Page 39 - 《中国药房》2025年3期
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                                          PTX/ICA游离药溶液（释放介质1）                                PTX/ICA游离药溶液（释放介质1）
           累计释放率/%  50                    MTX-oxi-Ms@PTX/ICA（释放介质1）  累计释放率/%  50             MTX-oxi-Ms@PTX/ICA（释放介质1）
                                                                                             Ms@PTX/ICA（释放介质1）
                                          Ms@PTX/ICA（释放介质1）
                                                                                             MTX-oxi-Ms@PTX/ICA（释放介质2）
                                          MTX-oxi-Ms@PTX/ICA（释放介质2）

              0                                                 0
               0             10               20              30            40               50  0             10               20              30            40               50
                          时间/h                                               时间/h
                    A. PTX的体外释放曲线                                      B. ICA的体外释放曲线
                                        图2 2种药物的体外释放曲线（x±s，n＝3）

          2.6 胶束的体外靶向性评价                                     著 高 于 MTX-oxi-Ms@Cou 组（P＜0.05），但 与 MTX-
          2.6.1 荧光显微镜观察胶束体外摄取情况                              Ms@Cou组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
              由于PTX和ICA不具有荧光，因此本研究选用具有                       2.6.2 流式细胞术考察胶束体外摄取情况
          绿色荧光信号的Cou代替药物，按“2.2”项下方法制备各                           细胞分组、培养、给药同“2.6.1”项下。将RENCA细
          荧光探针胶束，以此来评价胶束的体外细胞摄取情况。                           胞在含药培养基中培养1 h后，用冷PBS洗涤3次，随后，
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          将 RENCA 细胞按 1.6×10 个/孔的密度接种于 24 孔板                 消化细胞并用 0.3 mL PBS 重悬。通过流式细胞仪测定
          中，孵育 24 h。随后，细胞被分为 Blank-Ms 组、Cou 组、               与细胞结合的 Cou 的荧光强度。按“2.6.1”项下方法进
          Ms@Cou组、MTX-Ms@Cou组、MTX-oxi-Ms@Cou组以               行统计分析。
          及 MTX-oxi-Ms@Cou+H2O2组（经 0.1 mmol/L H2O2诱导             结果显示，Blank-Ms 组的荧光强度（8.60±1.67）最
                  [16]
          氧化应激 ，下同）。各药物组中Cou的终浓度均控制在                         低，Cou 组荧光强度升高至 553.00±37.80，而 Ms@Cou
          3 μmol/L ，每组设置 3 个复孔。加入各胶束后继续孵                     组进一步升高至 635.33±8.50。在 MTX 修饰后，MTX-
                 [15]
          育 2 h，加入 DAPI 室温避光染色 15 min，利用荧光显微                 Ms@Cou 组的荧光强度达到 702.33±12.42，显著高于
          镜观察并拍照。采用Image J软件分析荧光强度。使用                        Ms@Cou 组（P＜0.05）。MTX-oxi-Ms@Cou 组的荧光强
          GraphPad Prism软件进行数据分析，数据以x±s表示，组                  度为661.33±12.86。MTX-oxi-Ms@Cou+H2O2组的荧光
          间比较采用单因素方差分析和 Scheffé 检验，检验水准                      强 度（741.00±25.24）显 著 高 于 MTX-oxi-Ms@Cou 组
          α＝0.05。结果见图3。                                     （P＜0.01），且与MTX-Ms@Cou组相比差异无统计学意
              结果显示，Blank-Ms 组细胞未观察到绿色荧光信                     义（P＞0.05）。流式细胞仪的测定结果与荧光显微镜观
          号，其余各组细胞均观察到不同程度的荧光信号。其中，                          察结果一致，进一步验证了 MTX-Ms@Cou 在 RENCA
          Cou组荧光强度（48 192.00±11 096.84）最低；Ms@Cou组            细胞中表现出更好的穿透性，药物更容易在给药部位
          荧光强度（175 941.33±10 509.75）较 Cou 组显著升高              蓄积。
         （P＜0.05）；MTX-Ms@Cou 组 荧 光 强 度（220  732.33±          2.7 胶束对RENCA细胞存活率的影响
          23 304.96）进一步高于Ms@Cou组（P＜0.05）；MTX-oxi-                采 用 CCK-8 法 测 定 。 按 2×10 个/孔 的 密 度 将
                                                                                              4
          Ms@Cou组荧光强度（179 027.00±6 403.55）则较MTX-             RENCA细胞接种于96孔板中，培养24 h后，根据预实验
          Ms@Cou 组 显 著 降 低（P＜0.05）。 此 外 ，MTX-oxi-            结果加入不同浓度的Blank-Ms（空白对照）和Ms@PTX/
          Ms@Cou+H2O2 组荧光强度（221 047.33±12 576.07）显           ICA、MTX-Ms@PTX/ICA、MTX-oxi-Ms@PTX/ICA以及



           Nuclei





           Cou





           Overlay



                Blank-Ms组         Cou组           Ms@Cou组       MTX-Ms@Cou组     MTX-oxi-Ms@Cou组  MTX-oxi-Ms@Cou+H2O2组
                           图3 各样品在RENCA细胞中的体外摄取情况荧光显微图（标尺＝50 μm）


          中国药房  2025年第36卷第3期                                                 China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 3    · 289 ·
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