Page 55 - 《中国药房》2025年6期

2.7 大 鼠 结 肠 组 织 中 GPR41、GPR43、GPR109A 表4 各组大鼠血清 TNF-α、IL-6、TGF-β11、IL-10 水平
mRNA表达检测 比较（x±s，n＝9，pg/mL）
采用实时PCR（real-time PCR，RT-PCR）法检测。取 组别 TNF-α IL-6 TGF-β 1 IL-10
正常组 58.44±10.81 62.33±10.30 82.44±6.15 176.44±14.71
“2.2”项下冻存的各组大鼠的结肠组织适量，以TsingZol 模型组 96.44±10.17 a 109.22±14.42 a 47.89±7.67 a 123.00±8.29 a
总RNA广谱型提取试剂提取其中的总RNA，检测纯度、 阳性对照组 70.67±7.30 b 69.44±11.04 b 61.11±6.27 b 143.11±11.96 b
复方芩柏颗粒组 77.22±10.41 b 79.67±11.63 b 57.00±7.65 b 139.11±8.88 b
浓度后，将其逆转录成cDNA，再以此cDNA为模板进行
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01。
扩增。PCR 反应体系（共 10 μL）包括 cDNA 模板 1 μL、
3.3 复方芩柏颗粒对大鼠结肠组织病理形态的影响
10 μmol/L正/反向引物（具体序列及产物长度见表3）各
正常组大鼠结肠组织结构完整，腺体排列规整，隐
®
0.4 μL、2×TSINGKE Master qPCR 混 合 液（SYBR
窝正常，黏膜无损伤，无明显中性粒细胞等炎症细胞浸
Green Ⅰ）5 μL、50×ROX 参考染料Ⅱ 0.2 μL、ddH2O 3 润和细胞损伤，其病理学评分为0分；模型组大鼠结肠组
μL。反应条件为95 ℃预变性30 s；95 ℃变性10 s，60 ℃ 织结构受损严重，黏膜层变薄，腺体缺失或排列不整齐，
退火延伸 30 s，共循环 40 次。以 β-actin 为内参，采用 隐窝畸形，杯状细胞明显减少，组织间隙水肿，可见炎症
2 －ΔΔCt 法计算GPR41、GPR43、GPR109A mRNA的相对表 细胞弥散分布，溃疡侵及肌层，出现细胞水肿及坏死，其
达量。 病理学评分[（3.67±0.50）分]较正常组显著升高（P＜
表3 PCR引物序列及产物长度 0.01）；阳性对照组和复方芩柏颗粒组大鼠结肠组织整体
结构基本完整，腺体排列基本整齐，肠黏膜轻度水肿，可
基因 序列（5′→3′） 扩增产物/bp
β-actin 正向：CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC 102 见较多正常杯状细胞及肠隐窝，炎症细胞明显减少，细
反向：CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT 胞损伤均好转，其病理学评分[（1.44±0.53）、（1.56±
GPR41 正向：ATAGTCAACCTGGCAGCCTT 188 0.53）分]较模型组显著降低（P＜0.01）。结果见图1。
反向：TTGACATCTGACTGCTCCGT
GPR43 正向：TCATGTCCTTTGGCCATTGC 186
反向：AGATGGTGACTGTCATGGGG
GPR109A 正向：GCATCATCCTGTTCTGCTCTG 201
反向：AGATGTCACAGTTCCTCACGT
2.8 统计学方法
采用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析。结果以 200 μm 200 μm
A.正常组 B.模型组
x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两
两比较采用 LSD-t 检验（方差齐时）或 Dunnett’s T3 法
（方差不齐时）。检验水准α＝0.05。
3 结果
3.1 复方芩柏颗粒对大鼠DAI评分的影响 200 μm 200 μm
实验期间，无大鼠死亡。正常组大鼠精神状态良 C.阳性对照组 D.复方岑柏颗粒组
红色箭头：炎症细胞浸润；蓝色箭头：组织水肿；橙色箭头：腺体
好，饮食活动正常，隐血实验为阴性；模型组大鼠精神萎
缺失。
靡，嗜睡，进食/水量下降，粪便可见鲜红血液；阳性对照 图1 各组大鼠结肠组织病理形态观察显微图（HE染色）
组和复方芩柏颗粒组大鼠精神状况、进食/水量、粪便带
3.4 复方芩柏颗粒对大鼠粪便中SCFA含量的影响
血情况明显好于模型组。与正常组[（0.07±0.05）分]比 与正常组比较，模型组大鼠粪便中乙酸、丙酸、丁酸
较，模型组大鼠的 DAI 评分[（3.14±0.29）分]显著升高 含量均显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，各药物组
（P＜0.01）；与模型组比较，阳性对照组、复方芩柏颗粒 大鼠粪便中乙酸、丙酸、丁酸含量均显著升高（P＜0.05
组大鼠的 DAI 评分[（1.44±0.33）、（1.70±0.35）分]均显 或P＜0.01）。结果见表5。
著降低（P＜0.01）。 表5 各组大鼠粪便中 SCFA 含量比较（x±s，n＝9，
3.2 复方芩柏颗粒对大鼠血清炎症因子水平的影响 μg/mL）
组别 乙酸 丙酸 丁酸
与正常组比较，模型组大鼠血清促炎因子 TNF-α、
正常组 846.11±61.56 426.53±35.12 487.72±74.10
IL-6水平均显著升高，抑炎因子TGF-β1、IL-10水平均显 模型组 534.76±71.93 a 247.10±42.43 a 233.75±48.01 a
著降低（P＜0.01）；与模型组比较，各药物组大鼠血清促 阳性对照组 717.41±113.00 b 351.25±49.77 b 526.18±125.93 b
复方芩柏颗粒组 635.29±109.12 c 292.94±59.33 c 388.82±154.62 b
炎因子水平均显著降低，抑炎因子水平均显著升高（P＜
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组
0.01）。结果见表4。 比较，P＜0.05。

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