Page 72 - 《中国药房》2025年14期
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spinosin， ferulic acid， isoquercitrin， verbascoside， paeonol， and emodin were 0.725， 1.962， 0.214， 3.395， 0.124， 0.107， 0.286，
          0.019，  0.034  and  0.067  mg/g，  respectively.  The  antioxidant  potency  composite  index （APC）  for  the  10  batches  ranged  from
          85.08%  to  96.35%.  Spectrum-effect  relationship  analysis  indicated  that  all  24  common  peaks  were  positively  correlated  with  the
          antioxidant capacity. Seventeen peaks had variable importance in projection values ＞1， specitically peaks 2， 5， 6， 7， 9， 10， 13-
          21，  23，  and  24.  CONCLUSIONS  This  study  successfully  established  the  HPLC  fingerprint  and  content  determination  method  for
          Bushen ningshen ointment. The compounds represented by the 17 common peaks such as morroniside may be the active components
          contributing to its antioxidant effects.
          KEYWORDS     Bushen ningshen ointment； fingerprint； spectrum-effect relationship； antioxidant activity； content determination


              补肾宁神膏根据深圳市中西医结合医院治未病科                           JS703C 型万分之一电子分析天平（美国 Mettler Toledo
          徐文华主任医师的临床经验方制备而成，该方由熟地                             公司），DA 型数控超声波清洗器（东莞市科桥超声波设
          黄、山茱萸、酒川芎、盐女贞子、炒酸枣仁、牡丹皮、首乌                          备有限公司）。
          藤、茯神、龙齿等16味药材组成，具有滋阴补肾、养心安                          1.2 药品与试剂
          神的功效，临床主要用于治疗肾血不足、虚火内扰所致                                对照品腺苷（批号 J08HB173656）、莫诺苷（批号
          的失眠、多梦等症，疗效显著。                                      M14IB209606）、红景天苷（批号PO1A9L67130）、儿茶素
              补肾宁神膏的现行质量标准仅为薄层鉴别、性状及                         （批号 O13IY228437）、阿魏酸（批号 G13S11L124423）、
          常规检查。由于复方制剂主要通过多组分、多靶点的特                            芍药苷（批号M22HB179898）、大黄素（批号YY90044）、
          性来协同实现整体疗效，因此现行质量标准难以全面反                            斯 皮 诺 素（批 号 A31IB224722）、异 槲 皮 苷（批 号
          映补肾宁神膏的整体质量。该方中酒川芎中的阿魏酸、                            Y24J11H119521）、毛蕊花糖苷（批号 Z28S11X125952）、
          儿茶素，牡丹皮中的芍药苷、丹皮酚、异槲皮苷，盐女贞                           丹皮酚（批号N22H8201956）及维生素E（批号S13016）、
          子中的毛蕊花糖苷、红景天苷，炒酸枣仁中的斯皮诺素，                           2，4，6-三吡啶基三嗪溶液（TPTZ）（批号S30632）均购自
          以及山茱萸与盐女贞子共有的腺苷等成分，均具有抗氧                            上海源叶生物科技有限公司，纯度均大于 98%；ABTS
          化、保护神经及调节心血管功能等活性                  [1―3] 。有研究发     （批号 C15283881）、DPPH（批号 C15568523）、过氧化物
          现，氧化应激是失眠的重要病理生理机制之一，长期失
                                                              酶（批号C15283881）、FeSO4 ·7H2O（批号MFCD00149719）、
          眠会导致大脑产生过量的活性氧自由基，而安神助眠的
                                                              磷酸盐缓冲液（PBS）（批号 P787575）、FeCl3溶液（批号
          作用机制常被认为与减轻氧化应激和炎症反应有                               MFCD00011005）均购自上海麦克林生化科技有限公
          关 [4―5] 。然而，现有的研究多聚焦于单一成分的体外抗
                                                              司；乙腈、甲醇均为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为
          氧化活性，缺乏对复方制剂整体抗氧化效应及其物质基                            超纯水。
                        [6]
          础的系统性分析 。这可能导致不同批次样品的质量波
                                                                  补肾宁神膏（批号 20240124、20230912、20240116、
          动，从而影响疗效的稳定性，甚至存在中药质量控制中
                                                              20240515、20240229、20231113、20240416、20231221、
         “成分与药效割裂”的关键问题。
                                                              20231227、20240923，编号 S1～S10；1 g 相当于饮片 6.6
              指纹图谱能在保证质量稳定性与一致性的同时，既
                                                              g）由深圳市中西医结合医院中药房自制。
          弥补单一成分的局限性，又能为药效物质的筛选提供数
                [6]
          据支持 。中药谱效学能够系统地分析中药中多成分、                            2 方法与结果
                                                  [7]
          多靶点的协同作用，符合中医药“整体观”理论 。灰色                           2.1 补肾宁神膏指纹图谱的建立
          关联度分析和偏最小二乘回归分析可识别中药化学成                             2.1.1 色谱条件
                                                                          ®
                                                    [8]
          分与药效的相关性，分析成分对药效的综合贡献 。基                                以xBridge  C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，
          于 此 ，本 研 究 建 立 了 补 肾 宁 神 膏 的 高 效 液 相 色 谱            以乙腈（A）-0.2% 磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱
         （HPLC）指纹图谱，并同法测定了补肾宁神膏中红景天                          （0～5  min，5%A→10%A；5～10  min，10%A→13%A；
          苷等 10 个成分的含量；采用 2，2′-联氨-（3-乙基苯并噻                    10～15 min，13%A→15%A；15～20 min，15%A；20～25
          唑啉-6-磺酸）二氨盐（ABTS）、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼                   min，15%A→20%A；25～40 min，20%A→28%A；40～45
         （DPPH）、铁离子还原能力（FRAP）法测定其体外抗氧化                        min，28%A→30%A；45～50 min，30%A→50%A；50～55
          活性；通过灰色关联度分析与偏最小二乘回归分析筛选                            min，50%A→65%A；55～60 min，65%A→95%A；60～70
          其抗氧化活性成分，旨在为其质量标准提升提供参考。                            min，95%A）；流速为 0.6 mL/min；柱温为 30 ℃；检测波
          1 材料                                                长为230 nm；进样量为10 μL。
          1.1 主要仪器                                            2.1.2 供试品溶液的制备
              本研究所用主要仪器有 e2695 型 HPLC 仪（美国                        取补肾宁神膏样品 0.5 g，置于干燥锥形瓶中，加入
          Waters 公司），BioTek Synergy HTX 型多功能酶标仪（美             甲醇20 mL，超声30 min，冷却，用甲醇补足失重，经0.22
          国 Agilent 公司），MS105 型十万分之一电子分析天平、                   μm滤膜滤过，取续滤液，即得。


          · 1750 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 14                            中国药房  2025年第36卷第14期
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