Page 44 - 《中国药房》2025年4期
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and phosphorylation level of AMPK were significantly increased or up-regulated （P＜0.05）. Compound C significantly reversed the
          improvement  effects  of  jaceosidin  on  the  above  indexes  of  OA  rats （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  Jaceosidin  may  inhibit
          inflammation and extracellular matrix degradation in OA rats by regulating the AMPK/NLRP3 signaling pathway.
          KEYWORDS     jaceosidin； AMPK/NLRP3 signaling pathway； osteoarthritis； inflammation； extracellular matrix



              骨关节炎（osteoarthritis，OA）是一种与年龄相关的                with  thrombospondin  5，ADAMTS5）、AMPK、磷 酸 化
          慢性退行性关节疾病，可引起严重和反复的炎症和疼痛                            AMPK（phosphorylated AMPK，p-AMPK）、NLRP3、甘油
                                                        [1]
          症状，最终导致受影响关节的功能降低或完全丧失 。                            醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）一抗及过氧化物酶标记的羊
          近年来，随着人口老龄化和肥胖的加剧，OA的发病率和                           抗兔二抗（批号分别为 ab307674、ab313636、ab32047、
          致残率逐年上升，已成为世界的重大公共卫生问题之                             ab41037、ab133448、ab263899、ab8245、ab6721，英 国
          一 。目前 OA 的治疗策略包括早期使用非甾体抗炎药                          Abcam 公 司），兔 源 裂 解 的 胱 天 蛋 白 酶 1（cleaved-
            [2]
          缓解疼痛，末期进行关节置换。然而，长期使用非甾体                            caspase-1）、裂解的IL-1β（cleaved-IL-1β）一抗（批号分别
          抗炎药可致多种副作用发生，如胃肠道副作用、肝肾功                            为4199、12242，美国CST公司）。
                                                    [3]
          能损伤等，关节假体的寿命短也是一个严重问题 。因                            1.3 实验动物
          此，亟须开发可有效逆转OA发展的新药。研究表明，炎                               本研究所用动物为 SPF 级雄性 SD 大鼠，共 60 只，8
          症反应是 OA 发病机制的重要相关因素，可引发和加速                          周龄，体重为 310～320 g，购自武汉有度生物科技有限
                  [4]
          疾病进展 。这提示开发抑制 OA 炎性损伤的药物具有                          公司，动物生产许可证号为SCXK（鄂）2021-0025。所有
          重要意义。                                               动物均饲养于温度为 21～24 ℃、相对湿度为 50%～
              棕矢车菊素是一种从菊科、茜草科等植物中提取的                          60%、12 h 昼夜交替的环境中。所有操作均遵循动物护
          天然类黄酮，具有抗炎、抗氧化等活性 。已有研究报                            理和使用委员会的指导，并由武汉有度生物科技有限公
                                            [5]
          道，棕矢车菊素可减轻 OA 小鼠软骨损伤 ，但具体机制                         司动物伦理委员会批准（批准号202401016）。
                                             [6]
          尚不完全明确。相关研究显示，调节腺苷一磷酸活化的                            2 方法
          蛋 白 激 酶（adenosine  monophosphate-activated  protein   2.1 OA模型建立
          kinase，AMPK）/NOD 样受体蛋白 3（NOD-like receptor              采用改良 Hulth 法 建立 OA 模型，具体操作方法如
                                                                                 [8]
          protein 3，NLRP3）通路可缓解类风湿性关节炎大鼠滑膜                    下：将大鼠仰卧位固定，麻醉，剃除右侧膝关节毛发、清
              [7]
          炎症 ，但棕矢车菊素是否可通过调节AMPK/NLRP3信                        洗、消毒后，沿右后膝关节前侧纵向切开皮肤，暴露关节
          号通路来影响 OA 大鼠炎性损伤尚不可知。基于此，本                          腔，依次切断前交叉韧带、内侧副韧带，摘取半月板，缝
          研究基于该通路探究了棕矢车菊素对OA大鼠炎性损伤                            合伤口。术后连续3 d肌内注射青霉素以防感染。
          的影响及机制，以期为OA的治疗提供参考。                                2.2 大鼠分组与处理
          1 材料                                                    将大鼠随机分为 OA 组、棕矢车菊素组、Compound
          1.1 主要仪器                                            C 组、棕矢车菊素+ Compound C 组、假手术组，每组 12
              本研究所用主要仪器有 500-714-10 型游标卡尺                     只。假手术组大鼠除不做“切断前交叉韧带、内侧副韧
         （日本 Mitutoyo 公司）、CX53 型光学显微镜（日本 Olym‐                带，摘取半月板”处理外，其余操作同“2.1”项；其余各组
          pus 公司）、ST-360 型酶标仪（上海科华实验系统有限公                     大鼠均按“2.1”项下方法建立OA模型，以大鼠出现膝关
          司）、DYCZ-24DN型蛋白电泳仪（北京六一仪器厂）。                        节肿胀、僵硬、活动受限等症状作为造模成功 。建模成
                                                                                                    [9]
                                                                                                           [6]
          1.2 药品与试剂                                           功后，棕矢车菊素组大鼠灌胃33.33 mg/kg棕矢车菊素 ，
              本研究所用主要药品与试剂有棕矢车菊素（纯度≥                          且腹腔注射与 Compound C 等体积的生理盐水；Com‐
                                                                                                       [10]
          98%，批号 18085-97-7，四川精萃天成药物科技有限公                     pound C 组大鼠腹腔注射 20 mg/kg Compound C ，且灌
          司），AMPK抑制剂Compound C（批号HY-13418A，美国                 胃与棕矢车菊素等体积的生理盐水；棕矢车菊素+Com‐
          MCE 公司），番红 O-固绿染色试剂盒（批号 BES21441                    pound C组大鼠灌胃33.33 mg/kg棕矢车菊素+腹腔注射
          BO，上海博尔森生物科技有限公司），大鼠肿瘤坏死因                           20 mg/kg Compound C；OA组和假手术组大鼠灌胃与棕
          子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素 18         矢车菊素等体积的生理盐水+腹腔注射与 Compound C
         （interleukin，IL-18）、IL-6 酶联免疫吸附测定（ELISA）试            等体积的生理盐水。各组大鼠每天给药1次，持续8周。
          剂盒（批号分别为 20221105、20221129、20221227，上海              2.3 膝关节肿胀度检测
          广锐生物科技有限公司），兔源胶原蛋白Ⅱ（collagen                            末次给药24 h后，利用游标卡尺测量所有大鼠的右
          Ⅱ）、聚集蛋白聚糖（aggrecan，ACAN）、血小板反应蛋白                    膝关节直径，以右膝关节直径变化作为评估膝关节肿胀
          解整合素金属肽酶 5（a disintegrin and metalloproteinase      度的指标。


          · 422 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 4                               中国药房  2025年第36卷第4期
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