Page 72 - 《中国药房》2025年18期
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Image J软件分析目的蛋白与内参(GAPDH或β-actin)的                  细胞数和迁移细胞数均显著减少(P<0.05)。结果
          灰度值比值。分别以p-JNK与JNK、p-p38与p38的比值                     见图1。

          评价“2.3.1”项下细胞中 MAPK 信号通路相关蛋白的表                      3.3 SOP对CNE-1细胞凋亡的影响
          达水平;以p-JNK与JNK、p-p38与p38的比值验证SB和                        与空白组比较,SOP-L组、SOP-M组、SOP-H组细胞
          SP抑制剂对“2.3.2”项下细胞中相关蛋白的影响,并检测                       凋亡率均显著升高(P<0.05)。结果见图2。
          细 胞 中 生 物 学 行 为 相 关 蛋 白 MMP-9、Ki67、cleaved-         3.4 SOP 对 CNE-1 细胞中 MAPK 信号通路相关基因
          caspase-3的表达水平。
                                                              及蛋白表达的影响
          2.9 统计学分析
                                                                  与空白组比较,SOP-L组、SOP-M组、SOP-H组细胞
              采用 SPSS 22.0 软件进行统计分析。计量资料以
                                                              中 MEK、ERK1、ERK2(SOP-L 组除外)、JNK mRNA 表
          x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两
                                                              达水平均显著降低,p-ERK/ERK、p-p38/p38、p-JNK/JNK
          比较采用LSD-t检验。检验水准α=0.05。
                                                              均显著升高(P<0.05)。结果见图3。
          3 结果
                                                              3.5 SP 及 SB 对 CNE-1 细胞中 p-p38/p38 值、p-JNK/
          3.1 SOP浓度的筛选
                                                              JNK值的影响
              与不加SOP(即加入PBS)比较,SOP的浓度达到25
                                                                  与空白组比较,SOP-H 组细胞中 p-p38/p38 值和 p-
          μmol/L 时,能够显著抑制 CNE-1 细胞的存活率(P<
          0.05),且随着SOP浓度的升高,其抑制作用也相应增强。                       JNK/JNK值均显著升高(P<0.05);SOP-H+SB组细胞中
          SOP对CNE-1细胞的半数抑制浓度为103.40 μmol/L。为                  p-JNK/JNK 值显著升高(P<0.05);SOP-H+SP 组细胞中
          了保证细胞的有效存活率,本研究选择 25、50、100                         p-p38/p38 值显著升高(P<0.05),p-JNK/JNK 显著降低
          μmol/L作为SOP的低、中、高浓度进行后续实验。                         (P<0.05)。与 SOP-H 组比较,SOP-H+SB 组和 SOP-H+
          3.2 SOP对CNE-1细胞侵袭、迁移的影响                             SP 组细胞中 p-p38/p38 值和 p-JNK/JNK 值均显著降低

              与空白组比较,SOP-L组、SOP-M组、SOP-H组侵袭                  (P<0.05)。结果见图4。

                                                                                                       a
                                                                                                     a
                                                                                              300   a
                                                                                              侵袭细胞数/个  200
                                                                                              100

                                                                                                0
                   Ⅰ                   Ⅱ                   Ⅲ                   Ⅳ                  Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ
                                            A.细胞侵袭显微图                                     B.侵袭细胞数比较(x±s,n=3)
                                                                                                       a
                                                                                                     a
                                                                                              1 000
                                                                                                    a
                                                                                              800
                                                                                             迁移细胞数/个  600
                                                                                              400
                                                                                              200
                                                                                                0
                   Ⅰ                   Ⅱ                   Ⅲ                   Ⅳ                  Ⅰ  Ⅱ  Ⅲ  Ⅳ
                                            C.细胞迁移显微图                                     D.迁移细胞数比较(x±s,n=3)
             Ⅰ:空白组;Ⅱ:SOP-L组;Ⅲ:SOP-M组;Ⅳ:SOP-H组;a:与空白组比较,P<0.05。
                                         图1 SOP对CNE-1细胞侵袭、迁移的影响

                 1×10 7  Q1     Q2     1×10 7  Q1     Q2      1×10 7  Q1     Q2      1×10 7  Q1     Q2
                     0.13%      3.01%       0.48%     4.21%      6  3.04%    12.17%     6  5.93%    18.61%
                 1×10 6                1×10 6                 1×10                   1×10
                 1×10 5                1×10 5                 1×10 5                 1×10 5
                PI  1×10 4             PI  1×10 4             PI  1×10 4             PI  1×10 4
                 1×10 3                1×10 3                 1×10 3                 1×10 3
                 1×10 2                1×10 2                 1×10 2  Q4     Q3      1×10 2  Q4     Q3
                     Q4         Q3          Q4        Q3          79.96%     4.83%       72.07%     3.39%
                     95.87%     0.99%       93.52%    1.79%
                                                                                                   6
                                                                                               5
                                                                        5
                                                                             6
                           5
                                                  5
                                                      6
                               6
                        1×10   1×10   1×10 7   1×10   1×10   1×10 7  1×10   1×10   1×10 7   1×10   1×10   1×10 7
                         Annexin Ⅴ              Annexin Ⅴ             Annexin Ⅴ                   Annexin Ⅴ
                         A.空白组                 B. SOP-L组              C. SOP-M组             D. SOP-H组
                                            图2 SOP对CNE-1细胞凋亡的影响
          · 2282 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 18                            中国药房  2025年第36卷第18期
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