Page 60 - 《中国药房》2025年19期

2.1.2 供试品溶液 2.3.2 线性关系考察
将 13 批苦参药材用粉碎机粉碎，过 32 目筛。精密 精密量取“2.1.1”项下混合对照品溶液 100、200、
称取粉碎后的苦参粉末各 1.00 g，分别置于 50 mL 具塞 400、600、800 μL，以 70% 甲醇分别定容至 1 mL，再量取
锥形瓶中，加入 70% 甲醇 10 mL，超声提取 45 min（功率 “2.1.1”项下混合对照品溶液适量，作为12种成分的系列
250 W，频率90 kHz，温度45 ℃），冷却至室温，以70%甲 质量浓度线性工作液，按“2.2”项下色谱-质谱条件进样
醇补足减失的质量，以 3 000 r/min 离心 10 min，取上清 分析。以对照品进样质量浓度为横坐标（Ｘ）、峰面积为
纵坐标（Ｙ）进行回归分析，可知12种成分在各自进样质
液，0.22 μm有机滤膜过滤，滤液稀释100倍，即得。
量浓度范围内线性关系均良好。结果见表3。
2.2 色谱-质谱条件
2.2.1 色谱条件 表3 苦参中12种成分的线性关系考察结果
采用 Shim-pack GIST-HP C18 （100 mm×2.1 mm，3 成分 回归方程 r 线性范围/（ng/mL）
4
苦参碱 Y＝1.017×10 X+2.163×10 6 0.999 1 172.800～1 728.000
μm）色谱柱，以甲醇（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相进行 氧化苦参碱 Y＝3.641×10 X+5.281×10 6 0.999 1 1 811.850～18 118.500
3
4
梯 度 洗 脱（0.01～0.22 min，10%A→26%A；0.22～1.10 甜菜碱 Y＝2.681×10 X+1.485×10 5 0.999 1 7.592～75.920
3
金雀花碱 Y＝4.095×10 X+1.195×10 6 0.999 5 872.100～8 721.000
min，26%A→47%A；1.10～3.10 min，47%A→65%A；
4
N-甲基金雀花碱 Y＝1.202×10 X+1.267×10 6 0.999 4 179.400～1 794.000
3
3.10～5.20 min，65%A→74%A；5.20～5.50 min，74%A→ 槐定碱 Y＝7.546×10 X+1.601×10 6 0.999 4 261.040～2 610.400
3
染料木苷 Y＝4.205×10 X－4.438×10 3 0.999 9 26.335～263.350
92%A；5.50～6.20 min，92%A→95%A；6.20～6.60 min，
高丽槐素 Y＝4.103×10 X－2.258×10 4 0.999 8 58.600～586.000
3
95%A→10%A）；体 积 流 量 为 0.25 mL/min；柱 温 为 苦参酮 Y＝4.738×10 X+5.092×10 6 0.999 1 1 074.080～10 740.800
3
4
35 ℃；进样量为3 μL。 芒柄花素 Y＝3.209×10 X+1.342×10 5 0.999 6 20.605～206.050
3
苦参醇Ⅰ Y＝5.942×10 X+5.750×10 5 0.999 4 303.000～3 030.000
2.2.2 质谱条件 降苦参酮 Y＝5.981×10 X+2.117×10 6 0.999 1 512.000～5 120.000
3
采用电喷雾离子源（ESI），在正（+）、负（－）离子电 2.3.3 精密度试验
离模式下扫描，采用 MRM 模式，分段采集数据；喷雾电 精密吸取“2.1.1”项混合对照品溶液 3 μL，按“2.2”
压为 3.80 kV（+）、3.50 kV（－）；雾化气体积流量为 3 项下色谱-质谱条件进样分析，平行测定 6 次，计算得上
L/min；加热气体积流量为10 L/min；接口温度为300 ℃； 述 12 种成分（顺序同表 2，下同）峰面积的 RSD 分别为
脱溶剂温度为526 ℃；加热块温度为400 ℃。各成分质 0.70%、1.46%、1.54%、2.44%、2.89%、1.30%、2.82%、1.58%、
谱参数见表2。 2.72%、0.41%、1.36%、2.23%，表明仪器精密度良好。
表2 苦参中12种成分的质谱参数 2.3.4 重复性试验
取样品（编号K1）6份，按“2.1.2”项下方法制备供试
成分 t R/min 母离子m/z 子离子m/z 碰撞能量/eV
苦参碱 2.474 249.2 148.2 －36 品溶液，按“2.2”项下色谱-质谱条件进样分析，记录峰面
氧化苦参碱 2.659 265.2 247.2 －29/－30 积，并根据标准曲线计算得上述12种成分的平均含量分
甜菜碱 1.107 118.2 58.1 －29
金雀花碱 1.625 191.1 148.1 －21 别 为 481.530、17 879.627、8.274、964.237、1 408.788、
N-甲基金雀花碱 1.207 205.1 58.1 －28 601.466、45.332、138.101、7 625.855、20.179、883.353、
槐定碱 2.499 249.2 150.2 －32 2 269.820 μg/g，RSD 分 别 为 1.91%、0.27%、1.37%、
染料木苷 4.100 433.2 271.0 －18
高丽槐素 6.449 285.2 151.2 －19 0.45%、1.05%、1.31%、1.79%、1.05%、1.79%、1.16%、
苦参酮 7.576 439.3 303.1 －18/－33 1.60%、1.70%（n＝6），表明该方法具有良好的重复性。
芒柄花素 6.498 267.2 252.1 21 2.3.5 稳定性试验
苦参醇Ⅰ 7.273 453.1 275.2 22/20
降苦参酮 7.763 423.2 261.2 19/20 取样品（编号 K1），按“2.1.2”项下方法制备供试品
溶液，分别在室温放置0、2、4、8、12、24 h时，按“2.2”项下
2.3 方法学考察
色谱-质谱条件进样分析，计算得上述 12 种成分峰面积
2.3.1 专属性考察
的 RSD 分 别 为 1.33%、0.25%、0.82%、0.34%、0.97%、
取“2.1”项下混合对照品溶液、供试品溶液及空白溶 0.97%、1.66%、1.09%、1.57%、0.96%、1.44%、1.47%，表明
液（70% 甲醇）适量，按“2.2”项下色谱-质谱条件进样分 供试品溶液在24 h内具有良好的稳定性。
析，记录图谱。结果显示，供试品溶液图谱中12种成分 2.3.6 加样回收率试验
的出峰位置与对照品基本一致，且空白溶液对待测峰无 称取已知成分含量的样品（编号 K1）6 份，每份约
干扰，说明本方法专属性较好。各成分的 MRM 图谱 0.500 g，分别按样品中成分浓度质量约 100% 的比例加
请 扫描文章首页二维码，进入“增强出版”页面查看 入对照品，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”
附图1。 项下色谱-质谱条件分别进样分析，计算得上述 12 种成

· 2406 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 19 中国药房 2025年第36卷第19期