Page 73 - 《中国药房》2025年14期

2.1.3 混合对照品溶液的制备 示，10 批样品与对照指纹图谱 R 的相似度为 0.961～
精密称定红景天苷、莫诺苷、儿茶素、芍药苷、斯皮 0.995，表明样品的整体质量差异较小。
诺素、阿魏酸、异槲皮苷、毛蕊花糖苷、丹皮酚、大黄素、 2.1.9 共有峰的指认
腺苷对照品适量，分别置于 10 mL 容量瓶中，加甲醇定 取“2.1.3”项下混合对照品溶液，按“2.1.1”项下色谱
容，制得各单一对照品贮备液。取上述各单一对照品贮 条件进样测定，记录色谱图，经与对照指纹图谱R比对，
备液适量，置于 5 mL 容量瓶中，加甲醇定容，得上述各 共指认出 11 个成分，分别为腺苷（峰 1）、红景天苷（峰
成分质量浓度分别为 73.080、164.552、40.868、97.120、 4）、莫诺苷（峰6）、儿茶素（峰7）、芍药苷（峰10）、斯皮诺
21.456、16.856、31.616、24.160、8.442、16.884、27.456 素（峰 11）、阿魏酸（峰 12）、异槲皮苷（峰 13）、毛蕊花糖
μg/mL的混合对照品溶液。 苷（峰 14）、丹皮酚（峰 23）及大黄素（峰 24）。结果
2.1.4 精密度试验 见图2。
取“2.1.2”项下供试品溶液（编号S1），按“2.1.1”项下 1.10
1.00 23
色谱条件连续进样测定6次。以红景天苷为参照峰，得 0.90 7 12 13
0.80
0.70 4 6 11 14 24
到各共有峰相对保留时间的RSD均小于0.34%（n＝6）， AU 0.60 1 10 混合对照
0.50
相对峰面积的RSD均小于2.56%（n＝6），表明仪器精密 0.40 1 6 10 13 品溶液
0.30
0.20 4 12 14
度良好。 0.10 7 11 23 24 对照指纹
0 图谱R
2.1.5 稳定性试验 0 7.00 14.00 21.00 28.00 35.00 42.00 49.00 56.00 63.00
t/min
取“2.1.2”项下供试品溶液（编号S1），分别于室温下
1：腺苷；4：红景天苷；6：莫诺苷；7：儿茶素；10：芍药苷；11：斯皮诺
放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.1.1”项下色谱条件进样测 素；12：阿魏酸；13：异槲皮苷；14：毛蕊花糖苷；23：丹皮酚；24：大黄素。
定。以红景天苷为参照峰，得到各共有峰相对保留时间 图2 混合对照品溶液和对照指纹图谱R的HPLC图
的RSD均小于0.40%（n＝6），相对峰面积的RSD均小于
2.2 补肾宁神膏中多指标成分的含量测定
2.92%（n＝6），表明样品溶液在室温下放置 24 h 内稳定
2.2.1 色谱条件
性良好。
色谱条件同“2.1.1”项。
2.1.6 重复性试验
2.2.2 混合对照品溶液的制备
取样品（编号S1）适量，按“2.1.2”项下方法制备供试
精密称定红景天苷、莫诺苷、儿茶素、芍药苷、斯皮
品溶液，共6份，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定。以红
诺素、阿魏酸、异槲皮苷、毛蕊花糖苷、丹皮酚、大黄素对
景天苷为参照峰，得到各共有峰相对保留时间的RSD均
照品适量，按“2.1.3”项下方法制备各单一对照品贮备
小于 0.18%（n＝6），相对峰面积的 RSD 均小于 2.62%
液。取上述各单一对照品贮备液适量，置于 5 mL 容量
（n＝6），表明方法重复性良好。
瓶中，加甲醇定容，得上述各成分质量浓度分别为
2.1.7 HPLC指纹图谱的生成
73.080、164.552、40.868、194.240、21.456、16.856、31.616、
取“2.1.2”项 下 供 试 品 溶 液（编 号 S1～S10），按
3.624、8.442、16.884 μg/mL的混合对照品溶液。
“2.1.1”项下色谱条件进样测定，采用《中药色谱指纹图
2.2.3 供试品溶液的制备
谱相似度评价系统（2012 版）》对 10 批样品的指纹图谱
制备方法同“2.1.2”项。
进行分析。以 S1 为参照图谱（相似度最高），设置时间
2.2.4 线性关系考察
窗宽度为 0.1 min，采用均值法，经多点校正后，得到
取“2.2.2”项下混合对照品溶液，用甲醇逐级稀释，
HPLC 叠加指纹图谱和对照指纹图谱 R。结果显示，10 得到各成分的系列标准溶液。取上述各成分的系列标
批样品共有24个共有峰。结果见图1。
准溶液及“2.2.2”项下混合对照品溶液，按“2.2.1”项下色
1 400 谱条件进样测定，以各成分质量浓度（x）为横坐标、峰面
1 300 14
1 200 1 10 12 13 15 17 18 22 23
6
1 100 2 3 4 5 7 8 9 11 16 19 20 21 24 积（y）为纵坐标进行线性回归。结果见表1。
1 000 R
900 S10 表1 红景天苷等10个成分的回归方程与线性范围
信号/mV 700 S8 待测成分 回归方程 r 线性范围/（μg/mL）
S9
800
S7
600
500 S6
400 S5 红景天苷 y＝10 601.2x－7 883.9 0.999 7 2.284～73.080
300 S4
200 S3 莫诺苷 y＝19 713.4x－27 796.4 0.999 3 5.142～164.552
100 S2
S1
0 儿茶素 y＝ 45 404.7x－17 100.4 0.999 6 1.277～40.868
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 芍药苷 y＝21 099.9x－77 165.4 0.999 5 6.070～194.240
时间/min
斯皮诺素 y＝26 323.7x－5 928.4 0.999 7 0.671～21.456
图1 10批样品的HPLC叠加指纹图谱和对照指纹图谱R 阿魏酸 y＝47 396.7x－8 925.4 0.999 5 0.527～16.856
异槲皮苷 y＝26 041.3x－7 845.3 0.999 6 0.988～31.616
2.1.8 相似度评价
毛蕊花糖苷 y＝32 905.4x－3 254.9 0.999 8 0.113～3.624
采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 丹皮酚 y＝65 933.6x－7 424.5 0.999 6 0.264～8.442
版）》对10批样品的指纹图谱进行相似度评价。结果显 大黄素 y＝37 533.2x+15 537.3 0.999 7 0.528～16.884
中国药房 2025年第36卷第14期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 14 · 1751 ·