别为S-9、H-1）各6份，分别加入相同质量的对照
（0 min，8%A；0～10 min，8%A→20%A；10～14 min， 品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液后，再按“2.3”项
20%A→28%A；14～22 min，28%A→36%A；22～26 min， 下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率。
36%A→80%A；26～30 min，80%A→100%A；30～33 min， 结果显示，京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷Ⅰ、西红
100%A→8%A）；流速为 1.0 mL/min；检测波长为 254 花苷Ⅱ、黄芩苷的平均加样回收率分别为 100.28%、
nm；柱温为25 ℃；进样量为10 μL。 99.54%、99.14%、100.05%、99.58%，RSD 分别为 1.62%、
2.4 5种活性成分的含量测定 1.18%、0.82%、1.33%、1.19%（n＝6），表明方法准确度
2.4.1 线性关系考察 良好。
精密吸取“2.2.1”项下京尼平龙胆双糖苷等4种成分 2.4.6 含量测定及变化情况
的混合对照品溶液，用甲醇逐级稀释；取该混合对照品 取各批生栀子、焦栀子、黄芩饮片适量，按“2.2.2”项
溶液和稀释后的系列对照品溶液，分别按“2.3”项下色谱 下方法分别制备 10 批生栀子-黄芩供试品溶液和 10 批
条件进样测定，记录色谱图。精密吸取“2.2.1”项下黄芩 焦栀子-黄芩供试品溶液，按“2.3”项下色谱条件进样测
苷单一对照品溶液，按“2.3”项下色谱条件分别进样40、 定，记录峰面积并代入回归方程计算各待测成分的含
30、25、20、10、5 μL，记录色谱图。分别以京尼平龙胆双 量。每样品平行测定3次，取平均值，结果见表3。以生
糖苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、栀子苷和黄芩苷的质量 栀子-黄芩药对中各成分的平均含量为基础，计算焦栀
浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归。 子-黄芩药对中各成分含量的变化率。结果显示，相较
结果（表 2）显示，各待测成分在各自检测质量浓度范围 于生栀子-黄芩药对，焦栀子-黄芩药对中 5 种活性成分
2
内与峰面积具有良好的线性关系（R ＞0.999）。 的含量均发生了明显变化，其中京尼平龙胆双糖苷的平
表2 各待测成分的回归方程及线性范围 均含量明显增加，变化率为12.65%；栀子苷、西红花苷Ⅰ、
待测成分 回归方程 R 2 线性范围/（μg/mL） 西红花苷Ⅱ、黄芩苷的平均含量则明显下降，变化率分别
京尼平龙胆双糖苷 Y＝12 266X－66 894 0.999 1 8.125～520 为－7.86%、－60.62%、－62.07%、－0.15%。这些变化表
西红花苷Ⅰ Y＝47 984X－40 034 0.999 9 5～156
西红花苷Ⅱ Y＝46 629X－25 839 0.999 2 0.657 5～42.08 明，炮制可显著影响栀子-黄芩药对的化学成分含量。
栀子苷 Y＝13 419X+299 798 0.999 4 325～1 625 表3 栀子-黄芩药对各成分含量测定结果（n＝3，mg/g）
黄芩苷 Y＝23 361X+907 677 0.999 3 200～1 600
样品编号 京尼平龙胆双糖苷 栀子苷 西红花苷Ⅰ 西红花苷Ⅱ 黄芩苷
2.4.2 精密度试验 SH1 7.380 5 32.394 3 5.137 1 0.913 5 134.137 0
分别取“2.2.1”项下混合对照品溶液 0.4 mL 及黄芩 SH2 8.918 0 48.620 9 3.090 6 0.521 1 133.385 5
SH3 6.136 0 36.841 6 4.130 3 0.846 0 126.153 7
苷单一对照品溶液 0.6 mL，混匀；精密吸取该溶液 10 SH4 9.938 0 55.765 3 5.515 4 0.644 6 125.008 4
μL，按“2.3”项下色谱条件连续进样 6 次，记录峰面积。 SH5 12.179 7 40.043 7 4.924 1 0.875 0 121.932 6
结果显示，京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷Ⅰ、西 SH6 8.070 5 50.904 0 6.800 5 1.355 3 114.925 1
SH7 8.960 7 42.251 9 4.290 9 0.616 6 122.423 6
红花苷Ⅱ、黄芩苷峰面积的 RSD 分别为 0.75%、0.73%、
SH8 9.416 4 50.188 2 7.545 7 1.013 4 120.094 0
1.07%、1.80%、1.79%（n＝6），表明仪器精密度良好。 SH9 10.150 1 54.965 7 11.155 5 1.344 5 121.901 9
2.4.3 稳定性试验 SH10 11.235 9 51.002 5 7.086 9 0.914 5 130.679 0
取“2.2.2”项下生栀子-黄芩供试品溶液（编号SH-8）， JH1 10.351 8 32.078 3 1.722 4 0.317 9 128.503 9
JH2 8.789 7 42.533 7 1.227 2 0.225 2 124.850 4
分别在25 ℃下放置0、2、4、6、8、24 h时按“2.3”项下色谱 JH3 9.046 4 36.378 4 1.466 5 0.286 8 122.937 8
条件进样测定，记录峰面积。结果显示，京尼平龙胆双 JH4 11.474 1 53.662 0 1.924 4 0.219 8 126.974 3
糖苷、栀子苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、黄芩苷峰面积 JH5 12.575 2 36.824 5 2.268 1 0.369 1 130.059 4
JH6 8.395 6 48.195 0 2.315 0 0.432 6 120.262 0
的 RSD 分别为 1.86%、1.13%、1.07%、1.26%、2.19%（n＝
JH7 9.044 9 41.702 0 1.397 6 0.196 7 121.584 3
6），表明该溶液在25 ℃下放置24 h的稳定性良好。 JH8 13.757 0 39.747 4 3.805 3 0.535 9 120.410 2
2.4.4 重复性试验 JH9 10.677 8 50.653 1 4.608 8 0.477 5 123.896 4
精密称取同一批次生栀子、黄芩饮片粉末（饮片编 JH10 9.960 0 44.801 5 2.763 7 0.368 7 129.330 0
号分别为 S-9、H-1）各 6 份，按“2.2.2”项下方法制备供试 2.5 指纹图谱研究
品溶液，再按“2.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积 2.5.1 精密度试验
并代入回归方程计算各待测成分含量。结果显示，京尼 精密称取生栀子、黄芩饮片粉末（饮片编号分别为
平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、黄芩 S-9、H-1），按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按
苷 含 量 的 RSD 分 别 为 1.71%、0.45%、0.81%、1.75%、 “2.3”项下色谱条件连续进样6次。以分离度良好、保留
0.80%（n＝6），表明方法重复性良好。 时间适宜的15号峰为参照峰，计算得各共有峰相对保留

中国药房 2026年第37卷第6期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 6 · 729 ·