Page 46 - 《中国药房》2025年17期

AFP 69 kDa 5.0 L-02组 4.5
4.5 HLE组 4.0
蛋白表达量 4.0 2.5 L-02-GFP或HLE-GFP或PLC/
SOD1 15 kDa 3.5 PLC/PRF/5组 3.5
SOD2 25 kDa 3.0 （ U/50 μg总蛋白 ） 3.0 L-02或HLE或PLC/PRF/5组
2.5
β-actin 43 kDa 2.0 2.0 PRF/5-ZsGreen组
L-02-oeAFP 或 HLE-oeAFP 或
1.5
1.5
PLC/PRF/5-shAFP组
PLC/PRF/5组
L-02组 HLE组 1.0 0 SOD活性/ 1.0
0.5
0.5
SOD1
SOD2
A. SOD1、SOD2表达电泳图 B. SOD1、SOD2表达量柱状图（x±s，n＝3） 0 L-02细胞 HLE细胞 PLC/PRF/5细胞
a：组间比较，P＜0.05。 a：组间比较，P＜0.05。
图1 L-02 组、HLE 组、PLC/PRF/5 组细胞中的 SOD 表 图3 改变 AFP 表达对 L-02、HLE、PLC/PRF/5 细胞中
达情况 SOD活性的影响（x±s，n＝3）
5-shAFP组细胞中的SOD1、SOD2表达量显著升高（P＜ 的划痕愈合率显著降低（P＜0.05或P＜0.01），而3 U/mL
0.05），但上调 L-02 和 HLE 细胞中的 AFP 表达后，L-02- 的SOD处理对细胞迁移的抑制作用消失。
oeAFP 组和 HLE-oeAFP 组细胞中的 SOD1、SOD2 表达 3.3.2 对细胞增殖能力的影响
量并无显著变化（P＞0.05）。 CCK-8 细胞增殖检测结果（图 6）显示，与对照组比
SOD 活性检测结果（图 3）显示，下调 PLC/PRF/5 细 较，0.375、0.75、1.5、3.0 U/mL 组的 PLC/PRF/5 细胞增殖
胞中的AFP表达后，PLC/PRF/5-shAFP组细胞中的SOD 率 显 著 降 低（P＜0.05 或 P＜0.01），且 SOD 浓 度 在
活性显著升高（P＜0.05）；值得注意的是，上调HLE细胞 0.375～1.5 U/mL之间，PLC/PRF/5细胞增殖率有随SOD
中的 AFP 表达后，HLE-oeAFP 组细胞中的 SOD 活性显 给药浓度升高而降低的趋势，而 3 U/mL 的 SOD 处理并
著降低（P＜0.05）。 没有使细胞增殖率继续下降。
L-02细胞 HLE细胞 PLC/PRF/5细胞
3.4 上调SOD表达对PLC/PRF/5细胞恶性生物学行为
GFP
oe-AFP 相关蛋白AFP、Src表达的影响
sh-AFP Western blot 检测结果（图 7）显示，与上调 SOD1、
SOD1 15 kDa
SOD2 表达前的 PLC/PRF/5 组比较，PLC/PRF/5-oeSOD1
SOD2 25 kDa 组和PLC/PRF/5-oeSOD2组细胞中的AFP、Src表达量均
AFP 69 kDa 显著降低（P＜0.05）。
GAPDH 34 kDa 4 讨论
A.电泳图 ROS 和抗氧化物在自然状态下维持动态平衡 [2―3] 。
2.0 而当发生氧化应激时，大量ROS的产生或滞留，与DNA
1.8 L-02或HLE或PLC/PRF/5组 [20―21]
1.6
SOD1表达量 1.4 L-02-GFP或HLE-GFP或PLC/ 反应造成 DNA 损伤 ，进而导致癌症的发生。SOD
1.2
PRF/5-ZsGreen组
1.0
L-02-oeAFP 或 HLE-oeAFP 或
家族是在进化中较为保守的一个酶家族，是消除细胞
0.8
PLC/PRF/5-shAFP组
0.6
0.4
0.2 ROS 的关键酶。在哺乳动物中，SOD 家族有 3 个成员：
0
L-02细胞 HLE细胞 PLC/PRF/5细胞
SOD1 在细胞质、细胞核和线粒体内膜上均有表达；
1.8
1.6 L-02或HLE或PLC/PRF/5组 SOD2仅被检测到位于线粒体基质中；SOD3则在细胞外
1.4
SOD2表达量 1.2 L-02-GFP或HLE-GFP或PLC/ 表达。对临床血清样本检测的统计研究表明，许多癌症
1.0
PRF/5-ZsGreen组
0.8
L-02-oeAFP 或 HLE-oeAFP 或
0.6
0.4
0.2 PLC/PRF/5-shAFP组 患者血清中的 SOD mRNA 或蛋白表达量均出现改
[24]
[22―23]
0 变 。其中，Zhang等 在检测SOD表达量的同时，还
L-02细胞 HLE细胞 PLC/PRF/5细胞
B.表达量柱状图（x±s，n＝3） 检测了各组人群血清中的 AFP 表达量，结果显示，携带
+、－：分别表示慢病毒的有、无；a：组间比较，P＜0.05。 乙型肝炎病毒的肝癌患者血清中 AFP 表达量显著高于
图2 改变 AFP 表达对 L-02、HLE、PLC/PRF/5 细胞中
未携带乙型肝炎病毒的肝癌患者以及健康人，而两组患
SOD表达的影响
者血清中 SOD 的表达趋势与 AFP 相反，即该组试验人
3.3 SOD 给药对 PLC/PRF/5 细胞恶性生物学行为的 群血清中 SOD 和 AFP 表达量呈负相关。此外，Xu 等 [23]
影响 研究显示，HCC 患者血清中 AFP 表达量升高的同时，
3.3.1 对细胞迁移能力的影响 SOD活性呈下降趋势，该趋势与本研究对不同肝癌细胞
细胞划痕实验结果（图 4、图 5）显示，与 0 U/mL 比 中SOD表达量的检测结果一致，表明在肝癌患者的血清
较，0.375、0.75、1.5、3 U/mL SOD作用48 h时PLC/PRF/5 或癌组织以及在肝癌细胞中，SOD 与 AFP 的表达呈负
细胞划痕愈合率显著降低（P＜0.05）；与 0 U/mL 比较， 相关。
0.375、0.75、1.5 U/mL SOD 作用 72 h 时 PLC/PRF/5 细胞 作为HCC的临床诊断指标，AFP具有诱导肝细胞恶
· 2124 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 17 中国药房 2025年第36卷第17期