Page 65 - 《中国药房》2025年9期
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limonin，  the  degree  of  renal  tissue  lesions  in  rats  was  alleviated，  and  the  above-mentioned  indicators  were  significantly  improved
         （P＜0.05），  showing  an  obvious  dose-effect  relationship （P＜0.05）.  Compared  with  high-dose  limonin  group，  in  the  combination
          group， the degree of renal tissue lesions in rats was relatively aggravated， and the changes in the above-mentioned indicators were
          significantly  reversed  （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  Limonin  has  a  certain  improvement  effect  on  renal  lesions，  glucose
          metabolism，  inflammation，  and  oxidative  stress  in  pregnant  rats  with  gestational  diabetes.  Its  mechanism  may  be  related  to  the
          inhibition of the JNK/NF-κB signaling pathway.
          KEYWORDS    limonin；  gestational  diabetes；  glucose  metabolism；  inflammation；  oxidative  stress；  renal  lesions；  JNK/NF- κB
          signaling pathway


              妊娠期糖尿病是妊娠期常见合并症，其发生主要与                        （ELISA）试剂盒（上海烜雅生物科技有限公司，批号分
                                 [1]
          肥胖、超重及既往病史有关 。妊娠期糖尿病的发生不                           别 为 XYR2592A、XYR1619A、XYR1876A、XY-SJH-
          仅会增加不良妊娠结局的风险，还会增加产妇晚年患心                           3864、XYR2920A、XY-SJH-3495、XYR2637A），血尿素
          血管疾病及糖尿病的风险           [2―3] 。相关报道显示，炎症、氧           氮（blood  urea  nitrogen，BUN）、肌 酐（creatinine，Cr）
          化应激等因素在妊娠期糖尿病的病理生理过程中发挥                            ELISA 试剂盒（温州科淼生物科技有限公司，批号分别
          着重要作用 。因此，组织器官中炎症及氧化应激指标                           为KMERa011734、KMEOt011545），JNK、磷酸化JNK（p-
                    [4]
          的改变，可以作为反映妊娠期糖尿病进展的关键标志。                           JNK）、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）、甘
          c-Jun 氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）和核因        油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）一抗和 IgG 二抗（英国
          子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）是细胞内重要的信号传             Abcam 公 司 ，批 号 分 别 为 ab88076、ab1640、ab32536、
                               [5]
          导途径，是炎症相关通路 ，广泛参与炎症反应、氧化应                          ab239882、ab9485、ab205718）。
          激等生理病理过程的调控。有研究表明，JNK/NF-κB信                       1.3 动物
                                    [6]
          号通路与肝脏胰岛素抵抗相关 。                                        本研究所用动物为健康 SPF 级 SD 大鼠，共 108 只，
              柠檬苦素是一种具有抗炎、抗氧化、清除自由基等
                                                             8～9周龄，其中雌性72只（体重195～250 g）、雄性36只
          多重功效的三萜类化合物，广泛分布于柑橘类果实                            （体重290～380 g），购自江苏华创信诺医药科技有限公
          中 [7―8] 。已有研究发现，柠檬苦素可通过激活蛋白激酶B
                                                             司[实验动物生产许可证号：SCXK（苏）2020-0009；实验
         （protein  kinase  B）/核 转 录 因 子 红 系 2 相 关 因 子 2
                                                             动物合格证号：B202408050338]。所有大鼠均饲养于相
         （nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）信号通  对湿度（45±5）%、温度（24±2） ℃、昼夜等长的环境中，
                                                  [9]
          路，抑制高糖诱导的髓核细胞凋亡及氧化应激 。但柠
                                                             饲养期间自由饮水、摄食。本研究已获得牡丹江医科大
          檬苦素是否可以通过调控JNK/NF-κB信号通路，影响妊
                                                             学附属红旗医院伦理委员会批准（编号：20240076）。
          娠期糖尿病患者的糖代谢、炎症、氧化应激，尚不明确。                          2 方法
          因此，本研究通过建立妊娠期糖尿病大鼠模型，考察柠
                                                             2.1 造模、分组与给药
          檬苦素对模型大鼠肾脏病变及糖代谢、炎症、氧化应激
                                                                 参考文献[10]建立妊娠期糖尿病大鼠模型：所有大
          的影响，并探讨其作用机制是否与调控JNK/NF-κB信号
                                                             鼠先适应性饲养1周，之后雄性大鼠饲喂普通饲料，雌性
          通路有关，为治疗妊娠期糖尿病的新药研发提供参考。
                                                             大鼠饲喂高糖高脂饲料。饲喂 8 周后，将雌雄大鼠按
          1 材料
                                                             2∶1 的比例进行合笼交配，次日利用显微镜对雌性大鼠
          1.1 主要仪器
                                                             阴道涂片进行检查以确认是否受孕，以检出阴道栓为受
              本研究所用主要仪器有：SpectraMax iD3 型酶标
          仪（美国 Molecular Devices 公司）、Ti2-E 型光学显微镜            孕成功标志，记为妊娠第1天。妊娠大鼠禁食12 h后，以
                                   TM
         （日本 Nikon 公司）、SmartGel 型凝胶成像系统（美国                   45 mg/kg的剂量腹腔注射链脲佐菌素，72 h后测定空腹
          ScienceCell公司）。                                    血 糖（fasting  blood  glucose，FBG）值 ，若 FBG≥16.6
                                                                                [10]
          1.2 主要药品与试剂                                        mmol/L视为造模成功 。
              本研究所用主要药品与试剂有：柠檬苦素对照品                              将造模成功的 60 只大鼠按照随机数字表法分为模
         （上海抚生实业有限公司，批号 A130911，纯度≥98%），                     型组，柠檬苦素低、中、高剂量组和联合组，每组12只；另
          JNK激活剂Anisomycin对照品（上海联迈生物工程有限                     取同期饲喂普通饲料的按上述方法进行交配的 12 只妊
          公司，批号 LM0132-10mM，纯度≥99%），空腹胰岛素                    娠大鼠作为对照组。柠檬苦素低、中、高剂量组大鼠分
                                                                                              [11]
         （fasting insulin，FINS）、白细胞介素 1β（interleukin-1β，     别灌胃12.5、25.0、50.0 mg/kg柠檬苦素 ，并尾静脉注射
          IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis factor-α，      等体积生理盐水；联合组大鼠在灌胃50.0 mg/kg柠檬苦
          TNF-α）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、          素的同时尾静脉注射 2 mg/kg JNK 激活剂 Anisomy‐
                                                                [12]
          丙二醛（malondialdehyde，MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶                 cin ；对照组、模型组大鼠灌胃并尾静脉注射等体积生
         （glutathione  peroxidase，GSH-Px）酶 联 免 疫 吸 附 试 验     理盐水；每天1次，连续14 d。


          中国药房  2025年第36卷第9期                                                China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 9    · 1083 ·
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