Page 43 - 《中国药房》2025年17期
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levels of SOD1 and SOD2， as well as SOD activity， were significantly increased in the PLC/PRF/5-shAFP group （low-expression）
         （P＜0.05）. After  48  hours  of  SOD  treatment，  compared  with  control  group，  the  scratch  healing  rates  of  PLC/PRF/5  cells  in  the
          0.375， 0.75， 1.5 and 3 U/mL SOD groups were significantly reduced （P＜0.05）； after 72 hours of SOD treatment， compared with
          control  group，  the  scratch  healing  rates  of  PLC/PRF/5  cells  in  the  0.375，  0.75，  and  1.5  U/mL  SOD  groups  were  significantly
          reduced （P＜0.05  or  P＜0.01）.  Compared  with  control  group，  proliferation  rates  of  PLC/PRF/5  cells  were  significantly  reduced  in
          the  0.375，  0.75，  1.5  and  3  U/mL  SOD  groups （P＜0.05  or  P＜0.01）.  Compared  with  the  PLC/PRF/5  group  before  up-regulating
          SOD1  and  SOD2  expression，  the  expression  levels  of  AFP  and  Src  in  the  PLC/PRF/5-oeSOD1  and  PLC/PRF/5-oeSOD2  groups
         （over-expression）  after  up-regulating  SOD1  and  SOD2  expression  were  significantly  reduced （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  A
          certain  concentration  of  SOD  can  inhibit  malignant  behavior  such  as  migration  and  proliferation  of  PLC/PRF/5  cells，  and  the
          expression level and activity of SOD are negatively correlated with AFP.
          KEYWORDS    superoxide dismutase； alpha fetoprotein； hepatocellular carcinoma； malignant behavior； anti-cancer drugs



              超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）是维            与 AFP 表达阳性的肝癌细胞的恶性行为有关                  [18―19] 。本
          持机体活性氧（reactive oxygen species，ROS）动态平衡            研究以 AFP 表达阳性的人肝癌细胞 PLC/PRF/5 为主要
          的主要抗氧化物，可催化超氧化物转化为 H2O 和 O2，消                      研究对象，探索SOD给药对PLC/PRF/5细胞恶性生物学
          耗过量的 ROS    [1―3] 。在自然状态下，ROS 和抗氧化物维               行为的影响，并分析SOD与AFP表达量的相关性，以期
          持动态平衡，但在发生氧化应激时，大量 ROS 的产生或                        为将SOD开发为靶向AFP的抗HCC用药提供新思路。
          滞留可致 DNA 过度损伤，进而导致癌症发生                [2―3] 。因此    1 材料
          SOD 被认为具有抗炎、抗肿瘤及免疫调控等功能，在化                         1.1 主要仪器
          妆品、医学等领域得以广泛应用。研究显示，SOD 可作                             本研究所用主要仪器包括IMS-100型制冰机（南京
          为保健品的主要成分改善身体机能，在化妆品中添加                            贝登医疗股份有限公司）、Centrifuge 5417R 型离心机
          SOD 也被验证是安全、无毒副作用的，SOD 还可作为靶                      （德国Eppendorf公司）、hh-2型数显恒温水浴锅（上海力
          向消炎药物使用       [4―6] 。此外，国内外学者在 SOD 预防和             辰邦西仪器科技有限公司）、PowerPac 型电泳仪（美国
          治疗心脑血管疾病、自身免疫疾病以及肿瘤的研究方面                           Bio-Rad 公司）、Orbital Shake TS-1 和 TS-2 型脱色摇床
                                     [7]
          也取得了一定进展，其中 Lee 等 研究以多细胞球体作                       （海门市其林贝尔仪器制造有限公司）、SPRING-R20
                                                    [8]
          为实体瘤模型发现SOD具有抗肿瘤效果，Wang等 研究                       （i+）型纯水系统（广州誉维生物科技仪器有限公司）、
          显示 SOD2 过表达能够抑制肝癌细胞的转移，还有多项                        ZWY-103B 和 ZWY-100D 型恒温摇床（上海智城分析仪
          动物实验证实外源 SOD 单独或联合使用可用于治疗肠                         器制造有限公司）、Ⅸ81 型荧光共聚焦显微镜（日本
              [9]
                               [11]
                      [10]
          损伤 、肾损伤 、肺损伤 及多种癌症的治疗                  [12—13] 。然  Olympus公司）、Epoch型全波长酶标仪（美国Bio Tek公
          而，在分子机制层面尚无确凿的证据表明通过服用抗氧                           司）、Tanon 5200 Multi 型化学发光成像仪（上海天能生
          化物能够降低癌症的发病率或抑制肿瘤的恶化程度。                            命科学有限公司）、Cryosystem 2000 型液氮罐（美国
              原发性肝癌（primary liver cancer，PLC）是全球高发           Chart-MVE 公司）、UNIVERSAL 320 型台式离心机（德
          的消化系统恶性肿瘤，我国 2022 年的 PLC 新发病例和                     国 Hettich 公司）、LABSELECT 13112A 型细胞培养瓶
          病死人数分别为 36.765 7 万和 31.654 4 万，分别位于我              （北京兰杰柯科技有限公司）。
          国恶性肿瘤新发病例数和病死人数的第 4 位和第 2                          1.2 主要药品与试剂
          位 [10，12] 。 值 得 注 意 的 是 ，我 国 人 口 约 占 全 球 人 口 的         SOD、抗 β-肌动蛋白（β-actin）小鼠单克隆抗体、
          17.4%，而 PLC 新发病例数和病死人数占全球恶性肿瘤                      QuickBlockᵀᴹ Western二抗稀释液、QuickBlockᵀᴹ Western
          新发病例数和病死人数的 42.45% 和 40.14%            [14―17] 。因  一抗稀释液、胰酶细胞消化液（批号分别为 S0088、
          此，我国构建完善的 PLC 防控、诊断和治疗体系尤为必                        AF0003、P0258-100 ml、P0256-100 ml、C0203-100 ml）均
          要。肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）作为PLC          购自上海碧云天生物技术有限公司；高糖 DMEM 培养
          中最常见的病理类型，是目前PLC预防和治疗的主要研                          基 、青 霉 素 - 链 霉 素 溶 液（批 号 分 别 为 PM150210、
          究对象。                                               PB180120）均购自武汉普诺赛生命科技有限公司；免疫
              本 课 题 组 前 期 研 究 显 示 ，甲 胎 蛋 白（alpha-            染色封闭液、动物全蛋白提取试剂盒、Bradford法蛋白浓
          fetoprotein，AFP）作为 HCC 的临床诊断血清指标，已被                度测定试剂盒、CCK-8试剂、Bis-Tris预制胶（4%～12%，
          证实具有诱导肝细胞恶性转化并促进肝癌细胞恶性行                            15 孔）、快速封闭液Ⅰ、EZ-Buffers C 10×Western 转膜
          为的作用；而 SOD 在人正常肝细胞 L-02 和 AFP 表达阴                  液、SOD 活性检测试剂盒、辣根过氧化物酶（HRP）标记
          性的人肝癌细胞HLE中的表达量相当，在AFP表达阳性                         的山羊抗兔IgG二抗、HRP标记的鼠抗兔IgG二抗、HRP
          的人肝癌细胞PLC/PRF/5中的表达降低，提示SOD可能                      标记的兔抗鼠IgG二抗、HRP标记的山羊抗鼠IgG二抗、


          中国药房  2025年第36卷第17期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 17    · 2121 ·
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