Page 72 - 《中国药房》2025年11期

2.4.2 标准曲线与定量下限考察 4 ℃条件下放置6 h，考察不同条件下样品的稳定性。结
取“2.2”项下系列环泊酚工作液 5 μL，均加入空白 果显示，在上述条件下，环泊酚实测质量浓度的 RSD 均
血浆 95 μL 配制成环泊酚质量浓度分别为 20、50、100、 在10%以内，样品稳定性良好。
200、500、1 000、2 000、3 000 ng/mL 的血浆样品，按照 2.5 孕鼠与胎鼠体内环泊酚的药动学研究
“2.3”项下方法处理后进样分析。以环泊酚质量浓度为 2.5.1 给药与样品收集
横坐标（x）、环泊酚和丙泊酚峰面积比值为纵坐标（y）， 取孕鼠8只，实验前禁食8 h、禁水2 h。尾静脉单次
采用加权最小二乘法进行回归分析，得环泊酚的回归方 给予 2.4 mg/kg 环泊酚（剂量参考文献[6]设置），随即静
2
程为 y＝0.001 98x+0.031 30（R ＝0.999 7），线性范围为 脉输注 90 μg/（kg·min）依托咪酯（剂量参考文献[7]设
20～3 000 ng/mL，定量下限为20 ng/mL。 置）维持麻醉状态。给药期间孕鼠自主呼吸，体温正常。
2.4.3 精密度与准确度试验 将孕鼠仰卧位固定，腹部正中线切口，暴露两侧子宫角，
取系列环泊酚质控工作液 5 μL，以空白血浆 95 μL 从一侧子宫角开始，剪开子宫壁，分别于环泊酚给药后
配制定量下限和低、中、高质量浓度（20、50、500、2 400 2、4、8、12、16、25、35、45、60、90 min 取出 1 只胎鼠（每只
ng/mL）的质控样品，每个浓度 5 份，于同一天内按“2.3” 孕鼠共有 10～12 只胎鼠），术中用生理盐水浸润纱布覆
项下方法处理后进样分析，计算日内精密度；连续3 d处 盖于切口，保持腹部湿润。胎鼠取出后，迅速转移至操
理样品并测定，计算日间精密度。以实测质量浓度与理 作台，剥除表面胎膜，剪断脐带，用滤纸擦干表面羊水及
论质量浓度的相对误差（RE）考察准确度。结果（表 1） 血水后剪开颈部血管，采集全血。按上述相同的时间点
显示，环泊酚日内和日间精密度试验的 RSD 均小于 在采集胎鼠血样的同时采集孕鼠眼内眦静脉全血，置于
10%，且RE均不超过±3.60%，符合相关要求。 含肝素的采血管中，离心后取上清液，然后按“2.3”项下
表1 大鼠血浆中环泊酚的精密度与准确度试验结果 方法处理后进样分析。
日内（n＝5） 日间（n＝3） 2.5.2 数据处理及分析
理论质量浓度/
实测质量浓度 实测质量浓度 采用 GraphPad Prism 9.5 软件绘制孕鼠与胎鼠体内
（ng/mL） RSD/% RE/% RSD/% RE/%
（x±s）/（ng/mL） （x±s）/（ng/mL）
20 19.58±1.91 9.76 －2.10 19.82±1.51 7.62 －0.09 环泊酚的血药浓度-时间曲线，然后计算不同时间点胎
50 50.83±1.63 3.21 1.66 50.07±3.98 7.96 0.14 鼠血药浓度（记为 F）与孕鼠血药浓度（记为 M）的比值，
500 500.03±9.90 1.98 0.01 509.31±22.94 4.50 1.86 并绘制F/M时间曲线，结果见图2；采用DAS 2.0软件计
2 400 2 313.71±93.64 4.05 －3.60 2 427.37±141.98 5.85 1.14
算非房室模型药动学参数，结果见表3。采用SPSS 21.0
2.4.4 提取回收率与基质效应考察
软件对药动学参数进行统计学分析，采用独立样本 t 检
按“2.4.3”项下方法制备低、中、高（50、500、2 400
验进行组间比较[峰浓度（cmax ）和药-时曲线下面积
ng/mL）质量浓度的质控样品，每个样本 5 份，按“2.3”项
（AUC）经对数转换后按上述方式进行比较]。检验水准
下方法处理后测得峰面积 A；空白血浆沉淀蛋白后取上
α＝0.05。
清液，分别加入不同质量浓度的质控工作液及内标工作
由图2可知，孕鼠体内环泊酚的血药浓度迅速下降；
液，然后进样分析测得峰面积 B；将生物基质替换为甲
胎鼠体内环泊酚血药浓度在10 min左右达峰，整体呈先
醇，配制低、中、高质量浓度的样品溶液进样测得峰面积
上升后下降的趋势；环泊酚在胎鼠体内的血药浓度始终
C。按公式[提取回收率（%）＝A/B×100%，基质效应
低于孕鼠；环泊酚的F/M时间曲线呈先上升后下降的趋
（%）＝B/C×100%]计算提取回收率和基质效应。结果
势，F/M值在0.16～0.84之间，且在45 min时达到最大值
（表2）显示，环泊酚提取回收率和基质效应的RSD均在
（0.84）。由表 3 可知，与孕鼠相比，胎鼠体内环泊酚的
10%以内。
cmax、AUC0-90 min、AUC0-∞均显著降低，平均滞留时间（MRT）
表2 大鼠血浆中环泊酚的提取回收率和基质效应考察
显著升高（P＜0.05）。
结果（n＝5）
3 000 2.0
提取回收率/% 基质效应/% 孕鼠
理论质量浓度/（ng/mL） 胎鼠 1.5
x±s RSD x±s RSD （ ng/mL ） 2 000
50 78.00±2.88 3.69 98.56±8.01 8.13 F/M值 1.0
500 79.48±0.61 0.77 96.24±4.07 4.23 血药浓度/ 1 000 0.5
2 400 77.76±1.32 1.70 105.06±5.51 5.24
0 0
2.4.5 稳定性试验 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100
t/min t/min
按“2.4.3”项下方法制备低、中、高（50、500、2 400 A.孕鼠与胎鼠的血药浓度-时间曲线 B. F/M时间曲线
ng/mL）质量浓度的质控样品，每个浓度 5 份，分别在 图2 孕鼠与胎鼠的血药浓度-时间曲线和 F/M 时间曲
－40 ℃冰箱冷冻 7 d、反复冻融（－40 ℃～室温）3 次、 线（n＝8）

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