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别不大，均可能是关键信号通路。由此提示，银丹活血                           表1 毛蕊异黄酮葡萄糖苷等 13 个成分的线性关系考
          通瘀颗粒中药效成分可通过作用于多个靶点、干预多条                                察结果
          信号通路发挥治疗IS的作用。                                      成分            回归方程            R 2   线性范围/（μg/mL）
                                                              毛蕊异黄酮葡萄糖苷     y＝23.776x+60.042  0.999 2  6.40～64.00
                                                              迷迭香酸          y＝56.194x+94.505  0.999 0  10.64～106.40
                                                              芒柄花苷          y＝32.993x－6.508 5  0.999 5  4.28～42.80
                                                              紫草酸           y＝45.38x+143.96  0.999 3  16.20～162.00
                                                              丹酚酸B          y＝36.569x+11 041  0.999 6  165.00～1 650.00
                                                              芒柄花素          y＝5.811 7x－3.72  0.999 1  10.21～102.10
                                                                            y＝68.517x+0.420 7  0.999 5  16.80～168.00
                                                              人参皂苷Rb 1
                                                              人参皂苷Rd        y＝15.762x－6.253 7  0.999 8  14.80～148.00
                                                              银杏内酯C         y＝2.931 6x－99.788  0.999 1  96.92～484.60
                                                              银杏内酯A         y＝6.408 3x－238.24  0.999 2  92.31～461.55
                                                              银杏内酯B         y＝6.319 1x－263.32  0.999 5  62.77～313.85
                                                                            y＝12.862x－1 643.7  0.999 0  177.23～1 772.30
                                                              三七皂苷R 1
                                                              黄芪甲苷          y＝24.281x－1 760.2  0.999 4  83.08～415.40
                                                             2.5.3 重复性试验
                                                                 取同一批银丹活血通瘀颗粒（编号S10），共6份，按
                                                            “2.2.1”项下方法制备2种供试品溶液，按“2.1”项下色谱
                                                             条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算含量。
             紫色六边形：化合物；绿色菱形：潜在靶点；桃红色三角形：信号通
         路；图形越大，连接度越大。                                       结果显示，上述 13 个成分含量的 RSD 为 0.76%～2.51%
                    图4 “成分-靶点-通路”网络图                        （n＝6），表明该方法重复性良好。
                                                             2.5.4 稳定性试验
          2.5 银丹活血通瘀颗粒药效成分含量测定
                                                                 取“2.2.1”项下 2 种供试品溶液（编号 S10），分别在
              根据网络药理学分析筛选结果，17个指认成分均具                        室温下放置0、3、6、9、12、24 h时按“2.1”项下色谱条件进
          有较好的药理活性，可作为评价银丹活血通瘀颗粒质量
                                                             样测定，记录峰面积。结果显示，上述13个成分峰面积
          的潜在指标。由于咖啡酸、芦丁、人参皂苷Re和人参皂                          的 RSD 为 0.57%～2.02%（n＝6），表明供试品溶液在室
          苷Rg1分离度达不到要求，未纳入含量测定，本研究仅对                         温下放置24 h内稳定性良好。
          其余 13 个成分进行含量测定，其中毛蕊异黄酮葡萄糖                         2.5.5 加样回收率试验
          苷、迷迭香酸、芒柄花苷、紫草酸、丹酚酸B、芒柄花素、人                            取已知成分含量的银丹活血通瘀颗粒，共6份，精密
          参皂苷 Rb1、人参皂苷 Rd 采用 HPLC-UV 法，银杏内酯                  加入一定量的对照品溶液，按“2.2.1”项下方法制备 2 种
          C、银杏内酯A、银杏内酯B、三七皂苷R1、黄芪甲苷采用                        供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
          HPLC-ELSD法。                                        积并计算加样回收率。结果显示，上述13个成分的平均
          2.5.1 线性关系考察                                       加样回收率为97.95%～103.67%，RSD为0.28%～1.39%
              取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、迷迭香酸、芒柄花苷、紫草                       （n＝6）。
          酸、丹酚酸B、芒柄花素、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd对照                       2.5.6 样品含量测定
          品适量，精密称定，加甲醇制成上述各成分质量浓度分                               取15批银丹活血通瘀颗粒，按“2.2.1”项下方法制备
          别为 64.0、106.4、42.8、162.0、1 650.0、102.1、168.0、148.0   2 种供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录
          µg/mL 的混合对照品溶液 1’；取银杏内酯 C、银杏内酯                     峰面积并按标准曲线法计算含量。每批样品平行测定3
          A、银杏内酯B、三七皂苷R1、黄芪甲苷对照品适量，精密                        次。结果见表2。
          称定，加甲醇制成上述各成分质量浓度分别为 484.6、                        3 讨论
          461.55、313.85、1 772.3、415.4 µg/mL 的混合对照品溶液         3.1 色谱条件的选择及样品前处理方法考察
          2’。将上述两种混合对照品溶液用甲醇逐级稀释，得到                              本研究前期，在设置HPLC-UV参数时，分别对不同
          不同系列质量浓度的混合标准溶液，分别按“2.1”项下色                        提取方法（加热回流提取、超声提取）、提取溶剂（甲醇、
          谱条件进样测定，记录峰面积。以各对照品质量浓度为                           50% 甲醇、水）、流动相（乙腈-水、甲醇-水、乙腈-0.1% 磷
          横坐标（x）、峰面积为纵坐标（y）进行线性回归。结果                         酸溶液）、柱温（25、30、35 ℃）及检测波长（203、210、245、
          见表1。                                               280 nm）进行了考察，最终确立了本研究所用的 HPLC-
          2.5.2 精密度试验                                        UV条件。因黄芪甲苷、三七皂苷R1、银杏内酯类等成分
              取“2.2.1”项下 2 种供试品溶液（编号 S10），按“2.1”             的 UV 吸收较弱，不适合在 UV 下测定，故采用 ELSD 检
          项下色谱条件进样测定6次，记录峰面积。结果显示，上                          测器进行检测。在设置 HPLC-ELSD 参数时，分别对样
          述 13 个成分峰面积的 RSD 为 0.56%～2.36%（n＝6），表              品处理方法（水饱和正丁醇提取、氨试液的醇溶剂回流
          明方法精密度良好。                                          提取）、流动相（甲醇-水、乙腈-水）、漂移管温度（50、70、


          中国药房  2025年第36卷第14期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 14    · 1747 ·
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