Page 65 - 《中国药房》2025年19期

2.2.2 供试品溶液的制备 0.1 min，经多点校正后进行Mark峰匹配，生成15批样品
取麝川脑立通颗粒粉末（过四号筛）0.5 g，精密称 的指纹图谱，并采用中位数法生成对照图谱R。结果（图
定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞并 2）显示，在 15 批样品中共确定 13 个共有峰。经与混合
称定质量，超声30 min，放冷；再次称定质量并补足减失 对照品溶液图谱（图1）比对，指认了其中7个共有峰，分
的质量，摇匀滤过，蒸干；残渣加70%甲醇溶解并定容至 别为 GA（峰 3）、CA（峰 6）、VA（峰 8）、FA（峰 9）、SI（峰
5 mL容量瓶中，0.22 μm微孔滤膜滤过，即得。 11）、SAB（峰12）、TA（峰13）。以对照图谱R为参照，采
2.3 指纹图谱分析 用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》计算
2.3.1 专属性考察 15批样品图谱的相似度。结果显示，15批样品图谱与对
取空白溶剂（70%甲醇）、“2.2.1”项下混合对照品溶 照图谱 R 的相似度在 0.961～1.000 范围内，各批次样品
液和“2.2.2”项下供试品溶液（编号S11），按“2.1”项下色 共有峰峰面积的RSD为7.7%～47.5%（n＝15）。这提示
谱条件进样测定，色谱图见图1。由图1可见，混合对照 不同批次样品的质量整体较为稳定，但样品中各成分含
品溶液及供试品溶液中各待测成分色谱峰与相邻色谱 量仍存在差异。
峰间的分离度均大于1.5，理论板数均大于5 000，且空白 170
160
溶剂对测定无干扰，表明该方法专属性良好。 150 R S15
140
130 S14
50 120 S13
110 S12
40 100 S11
S10
90
30 信号/mV 80 S9
S8
70
mAU 20 60 S7
S6
50
40 S5
10 空白溶剂 30 S4
混合对照品溶液 20 S3
供试品溶液 10 S2
0
0 S1
0 20 40 60 80 100 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88 92 96100
t/min
时间/min
3：GA；6：CA；8：VA；9：FA；11：SI；12：SAB；13：TA。 图2 15批麝川脑立通颗粒的HPLC指纹图谱及对照图
图1 空白溶剂、混合对照品溶液和供试品溶液的色谱图
谱R
2.3.2 精密度考察
2.3.6 不同批次麝川脑立通颗粒的质量差异评价
取“2.2.2”项下供试品溶液（编号S11），按“2.1”项下
将15批麝川脑立通颗粒样品的13个共有峰的峰面
色谱条件连续进样测定 6 次，以峰 12 为参照峰，计算得
积导入SIMCA 14.1软件进行正交偏最小二乘-判别分析
各共有峰相对保留时间（relative retention time，RRT）的
（orthogonal partial least squares discriminant analysis，
RSD≤1.61%、相对峰面积（relative peak area，RPA）的
OPLS-DA）。结果显示，模型对 X 和 Y 矩阵的解释率
RSD≤2.82%（n＝6），表明仪器精密度良好。 2 2 2
（R X、R Y）及模型预测有效性指标（Q）分别为 0.969、
2.3.3 重复性考察
0.722、0.535，均大于0.5，提示该模型可用于不同批次麝
取麝川脑立通颗粒（编号 S11）粉末 6 份，按“2.2.2”
川脑立通颗粒的有监督判别分析。OPLS-DA 得分图
项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测 （图 3A）显示，编号 S1、S6～S10 的样品聚为一类，编号
定，以峰 12 为参照峰，计算得各共有峰 RRT 的 RSD≤
S2～S5 的样品聚为一类，编号 S11～S15 的样品聚为一
1.32%、RPA 的 RSD≤3.47%（n＝6），表明该方法重复性 类。对建立的OPLS-DA模型进行200次置换检验，结果
良好。 显示，截距 R ＝0.093、Q ＝－0.456，且 R 和 Q 的回归线
2
2
2
2
2.3.4 稳定性考察 斜率为正，提示该模型无过拟合现象，可用于进一步的
取“2.2.2”项下供试品溶液（编号 S11），分别于制备 数据分析 [5―6] 。变量投影重要性（variable importance in
后 0、2、4、8、12、24 h 按“2.1”项下色谱条件进样测定，以 projection，VIP）是影响组间差异的重要指标，通常以
峰 12 为参照峰，计算得各共有峰 RRT 的 RSD≤1.61%、 VIP＞1 为标准筛选不同批次药物的质量差异性成分 ，
[7]
RPA 的 RSD≤2.82%（n＝6），表明该供试品溶液在制备 结果（图3B）显示，峰12、5、11的VIP均大于1，可能为15
后24 h内稳定性良好。 批样品潜在的质量差异性成分，其中峰 11、12 经对照品
2.3.5 指纹图谱的建立及相似度评价 指认分别为SI和SAB。
取 15 批麝川脑立通颗粒样品（编号 S1～S15）的供 2.4 6种成分的QAMS含量测定
试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样分析，将色谱信息 2.4.1 线性关系考察
导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》，以 精密吸取“2.2.1”项下混合对照品溶液 0.1、0.5、1.0、
编号S11的样品色谱图为参照图谱，设置时间窗宽度为 1.5、2.0 mL，用70%甲醇定容至5 mL容量瓶中，摇匀，即

中国药房 2025年第36卷第19期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 19 · 2411 ·