Page 77 - 《中国药房》2025年11期
P. 77

表3 引物序列及扩增产物长度                           3.2 马齿苋对ACD小鼠皮肤病理学形态的影响
          基因        引物序列（5′→3′）                扩增产物长度/bp         与空白组相比，模型组小鼠表皮结构缺失，皮肤组
          β-actin   正向引物：CACGATGGAGGGGCCGGACTCATC  240       织角化过度，真皮层出现海绵状变性，皮下脂肪层内可
                    反向引物：TAAAGACCTCTATGCCAACACAGT
          MrgprA3   正向引物：GCTGTGCCAACCCCATTATT     154        见大量炎症细胞浸润。与模型组相比，糠酸莫米松乳膏
                    反向引物：CACGGCTCTGCTTTGTTTCT                组和马齿苋低、高浓度乳膏组小鼠表皮增厚及真皮层海
          MrgprC11  正向引物：GCAGGAAAGCCATCTCAGTC     156        绵样变性缓解，炎症细胞浸润减轻，且马齿苋高浓度乳
                    反向引物：TGATTGCTGCATTGCCTAAG
          MrgprD    正向引物：GCAGAGGTCTCCCTTCTGTG     237        膏组效果最佳；空白基质乳膏组小鼠皮肤损伤情况无明
                    反向引物：TACCAGATGGGGAAAAGCAC                显缓解。结果见图2。
          硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，经转膜处理后，以脱脂
          奶粉封闭1.5 h；加入Occludin、Claudin-1一抗（稀释度分
          别为 1∶1 000、1∶5 000），4 ℃孵育过夜；以 TBST 充分洗
          涤，以辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG二抗（稀释度
                                                                  A.空白组           B.模型组        C.糠酸莫米松乳膏组
          为1∶1 000）孵育1 h，洗去二抗；滴加ECL发光显影液显
          色曝光，采用免疫蛋白质印迹系统成像，采用Image J软
          件分析蛋白条带灰度值，以目的蛋白与内参蛋白的灰度
          值比值，表示目的蛋白的表达水平。
                                                               D.空白基质乳膏组      E.马齿苋低浓度乳膏组     F.马齿苋高浓度乳膏组
          2.9 统计学方法
                                                                红色箭头：皮肤各层结构紊乱、缺失；蓝色箭头：皮肤组织肥厚角
              采用SPSS 26.0软件进行统计分析，计量资料以x±                    化，表皮突向下延伸呈杵状；黑色箭头：炎症细胞浸润。
          s表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比                           图2 各组小鼠皮肤病理学形态的观察结果（HE染色）
          较采用 LSD-t 检验（方差齐性时）或 Dunnett T3 检验（方               3.3 马齿苋对 ACD 小鼠血清中 IgE、TNF-α 水平的
          差不齐时）。检验水准α＝0.05。                                  影响
          3 结果                                                   与空白组相比，模型组小鼠血清中IgE、TNF-α水平
          3.1 马齿苋对ACD小鼠背部皮肤损伤的影响                             显著升高（P＜0.05）。与模型组相比，糠酸莫米松乳膏
              空白组大鼠无抓挠行为，皮肤无损伤。与空白组                          组和马齿苋低、高浓度乳膏组小鼠血清中IgE、TNF-α水
          [皮肤损伤评分为（0.10±0.32）分]相比，模型组小鼠抓挠                    平均显著降低（P＜0.05），空白基质乳膏组小鼠血清中
          行为增多，皮肤出现红斑、肿胀、结痂等情况，组织损伤                          IgE、TNF-α 水平差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白
          严重，皮肤损伤评分[（8.40±1.07）分]显著升高（P＜                     基质乳膏组相比，马齿苋低、高浓度乳膏组小鼠血清中
          0.01），提示造模成功。与模型组相比，糠酸莫米松乳膏                        IgE，马齿苋高浓度乳膏组小鼠血清中 TNF-α 水平均显
          组和马齿苋低、高浓度乳膏组小鼠抓挠行为减少，皮肤                           著降低（P＜0.05）。与糠酸莫米松乳膏组相比，马齿苋
          损伤明显减轻，皮肤损伤评分[分别为（5.40±1.07）、                      低、高浓度乳膏组小鼠血清中IgE、TNF-α水平差异均无
                                                             统计学意义（P＞0.05）。结果见表4。
         （5.50±1.58）、（4.70±1.42）分]均显著降低（P＜0.01）；空
                                                             表4 各组小鼠血清中 IgE、TNF-α 水平比较（x±s，n＝
          白基质乳膏组小鼠皮肤仍存在损伤，皮肤损伤评分
                                                                  6，pg/mL）
          [ （7.60±1.17）分]差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白
                                                              组别                       IgE          TNF-α
          基质乳膏组相比，马齿苋低、高浓度乳膏组小鼠皮肤损                            空白组                     6.85±1.35   273.34±85.25
          伤评分均显著降低（P＜0.05）。与糠酸莫米松乳膏组相                         模型组                    10.99±0.82 a  470.11±54.18 a
                                                              糠酸莫米松乳膏组                8.83±0.70 b  306.94±65.96 b
          比，马齿苋低、高浓度乳膏组小鼠皮肤损伤评分差异均
                                                              空白基质乳膏组                10.90±0.67   434.24±93.38
          无统计学意义（P＞0.05）。结果见图1。                               马齿苋低浓度乳膏组               9.26±0.82 bc  367.26±73.20 b
                                                              马齿苋高浓度乳膏组               8.55±1.16 bc  285.13±60.27 bc
                                                                a：与空白组相比，P＜0.05；b：与模型组相比，P＜0.05；c：与空白基
                                                             质乳膏组相比，P＜0.05。
                                                             3.4 马齿苋对ACD小鼠DRG中MrgprA3、MrgprC11、
                                                             MrgprD mRNA表达的影响
            A        B       C       D       E       F
                                                                 与 空 白 组 相 比 ，模 型 组 小 鼠 DRG 中 MrgprA3、
             A：空白组；B：模型组；C：糠酸莫米松乳膏组；D：空白基质乳膏
         组；E：马齿苋低浓度乳膏组；F：马齿苋高浓度乳膏组。                          MrgprC11、MrgprD mRNA 表达水平均显著升高（P＜
                图1 各组小鼠皮肤损伤情况的观察结果                           0.05）。与模型组相比，糠酸莫米松乳膏组和马齿苋低、


          中国药房  2025年第36卷第11期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 11    · 1355 ·
   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82