Page 70 - 《中国药房》2025年18期
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number of migratory cells， and mRNA expressions of MEK， ERK1， ERK2 （except for the SOP-L group） and JNK， but increase
          the  apoptosis  rate  of  cells  and  phosphorylation  levels  of  ERK，  JNK，  and  p38  proteins （P＜0.05）.  Compared  with  the  SOP-H
          group，  the  protein  phosphorylation  levels  of  p38  and  JNK，  and  the  protein  expression  of  cleaved-caspase-3  were  decreased
          significantly  in  SOP-H+SB  group  and  SOP-H+SP  group，  while  the  number  of  invasive  cells，  cell  migration  rate，  and  the  protein
          expression  levels  of  MMP-9  and  Ki67  were  all  increased  significantly （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  SOP  can  inhibit  the
          proliferation，  migration  and  invasion  of  CNE-1  cells，  and  induce  the  apoptosis，  the  mechanisms  of  which  may  be  associated  with
          promoting the phosphorylation of proteins related to the MAPK signaling pathway.
          KEYWORDS     nasopharyngeal carcinoma； sophoranone； mitogen-activated protein kinase； proliferation； apoptosis



              鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是起源于           Beckman Coulter 公司），CFX96 Touch 型实时荧光定量
          鼻咽部上皮细胞的恶性肿瘤，具有显著的地域分布特                             聚合酶链式反应（RT-qPCR）仪、ChemiDoc 型成像系统
                                                        [1]
          征，在东南亚及我国华南地区的发病率居高不下 。                            （美国 Bio-Rad 公司），徕卡 DM IL LED 型倒置显微镜
          WHO 统计数据显示，全球约 80% 的 NPC 新发病例集中                    （德国Leica Microsystems公司）。
          于东亚及东南亚地区，而放疗联合化疗的综合治疗策略
                                                              1.2 主要药品与试剂
          虽能有效改善局部进展期患者预后，但仍有 20%～30%
                                                                  SOP 对照品（批号 21S059-A2，纯度 95.80%）购自上
                                                        [1]
          的患者面临治疗抵抗、远处转移及复发等临床困境 。
                                                              海甄准生物科技有限公司；p38 抑制剂 SB203580（简称
          近年来，靶向治疗及天然产物抗肿瘤活性研究为NPC治
                                                             “SB”，货 号 HY-10256，纯 度 99.96%）及 JNK 抑 制 剂
          疗提供了新思路，但针对关键信号通路的精准干预机制
                        [2]
          仍有待深入探索 。                                           SP600125（简称“SP”，货号HY-12041，纯度99.73%）均购
              促分裂原活化的蛋白激酶（mitogen-activated pro‐              自美国 MedChemExpress 公司；CCK-8 细胞增殖检测试
          tein kinase，MAPK）信号通路作为细胞应激反应的核心                    剂（批号 C0039）购自上海碧云天生物技术有限公司；
          调控网络，在肿瘤发生、发展中发挥双重调控作用                      [3―4] 。  Annexin Ⅴ-FITC/PI细凋亡试剂盒（批号KGA1026）购自
          其中 p38 丝裂原激活的蛋白激酶（p38 mitogen-activated             江苏凯基生物技术股份有限公司；聚偏二氟乙烯膜（货
          protein kinase，简称“p38”）和c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-         号 IPVH00010）购自美国 Merck Millipore 公司；ECL 化
          terminal kinase，JNK）信号通路异常激活已被证实与                   学发光试剂（货号32106）购自美国Thermo Fisher Scien‐
          NPC 细胞增殖失控、凋亡逃逸及上皮-间质转化密切相
                                                              tific 公司；兔抗 JNK、磷酸化 JNK（phosphorylated-JNK，
            [5]
          关 。研究表明，p38可通过磷酸化下游转录因子调控细
                                                              p-JNK）、胞 外 信 号 调 节 激 酶 1/2（extracellular  signal-
          胞周期蛋白表达，JNK信号通路激活可诱导B细胞淋巴
                                                              regulated  kinase  1/2，ERK1/2）、磷 酸 化 ERK1/2（phos‐
          瘤-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein，Bax）与B细
                                                              phorylated ERK1/2，p-ERK1/2）、p38、磷酸化 p38（phos‐
          胞淋巴瘤2（B cell lymphoma-2，Bcl-2）比例失衡，提示双
          重调控 p38 和 JNK 信号通路可能成为干预 NPC 进程的                    phorylated  p38，p-p38）单 克 隆 抗 体（ 批 号 分 别 为
          潜在靶点    [6―7] 。                                     ab208035、ab76572、ab184699、ab223500、ab170099、
              山豆根是豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gag‐             ab178867）和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋
          nep.的干燥根和根茎，其抗炎、抗肿瘤活性已在肝癌、乳                         白G二抗（批号ab205718）均购自英国Abcam公司；兔抗
          腺癌等模型中初显成效            [8―9] 。山豆根素（sophoranone，      甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehy‐
          SOP）是从山豆根中提取的异戊烯基黄酮类化合物，药                           drogenase，GAPDH）多克隆抗体（货号 D110016）购自生
          理学研究揭示，SOP对人NPC细胞系CNE-1有一定的抑
                                                              工生物工程（上海）股份有限公司；兔抗增殖细胞核抗原
          制作用，可能是山豆根抗NPC的主要活性成分                   [9―10] ，但其
                                                              Ki67单克隆抗体（货号84192-4-RR）、兔抗基质金属蛋白
          作用机制尚未明确。基于此，本研究以CNE-1细胞为研
                                                              酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）多克隆抗体（货
          究对象，观察 SOP 对 CNE-1 细胞生物学行为的影响，并
                                                              号 10375-2-AP）、兔抗活化的胱天蛋白酶-3（cleaved-
          从调控MAPK信号通路的角度探讨其可能的机制，以期
                                                              caspase-3）单克隆抗体（货号25128-1-AP）均购自武汉三
          为抗NPC新药开发提供参考。
          1 材料                                                鹰生物技术有限公司。
          1.1 主要仪器                                            1.3 细胞
              本研究所用主要仪器包括 Accuri C6 plus 型流式细                     CNE-1细胞购自北纳创联生物科技有限公司（批号
          胞仪（美国 BD 公司），DTX880 型多功能酶标仪（美国                      20210426）。


          · 2280 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 18                            中国药房  2025年第36卷第18期
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