Page 49 - 《中国药房》2025年6期

析，记录峰面积（C）。每质量浓度平行6份，按下式计算 2.6 药动学实验
基质效应和提取回收率：基质效应＝B/C×100%，提取 根据体重将健康未孕的雌鼠分为对照组和 HMG
回收率＝A/B×100%；再以各待测成分的基质效应与内 组，每组 6 只。对照组雌鼠保持正常饮食，HMG 组雌鼠
标的基质效应之比表示各成分的内标归一化基质因子。 依据本课题组前期方法构建 HMG 模型：于雌鼠后腿交
结果（表 4）显示，阿魏酸、芍药苷、迷迭香酸的内标归一 替肌内注射苯甲酸雌二醇 0.5 mg/kg，每天 1 次，连续 25
化基质因子的 RSD 均小于 6%，提取回收率试验的 RSD d；随后，肌内注射黄体酮4 mg/kg，每天1次，连续5 d，以
均不高于 5.1%，符合 2020 年版《中国药典》（四部）通则 建立HMG模型（注射后，若其乳头较对照组明显增大则
[14]
的相关要求。 表明模型复制成功） 。造模后，对照组和HMG组雌鼠
表4 香芍散结口服液中3种入血成分的内标归一化基 禁食过夜，于次日以1.485 g/kg[按成人临床等效剂量（每
质因子和提取回收率 次 10 mL，每天 3 次，按生药量计每人 16.5 g/d）换算，以
理论质量浓度/ 基质效应试验 提取回收率试验 水为溶剂]的剂量灌胃香芍散结口服液，每天 1 次，连续
待测成分
（ng/mL） 内标归一化基质因子（x±s）/% RSD/% 提取回收率（x±s）/% RSD/% 7 d。分别于在首次给药前（0 h）以及末次给药后 5、15、
阿魏酸 30 110.22±4.72 4.3 94.64±2.27 2.4 30 min 和 1、2、4、8、12、24 h 经雌鼠眼底静脉丛取血 0.5
100 93.53±3.10 3.3 96.12±2.72 2.8 [15]
400 92.06±1.38 1.5 101.81±1.81 1.8 mL ，置于含肝素钠的离心管中，以 5 000 r/min 离心 10
芍药苷 30 122.19±6.85 5.6 97.13±3.11 3.2 min，分离血浆，于－80 ℃下保存，备用。
100 95.98±1.23 1.3 95.29±2.72 2.9 取各组大鼠血浆样品，按“2.4”项下方法处理后，再
400 88.03±1.71 1.9 103.37±1.35 1.3
迷迭香酸 30 136.25±6.06 4.4 74.67±2.10 2.8 按“2.1”“2.2”项下条件进样测定，记录峰面积并根据随
100 83.39±2.50 3.0 89.66±4.53 5.1 行标准曲线计算血浆中阿魏酸、芍药苷、迷迭香酸的质
400 73.98±1.32 1.8 103.51±1.17 1.1 量浓度（测定芍药苷含量时，部分样品需要稀释后进
2.5.6 稀释效应的考察 样）。采用 GraphPad Prism 9.5.1 软件绘制 3 种入血成分
结合“2.3.1”“2.5.2”项下方法配制阿魏酸、芍药苷、 的平均药时曲线（图1）。结果显示，在对照组和HMG组
迷迭香酸质量浓度均为 800 ng/mL 的血浆样品，用空白 雌鼠体内，阿魏酸、芍药苷、迷迭香酸的血药浓度均随时
血浆稀释2倍，并以此稀释倍数平行制备6份，按“2.4”项 间的延长而降低。
下方法处理后，再按“2.1”“2.2”项下方法进样分析，记录 采用Phoenix WinNonlin 8.1软件的非房室模型计算
峰面积并根据随行标准曲线计算样品中各待测成分的 各组大鼠的药动学参数，包括药时曲线下面积（AUC0－24 h、
质量浓度。结果显示，阿魏酸、芍药苷、迷迭香酸实测质 AUC0－∞ ）、平均滞留时间（MRT0－∞ ）、半衰期（t1/2 ）、达峰时间
量浓度与理论质量浓度的偏差分别为－3.90%～1.10% （tmax ）、峰浓度（cmax ）。采用 SPSS 26.0 软件对数据进行统
（RSD 为 1.8%）、－1.76%～8.29%（RSD 为 3.31%）、 计分析。所有数据均以x ˉ±s表示，将AUC、cmax进行对数
－10.25%～4.41%（RSD为5.49%），符合2020年版《中国 转换后再进行t检验，对AUC、t1/2、MRT进行t检验，对tmax
药典》（四部）通则的相关要求。 进行秩和检验。检验水准α＝0.05。
2.5.7 稳定性试验 结果（表 5）显示，与对照组比较，HMG 组雌鼠体内
按“2.5.4”项下方法配制阿魏酸、芍药苷、迷迭香酸 阿魏酸的 AUC0－24 h、AUC0－∞、cmax均显著升高（P＜0.05），
低、中、高质量浓度的质控血浆样品，每质量浓度平行 6 而该成分其余药动学参数组间比较差异均无统计学意
份，考察其按“2.4”项下方法处理后在自动进样盘（4 ℃） 义（P＞0.05）；芍药苷的 AUC0－24 h、AUC0－∞、MRT0－∞、t1/2、
内放置12 h、反复冻融（－80 ℃～室温）3次、室温下放置 cmax均略有升高或延长，但各药动学参数组间比较差异
12 h、－80 ℃下放置7 d的稳定性。结果显示，在上述条 均 无 统 计 学 意 义（P＞0.05）；迷 迭 香 酸 的 AUC0－24 h、
件下，各待测成分实测质量浓度的偏差均在±15% 内， MRT0－∞均显著升高或延长（P＜0.05），而该成分其余药
提示样品稳定性良好。 动学参数组间比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。

400 400 对照组 500 500 对照组 300 300 对照组
300
300 （ ng/mL ） 300 HMG组 400 （ ng/mL ） 400 HMG组 200 （ ng/mL ） 200 HMG组
200
（ ng/mL ） 200 c/ 100 0 （ ng/mL ） 300 c/ 100 0 （ ng/mL ） c/ 100 0
200
c/ 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 c/ 200 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 c/ 100 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
100 t/h t/h t/h
100
0 0 0
0 5 10 15 20 0 5 10 15 20 0 5 10 15 20
t/h t/h t/h
A.阿魏酸 B.芍药苷 C.迷迭香酸
图1 两组大鼠血浆中香芍散结口服液3种入血成分的平均药时曲线（x±s，n＝6）

中国药房 2025年第36卷第6期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 6 · 683 ·