Page 61 - 《中国药房》2025年15期

平方欧氏距离
0 5 10 15 20 25 30
S5 20
S12 10
S11
S15 t[2] 0
S4 －10
S7 －20
S8 －30
S9 －40
S3 －60 －40 －20 0 20 40
S10 t[1]
S13
S1 A. OPLS-DA得分图
S2
S6 4
S14 3
图4 15批样品的HCA树状图 2
VIP值 1
共得到 5 个主成分，其累积方差贡献率为 85.446%（第 1 0
主成分的方差贡献率为 32.350%，第 2 主成分的方差贡 －1 7 17 15 16 10 1 2 19 9 18 14 3 13 5 12 4 6 11 8
峰号
献率为 21.295%，第 3 主成分的方差贡献率为 12.310%，
B. VIP得分图
第4主成分的方差贡献率为10.394%，第5主成分的方差 图6 15批样品的OPLS-DA得分图和VIP得分图
贡献率为 9.097%），可反映 15 批样品的主要信息。其
2.5 多指标成分含量测定
中，第 1～5 主成分中方差贡献率较高的成分分别为峰
2.5.1 专属性考察
16（脱氢紫堇碱）、峰 6、峰 18、峰 17（新橙皮苷）和峰 19
取空白溶剂（50%甲醇）、混合对照品溶液和供试品
（甘草酸）。PCA 得分图（图 5）显示，15 批样品可分为 3
溶液（编号 S1），分别按“2.1”项下色谱条件进样测定。
类：编号为 S1～S2、S5、S11～S12 的样品聚为第 1 类；编
结果（图 7）显示，供试品溶液和混合对照品溶液中 7 个
号为 S6～S9 的样品聚为第 2 类；编号为 S3～S4、S10、
成分的保留时间一致，7 个成分的色谱峰与相邻色谱峰
S13～S15 的样品聚为第 3 类。该结果与 HCA 结果相
间的分离度均大于 1.5，理论板数以各待测成分峰计均
近。其中，PCA的主成分由全体变量共同贡献，HCA结
不低于5 000，且空白溶剂不干扰测定，说明该方法专属
果可能由某些高方差变量主导，最终导致二者聚类结果
性良好。
略有不同。
900
4
2 750
t[2] 0 a
600
－2
－4 U/mV 450
－6
－8 －6 －4 －2 0 2 4 6 b
t[1] 300
图5 15批样品的PCA得分图
150
2.4.3 OPLS-DA c
0
以 15 批样品的共有峰峰面积为变量，将其导入 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50
t/min
SIMCA 14.1 软件进行 OPLS-DA。该模型稳定性参数 1：腺嘌呤；7：5-羟甲基糠醛；10：延胡索乙素；15：柚皮苷；16：脱氢
2
R Y＝0.794，预测参数 Q ＝0.615，均大于 0.5，表明建立 紫堇碱；17：新橙皮苷；19：甘草酸；a：空白溶剂；b：混合对照品溶液；c：
2
的 OPLS-DA 模型具有较高的稳定性与较好的预测能 供试品溶液。
图7 空白溶剂、混合对照品溶液和供试品溶液的
力。OPLS-DA 得分图（图 6A）显示，15 批样品可分为 3
HPLC色谱图
类：编号为 S1、S3、S10、S13～S14 的样品聚为第 1 类；编
号为S2、S6、S9的样品聚为第2类；编号为S4～S5、S7～ 2.5.2 线性关系考察
S8、S11～S12、S15 的样品聚为第 3 类。该结果与 HCA 精密吸取“2.2.2”项下混合对照品溶液，用甲醇稀释
结果相近。 2、5、10、50、100倍，取混合对照品原溶液及系列稀释液，
本研究以变量重要性投影（variable importance in 分别按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。以各
projection，VIP）值＞1 为标准，共筛选出 3 个差异性成 成分质量浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线
分，分别为峰7（5-羟甲基糠醛）、峰17（新橙皮苷）和峰15 性拟合。结果（表 1）显示，各成分在其进样质量浓度范
（柚皮苷），详见图6B。 围内线性关系均良好。

中国药房 2025年第36卷第15期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 15 · 1879 ·