Page 34 - 《中国药房》2025年22期
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购自武汉百意欣生物技术有限公司；兔源 IL-6、TNF-α、
                                PLA2G2A
                         HPGDS          G6PD
                                                              PTGS2 抗体（货号分别为 ab233706、ab205587、ab179800）
                   TRPV1                      MMP1
                                                              均购自英国Abcam公司；兔源β-肌动蛋白（β-actin）抗体
                             PPARA   PTGS1
                                                             （货号 20536-1-AP）购自美国 Proteintech 公司；山羊抗兔
               NLRP3                               SHH
                      ACE                   MMP2              IgG 二抗（货号 DkxGt-003-ERHOX）购自美国 LI-COR
                                                              公司。
                                IL6
             SYK                                      CMA1    2.1.3 动物
                  MTOR                         KIT
                           TNF       PTGS2                        SPF 级 SD 大鼠，雄性，7 周龄，体重 240～280 g，购
                                                              自北京贝优生物科技有限公司，生产许可证号为SCXK
            NOS2                                     CYSLTR1
                    NR3C1       PPARG                        （京）2024-0016。实验前，大鼠在温度（23±1）℃、相对
                                             ABCB1
                                                              湿度 55%±5%、12 h 光/暗循环的环境中适应性喂养 1
               APP                                 PTGDR2
                        CYP3A4                                周，适应性喂养和实验期间均自由摄食、饮水。本实验
                                         ALOX5
                                CYP2C9                        已 获 得 河 南 省 中 医 院 伦 理 委 员 会 批 准（审 批 号 ：
                    AR                        TACR1
                                                              HNSZYYWZ-2025010005）。
                                                              2.2 方法
                         MAPK14         PDE4A
                                 DRD2
                                                              2.2.1 当归-茯苓药对煎液的制备
             图1 当归-茯苓药对与过敏性鼻炎的PPI网络图
                                                                  将100 g当归和100 g茯苓用纯化水洗净后于60 ℃
          1.6.4 核心靶点富集结果                                      烘干、粉碎（过 40 目筛），加入 10 倍量纯化水，于室温下
              GO 功能富集结果显示，MF 有 39 个条目、CC 有 20                 浸泡过夜，然后先以温火加热 40 min，再转武火加热 30
          个条目、BP有210个条目，其中MF中基因数最多的条目                         min，此过程重复2次，第2次煎煮加入6倍量纯化水；合
          为同一蛋白质结合（identical protein binding）和金属离             并 2 次滤液（煎液 pH 值为 4.5～6.0），浓缩至含生药量 2
          子结合（metal ion binding），CC 中基因数最多的条目为                g/mL，存于冰箱中备用。使用前，将药液用纯净水稀释
          细胞质膜（plasma membrane）和细胞质（cytoplasm），BP             至所需浓度即可。
          中基因数最多的条目为RNA聚合酶Ⅱ对转录的正向调                            2.2.2 建模与给药
          节（positive  regulation  of  transcription  by  RNA  poly‐  取50只大鼠，通过腹腔注射氢氧化铝（3 g）、生理盐
          merase Ⅱ）。                                          水（100 mL）、卵清蛋白（300 mg）的混合液（1 mL）建立过
              KEGG富集分析得到相关通路57条，包括癌症通路                        敏性鼻炎模型，连续注射该混合液7 d，每日1次，当大鼠
                                                                                                        [8]
         （pathways in cancer）、花生四烯酸代谢通路（arachidonic           出现打喷嚏、流鼻涕等症状时，提示模型建立成功 。另
          acid metabolism）、C 型凝集素受体信号通路（C-type lec‐           取10只健康大鼠为正常组，同期腹腔注射等体积生理盐
          tin receptor signal pathway）、脂质与动脉粥样硬化（lipid        水。将建模成功的大鼠随机分为模型组、氯雷他定组
                                                                                  [9]
          and atherosclerosis）等。其中，IL-17信号通路（IL-17 sig‐      （阳性对照组，0.9 mg/kg ）和当归-茯苓药对低、中、高剂
                                                                                               [10]
          naling pathway）、TNF信号通路（TNF signaling pathway）      量组（3、6、12 g/kg 当归-茯苓药对煎液 ），每组 10 只。
          为当归-茯苓药对干预过敏性鼻炎的典型炎症信号                              各给药组大鼠灌胃相应药液，正常组和模型组大鼠灌胃
          通路。                                                 等体积生理盐水，每日1次，连续30 d。
          2 动物实验验证当归-茯苓药对干预过敏性鼻炎                              2.2.3 大鼠行为学评分计算
                                                                                                [8]
          的机制                                                     末次给药后，通过量化叠加计分法 计算各组大鼠
          2.1 材料                                              的行为学评分，其中喷嚏不超过3次且鼻涕量少（鼻涕仅
          2.1.1 主要仪器                                          局限于鼻腔开口处，未形成明显液滴，不会顺着鼻周皮
              本研究所用主要仪器包括 Allegra 64R 型高速冷冻                   肤向下流淌）为 1 分；喷嚏 4～9 次，鼻涕过中线（以面部
          离心机（美国 Beckman Coulter 公司）、YD-B 型组织烤片               正中线为参照），多次抓挠鼻子为2分；喷嚏超过9次，鼻
          机和YD-6D型组织包埋机（浙江省金华市科迪仪器设备                          涕满面为3分。
          有限公司）、ELx808 型多功能酶标仪（美国 BioTek 公                    2.2.4 大鼠血清中IgE、组胺、IL-4水平检测
          司）、CX23型光学显微镜（日本Olympus公司）。                             行为学评分结束后，各组大鼠腹腔注射 3% 戊巴比
          2.1.2 主要试剂                                          妥钠诱导完全麻醉，收集腹主动脉血，以 3 000 r/min 离
              当归和茯苓饮片均由河南省中医院提供，由河南省                          心10 min，取上清液，按试剂盒说明书操作，检测血清中
          中医院药剂科主管药师侯瑞英鉴定，均为真品；IL-4 检                         IgE、组胺、IL-4水平。
          测试剂盒（批号 20240211）购自上海一研生物科技有限                       2.2.5 大鼠鼻黏膜组织病理形态观察
          公司；组胺检测试剂盒（批号20241018）购自天津安诺瑞                           大鼠麻醉取血后，处死，收集鼻黏膜组织，经脱钙、
          康生物技术有限公司；IgE 检测试剂盒（批号 20240613）                    包埋、切片（5 μm）后，用苏木精-伊红染色，观察大鼠鼻


          · 2780 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 22                            中国药房  2025年第36卷第22期
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