Page 44 - 《中国药房》2025年23期

表4 各组大鼠卵巢组织中 Beclin-1、p62、LC3 mRNA 认为治疗PCOS应该健脾化痰、活血化瘀，并据此创立了
表达水平比较（x±s，n＝3） 能够祛瘀生新、维持内环境稳定的化痰通脉饮。
组别 Beclin-1 p62 LC3 高雄激素血症不仅是导致女性无排卵的最常见原
空白组 1.42±0.18 1.31±0.25 1.58±0.09 因之一，而且增加了 PCOS 患者内分泌紊乱的风险 。
[9]
模型组 3.42±0.23 a 0.10± 0.04 a 3.81±0.87 a PCOS患者内分泌失调，表现为窦前卵泡生长过多，且其
中药组 1.64±0.08 b 0.64±0.03 b 2.05±0.43 b
化学药组 1.47±0.20 b 0.74±0.18 b 2.10±0.97 b 体内增多的人类抗米勒管激素可降低卵泡对 FSH 的敏
[10]
a：与空白组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。 感性，使GCs的增殖速率降低、卵泡发育停滞 。PCOS
[11]
3.6 化痰通脉饮对 PCOS 大鼠卵巢组织中 PI3K/AKT/ 的诊断特征之一是 T 水平升高 。研究发现，加剧卵泡
mTOR通路及自噬相关蛋白表达的影响 闭锁与排卵障碍的另一个主要原因是 GCs 分泌的 E2减
[12]
与空白组比较，模型组大鼠卵巢组织中PI3K、AKT、 少 。一项包含 76 例 PCOS 患者的横断面研究发现，
mTOR蛋白的磷酸化水平及p62蛋白的表达水平均显著 PCOS 组患者血清中 LH 水平、LH/FSH 比值和游离 T 水
[13]
降低（P＜0.05），Beclin-1、LC3蛋白的表达水平均显著升 平均显著高于正常组 。本研究结果显示，化痰通脉饮
高（P＜0.05）；与模型组比较，各给药组大鼠上述指标水 能显著降低 PCOS 大鼠血清中 T、LH 水平和 LH/FSH 比
平均被显著逆转（P＜0.05）。结果见图3、表5。 值，升高血清中E2、FSH水平，表明该方能够有效调控以
上性激素分泌，改善PCOS大鼠内分泌紊乱。
PI3K 84 kDa
GCs是卵巢组织的重要组成部分，在卵泡生长发育
p-PI3K 81 kDa 过程中发挥着至关重要的作用。GCs 凋亡会导致卵巢
激素合成减少，从而阻滞卵泡卵母细胞的生长发育，诱
AKT 56 kDa
导卵母细胞凋亡；此外，自噬水平的稳态可维护卵泡正
p-AKT 60 kDa [14]
常生长发育，而过度自噬则可导致卵泡闭锁死亡 。
mTOR 289 kDa GCs 的凋亡使得大多数卵泡停滞在窦状卵泡阶段不能
继续发育，而 PCOS 患者 GCs 的凋亡发生率明显高于正
[15]
p-mTOR 289 kDa 常人群，这表明 GCs 的数量预示着卵泡发育的结局 。
此外，有研究发现患 PCOS 的人和大鼠的卵巢组织存在
Beclin-1 60 kDa [16]
过度自噬情况，而 GCs 又是该自噬发生的主要场所 。
本研究中病理和电镜观察结果显示，PCOS大鼠GCs、卵
p62 62 kDa
细胞、黄体细胞数量等均明显减少，同时线粒体水肿变
LC3-Ⅰ 16 kDa 性严重，且存在大量溶酶体和自噬小体；给予化痰通脉
LC3-Ⅱ 14 kDa 饮干预后，PCOS大鼠上述情况明显逆转，表明该方涉及
的效应表型可能与抑制线粒体过度自噬有关。
GAPDH 36 kDa
自噬过程可分为多个特定阶段，包括自噬小体、溶
空白组 模型组 中药组 化学药组
图3 各组大鼠卵巢组织中 PI3K/AKT/mTOR 通路及 酶体的生成及自溶酶体内物质的降解。关键的自噬相
自噬相关蛋白表达的电泳图 关蛋白包括自噬相关蛋白 7、UNC-51 样激酶 1、Beclin-1
和 LC3-Ⅰ/Ⅱ，其参与自噬启动过程并促进自溶酶体成
表5 各组大鼠卵巢组织中 PI3K/AKT/mTOR 通路及
[17]
熟 。因LC3-Ⅱ在细胞自噬中具有特异性，并且自噬程
自噬相关蛋白表达水平比较（x±s，n＝3）
度与自噬体数量成正比，所以 LC3-Ⅱ水平或 LC3-Ⅱ/
组别 p-PI3K/PI3K p-AKT/AKT p-mTOR/mTOR Beclin-1/GAPDH p62/GAPDH LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ LC3-Ⅰ比值是评估细胞自噬水平的金标准 。Prasad
[18]
空白组 1.04±0.29 1.09±0.11 1.15±0.10 0.52±0.39 1.06±0.07 0.28±0.03 [19]
模型组 0.41±0.07 a 0.75±0.19 a 0.59±0.09 a 1.13±0.11 a 0.62±0.06 a 2.35±0.23 a 等 发现，LC3-Ⅱ在 PCOS 小鼠的后代小鼠卵巢中的表
中药组 0.75±0.12 b 1.11±0.11 b 1.05±0.27 b 0.69±0.13 b 1.13±0.26 b 0.64±0.11 b 达高于正常小鼠，且在 GCs 中尤其多。另有研究发现，
化学药组 0.73±0.06 b 1.00±0.08 b 1.14±0.12 b 0.63±0.17 b 0.99±0.10 b 1.29±0.12 b
自噬启动后，Beclin-1 的表达水平与血清总 T、LC3-Ⅱ/
a：与空白组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。
LC3-Ⅰ比值呈正相关；p62 由于可随着降解底物被运送
4 讨论 到溶酶体而一同降解，故其水平反而下降 。本研究结
[20]
PCOS 是一种内分泌代谢性疾病，中医尚未有与之 果显示，模型组大鼠卵巢组织中 Beclin-1 蛋白表达水平
对应的病名，而是根据该病的临床表现将其归属于“不 及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均较空白组大鼠显著升高，而p62
孕”“闭经”等范畴。国医大师班秀文教授以中医阴阳理 蛋白表达水平较空白组显著降低；经化痰通脉饮干预
论解析 PCOS 的病理病机后认为，维持机体内环境的功 后，PCOS大鼠卵巢组织中上述指标水平均被显著逆转。
能属阳，而PCOS患者素体脾肾两虚，阳虚则不能制约属 这提示该方能够抑制PCOS大鼠的过度自噬。
阴的物质，即产生痰浊、瘀血等病理产物，日久导致内环 GCs通过连接蛋白、激素及卵巢特定细胞因子的相
[8]
境失衡，即阴阳失衡，使机体处于病理状态 。因此，其 互作用，调节多条信号通路，以维持卵泡内自噬与凋亡

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