Page 52 - 《中国药房》2026年5期

肺组织

气管

空白组 模型组 QDP低剂量组 QDP中剂量组 QDP高剂量组 地塞米松组
注：红色箭头所指为炎症细胞浸润。
图2 小鼠肺组织及气管的病理学形态显微图（HE染色）
表2 各组小鼠肺组织中MDA、NO、T-SOD、GSH-Px水 差异基因进行基因本体（gene ontology，GO）、京都基因
平比较（x±s，n＝8） 与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and
组别 MDA/（nmol/mg） NO/（nmol/mL） T-SOD/（U/mL） GSH-Px/（U/mL） Genomes，KEGG）富集分析。结果（图3）显示，与空白组
空白组 1.46±0.16 1.09±0.38 259.64±24.54 1 080.40±42.11 比较，模型组小鼠肺组织中有499个基因表现出差异，其
模型组 2.47±0.22 a 2.46±0.48 a 129.89±6.16 a 568.94±49.91 a
QDP低剂量组 1.60±0.07 b 1.97±0.51 160.21±21.15 b 713.91±78.17 中 215 个上调、284 个下调；与模型组比较，QDP 高剂量
QDP中剂量组 1.38±0.25 b 1.67±0.43 b 184.94±32.23 b 795.73±60.33 b 组小鼠肺组织中有 253 个基因表现出差异，其中 131 个
QDP高剂量组 1.37±0.23 b 1.27±0.46 b 232.39±26.94 b 956.10±57.44 b 上调、122 个下调。进一步进行 GO、KEGG 功能富集分
地塞米松组 1.41±0.13 b 1.37±0.34 b 211.68±18.02 b 940.03±52.71 b
析发现，差异基因涉及的分子功能包括白细胞活化调
a：与空白组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。
控、淋巴细胞活化调控、炎症反应调控，涉及的细胞组分
2.4.4 小鼠BALF和血清中IL-17水平检测
包括质膜外侧、肌节、肌原纤维，涉及的生物过程包括受
各组分别取 8 只小鼠的 BALF 和血清样品适量，于
体配体活性、细胞外基质结构组分、信号受体调节活性，
4 ℃下以3 500 r/min离心10 min，取上清液；根据试剂盒
涉及的 KEGG 通路包括 B 细胞受体信号传导通路、NF-
说明书方法操作，检测小鼠BALF和血清中IL-17水平。
κB信号通路、铁死亡信号通路等。研究发现，NF-κB信
结果（表3）显示，与空白组比较，模型组小鼠BALF和血
号通路是驱动支气管哮喘慢性气道炎症的核心转录枢
清中 IL-17 水平均显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，
纽，并且以铁依赖的脂质过氧化为特征的铁死亡也被证
QDP 中、高剂量组和地塞米松组小鼠血清中 IL-17 水平
实与支气管哮喘气道炎症和上皮损伤密切相关；其中作
以及QDP高剂量组小鼠BALF中IL-17水平均显著降低
为铁死亡上游的关键调控通路，Nrf2/HO-1 信号通路在
（P＜0.05）。
[14]
抗氧化方面扮演了核心保护角色 。因此，本研究后续
表3 各组小鼠 BALF 和血清中 IL-17 水平比较（x±s，
n＝8，pg/mL） 选择NF-κB、Nrf2/HO-1信号通路进行验证。
2.5.2 作用机制验证
组别 BALF 血清
空白组 16.52±0.84 24.54±2.06 （1）免疫组化法检测相关蛋白表达。取“2.4.2”项下
模型组 19.95±1.33 a 30.63±3.26 a
剩余切片，经二甲苯脱蜡、乙醇梯度脱水后，用 3% H2O2
QDP低剂量组 19.71±1.46 25.64±2.00 溶液封闭 10 min；以磷酸盐缓冲液清洗后，加入 NF-κB
QDP中剂量组 18.65±0.92 24.89±2.08 b
QDP高剂量组 18.08±1.91 b 24.84±2.03 b p65（稀释度为1∶10）、IκBα（稀释度为1∶10）、CCL20（稀
地塞米松组 19.13±2.07 24.94±1.53 b 释度为 1∶60）一抗，于 4 ℃孵育过夜；次日，以磷酸盐缓
a：与空白组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。
冲液清洗后，加入相应二抗于37 ℃孵育30 min；以二氨
2.5 转录组学预测QDP抗支气管哮喘机制及验证 基联苯胺染色 3 min，再用苏木素复染 1 min；置于显微
2.5.1 作用机制预测 镜下观察阳性染色（棕黄色）情况，再采用 Image-Pro
采用 TRIzol 试剂分别提取空白组、模型组、QDP 高 Plus 6.0 软件分析阳性染色的平均光密度值，以表示目
剂量组小鼠的肺组织总 RNA，采用 NanoDrop 分光光度 的蛋白的表达水平。结果（图4、表4）显示，与空白组比
计定量，并用 HiSeq X-Ten 高通量全基因测序仪进行 较，小鼠肺组织中NF-κB p65、CCL20表达水平均显著升
RNA-Seq 分析，并将检测结果与 NCBI 数据库（https：// 高，IκBα蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）；与模型组比
www.ncbi.nlm.nih.gov）中小鼠基因组进行比对，筛选差 较，QDP 各剂量组和地塞米松组小鼠肺组织中 NF-κB
异基因（|log2差异倍数|＞1且P＜0.05为筛选条件），再利 p65、CCL20表达水平均显著降低，IκBα蛋白（QDP低剂
用DAVID数据库（https：//davidbioinformatics.nih.gov）对 量组除外）表达水平显著升高（P＜0.05）。

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