Page 55 - 《中国药房》2025年9期

2.3 色谱条件 表1 线性关系考察结果
采 用 Waters Symmetry C18 色 谱 柱（250 mm×4.6 成分 回归方程 r 线性范围/（µg/mL）
辛弗林 Y＝0.020 0X－0.131 4 0.999 8 1.657 5～33.150 0
mm，5 μm），以乙腈（A）-0.1% 甲酸溶液（B）为流动相进
N-甲基酪胺 Y＝0.025 6X－0.037 7 0.999 9 1.285 8～25.716 0
行 梯 度 洗 脱（0～40 min，6%A→50%A；40～50 min， 5，7-二羟基色酮-7-新橙皮糖苷 Y＝0.067 9X－0.093 3 0.999 9 0.510 0～10.200 0
新北美圣草苷 Y＝0.142 3X+0.121 2 1.000 0 2.717 2～54.344 0
50%A→80%A；50～60 min，80%A）；流速为 1.0 mL/min； 柚皮芸香苷 Y＝0.140 7X－0.353 6 0.999 9 5.587 5～111.750 0
柱温为40 ℃；进样量为5 μL；检测波长为284 nm。 柚皮苷 Y＝0.073 9X－0.007 1 1.000 0 14.586 0～291.720 0
橙皮苷 Y＝0.170 9X－0.742 4 1.000 0 4.326 8～86.536 0
2.4 方法学考察 新橙皮苷 Y＝0.219 5X－4.060 0 1.000 0 9.908 0～198.160 0

2.4.1 专属性试验 柚皮素 Y＝0.328 8X－0.682 1 0.999 9 0.925 1～18.502 0
橙皮素 Y＝0.302 8X－0.105 0 0.999 9 0.225 4～4.508 0
取“2.1”“2.2”项下混合对照品溶液和供试品溶液 甜橙黄酮 Y＝0.124 4X－0.010 2 0.999 9 0.627 2～12.544 0
（样品编号 S16）适量，按“2.3”项下色谱条件进样分析， 川陈皮素 Y＝0.127 0X+0.069 4 1.000 0 2.000 0～40.000 0
橘皮素 Y＝0.214 2X－0.537 1 0.999 9 1.306 1～26.122 0
记录色谱图（图 1）。结果显示，待测各成分与其相邻峰 5-去甲川陈皮素 Y＝0.234 8X－0.109 2 1.000 0 0.213 4～4.269 0
间的分离度均大于 1.5，理论板数以新橙皮苷计不低于 橙皮油素 Y＝0.097 8X + 0.026 9 1.000 0 0.944 7～18.894 0
8 000，且空白溶液（甲醇）在相应位置无干扰，表明该方 测成分峰面积的RSD均小于1.52%（n＝6），表明仪器的
法的专属性较好。 精密度良好。

3 000 2.4.4 稳定性试验

2 000 取供试品溶液（样品编号 S16）适量，在室温下放置
mAU 500
0、2、4、8、12、18、24 h 时，按“2.3”项下色谱条件进样分
析，记录色谱图。结果显示，15 个待测成分峰面积的
－10
0 10 20 30 40 50 60
t/min RSD 均小于 1.98%（n＝7），表明供试品溶液在室温下放
A.供试品溶液 置24 h内稳定性良好。
200
2.4.5 重复性试验
mAU 100 取枳实样品（编号 S16）6 份，按“2.2”项下方法制备
供试品溶液，再按“2.3”项下色谱条件进样分析，记录色

－3 谱图，并采用外标法计算样品中15个待测成分的含量。
0 10 20 30 40 50 60
t/min 结果显示，15个待测成分含量的RSD均小于1.79%（n＝
B.混合对照品溶液
6），表明该方法重复性良好。
1：辛弗林；2：N-甲基酪胺；3：5，7-二羟基色酮-7-新橙皮糖苷；4：新
北美圣草苷；5：柚皮芸香苷；6：柚皮苷；7：橙皮苷；8：新橙皮苷；9：柚皮 2.4.6 加样回收率试验
素；10：橙皮素；11：甜橙黄酮；12：川陈皮素；13：橘皮素；14：5-去甲川 取枳实样品（编号 S16）约 0.5 g，共 6 份，精密称定，
陈皮素；15：橙皮油素。
每份以 1∶1（m/m）的比例加入相应待测成分的对照品；
图1 专属性试验结果
按“2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.3”项下色谱
2.4.2 线性关系考察 条件进样分析，记录色谱图，并计算各成分的加样回收
精密量取“2.1”项下混合对照品母液 1、1、5、5 mL， 率和RSD值。结果显示，辛弗林、N-甲基酪胺、5，7-二羟

分别置于 20、10、20、10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻 基色酮-7-新橙皮糖苷、新北美圣草苷、柚皮芸香苷、柚皮
度，即得4个质量浓度点的系列混合对照品溶液。吸取 苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素、橙皮素、甜橙黄酮、川陈
上述系列混合对照品溶液和混合对照品母液适量，按 皮素、橘皮素、5-去甲川陈皮素、橙皮油素的平均加样回
“2.3”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。以待测成分 收率分别为94.5%、91.1%、92.8%、95.3%、96.1%、98.2%、
质量浓度为横坐标（X，µg/mL）、峰面积为纵坐标（Y）绘 95.5%、101.6%、102.2%、96.7%、93.9%、103.9%、99.9%、
制标准曲线，结果见表1。 98.6%、97.1%，RSD分别为1.98%、2.07%、2.12%、1.77%、

2.4.3 精密度试验 1.32%、1.19%、2.03%、1.39%、3.03%、2.48%、2.00%、
取供试品溶液（样品编号S16）适量，按“2.3”项下色 1.85%、1.93%、2.22%、1.23%（n＝6），表明该方法的准确
谱条件连续进样 6 次，记录色谱图。结果显示，15 个待 度较好。

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