Page 29 - 《中国药房》2025年10期
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          dia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析 ,对            3 结果
          富集通路的-lgP 进行比较,以筛选变化显著的共同代                         3.1 SGHWT对抑郁大鼠体重及行为学的影响
          谢通路。                                                   与空白组相比,模型组大鼠的体重、糖水偏好率、总
          2.6.4 机制验证实验                                       移动距离、穿越中心次数均显著降低或缩短,不动时间
              根据“2.6.3”项下结果和PFC-NAc-VTA神经环路具                 显著延长(P<0.05);与模型组相比,各药物组大鼠的体
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          体作用过程 ,采用Western blot法对代谢通路的相关蛋                    重、糖水偏好率(SGHWT-H 组除外)、穿越中心次数、总
          白表达进行检测。取“2.4”项下空白组、模型组、SGHWT                      移动距离均显著升高或延长(P<0.05),不动时间均显
          组另3只大鼠和氟西汀组3只大鼠的NAc区组织[(30±                        著缩短(P<0.05)。结果见表 1。这提示抑郁大鼠造模
          5)mg],加入含 1% 蛋白酶抑制剂和 1% 磷酸酶抑制剂的                    成功,SGHWT可改善其抑郁状况。
          蛋白裂解液 250 μL,提取组织总蛋白,然后于 4 ℃下匀                     表1 SGHWT 对抑郁大鼠体重及行为学的影响(x±s,
          浆 3 min 后裂解 30 min,再于 4 ℃下以 12 000 r/min 离心             n=12)
          15 min,取上清液,以BCA法定量后,进行变性处理。取                       组别       体重/g  糖水偏好率/%  总移动距离/cm  穿越中心次数  不动时间/s
                                                              空白组    412.33±30.89  88.15±5.10  1 311.30±432.15  46.67±20.02  153.78±32.72
          变性蛋白适量,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶
                                                              模型组    326.99±17.08 a  65.41±13.64 a  461.37±197.20 a  5.17±2.85 a  212.23±33.23 a
          电泳分离,再转膜、封闭;洗膜后,加入相应蛋白一抗(稀                          SGHWT-L组  343.71±12.28 b  84.06±7.71 b  1 294.15±471.91 b  46.50±20.62 b  163.34±40.66 b
          释比例均为1∶1 000),于4 ℃下孵育过夜;洗膜后,加入                      SGHWT-M组 356.07±15.98 b  85.40±7.91 b  1 430.37±389.40 b  71.67±36.70 b  145.52±20.31 b
                                                              SGHWT-H组 338.56±17.20 b  64.72±21.89  1 033.87±426.16 b  34.42±23.34 b  160.60±31.07 b
          相应二抗(稀释比例为 1∶1 000),于室温下孵育 1 h;洗                    氟西汀组   356.63±19.65 b  80.58±10.10 b  872.59±433.63 b  26.08±23.02 b  176.05±29.57 b
          膜后,以 ECL 法显影后成像。以 β-actin 为内参,使用                      a:与空白组相比,P<0.05;b:与模型组相比,P<0.05。
          Image J 软件分析条带灰度值,以目的蛋白与内参蛋白                       3.2 SGHWT 对抑郁大鼠 PFC-NAc-VTA 神经环路组
         (β-actin)的灰度值比值表示目的蛋白的相对表达量,以                       织形态学的影响
          磷酸化蛋白与原型蛋白的灰度值比值表示该蛋白的磷                                空白组大鼠 3 个脑区的神经元细胞排列均较为整
          酸化水平。                                              齐,结构完整,形态充盈。与空白组相比,模型组大鼠 3
          2.7 统计学方法                                          个脑区的神经元细胞部分溶解,结构受损严重,细胞形
              采用Graph-Pad Prism 8.0软件作图,采用SPSS 27.0          态萎缩,细胞核偏移或溶解消失。与模型组相比,
          软件对数据进行统计分析。实验数据以x±s表示,多组                          SGHWT组及氟西汀组大鼠3个脑区的神经元细胞均不
          间比较采用单因素方差分析,进一步两组间比较采用                            同程度地恢复,结构相对完整,萎缩状况有所改善,形态
          LSD-t检验。检验水准α=0.05。                                恢复至充盈状态。结果见图1。





             PFC区








             NAc区









             VTA区





                       A.空白组                  B.模型组                 C. SGHWT组              D. Fluoxetine组
             黑色箭头:溶解且结构受损的细胞;黄色箭头:萎缩的细胞;白色箭头:细胞核偏移或溶解消失的细胞。
                     图1 SGHWT对抑郁大鼠PFC-NAc-VTA神经环路组织形态学影响的显微图(HE染色)


          中国药房  2025年第36卷第10期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 10    · 1175 ·
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