Page 60 - 《中国药房》2025年2期
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表2 大鼠血浆样品中环泊酚质量浓度检测的提取回收                            数转换后再按上述方法进行比较），检验水准α＝0.05。
               率与基质效应考察结果（n＝5）                                    环泊酚的药时曲线如图 2 所示，3 组大鼠体内环泊
                           提取回收率/%          基质效应/%            酚的血药浓度均随时间延长而迅速下降，其中对照组的
                理论质量浓度/
           待测物                       基质效应因子    归一化基质效应因子
                 （ng/mL）  结果（x±s）  RSD                        下降趋势最明显。各组大鼠体内环泊酚的药动学参数
                                      （x±s）   结果（x±s）  RSD
           环泊酚     30   102.77±9.33  9.08  94.85±6.88  96.67±7.01  7.25  如表3所示，与对照组比较，氯吡格雷正常剂量组大鼠体
                  250    99.37±4.69  4.72  100.62±7.73  102.55±7.88  7.68  内环泊酚的平均 AUC0－t、AUC0－∞分别升高了 21.4%、
                  1 600  100.89±5.02  4.98  96.07±6.35  97.91±6.66  6.80  28.7%，平均 MRT0－t、MRT0－∞分别延长了 18.3%、63.5%，
           内标     250   103.79±3.64  3.51  98.12±3.87
                                                              平均 CL 降低了 23.3%，差异均具有统计学意义（P＜
          2.4.5 稳定性试验
                                                              0.05）；氯 吡 格 雷 高 剂 量 组 大 鼠 体 内 环 泊 酚 的 平 均
              按照“2.4.3”项下方法制备低、中、高质量浓度的质
                                                              AUC0－t、AUC0－∞分别升高了20.8%、28.5%，平均MRT0－t、
          控血浆样品溶液，每质量浓度平行5份，共4组。取1组
                                                              MRT0－∞ 分 别 延 长 了 27.6%、61.3%，平 均 CL 降 低 了
          质控血浆样品溶液，按“2.3”项下方法处理后于自动进样
                                                              22.1%，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。然而，氯吡
          器（4 ℃）内放置 24 h，再按“2.1”项下条件进样测定，考
                                                              格雷高剂量组大鼠体内环泊酚各药动学参数与氯吡格
          察样品在进样器中静置的稳定性；另外3组质控血浆样
                                                              雷正常剂量组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。
          品溶液分别于室温（25 ℃）下放置8 h、－40 ℃储存30 d、
                                                                      2 000               对照组
          冻融（－40 ℃～室温）循环 3 次后按“2.3”项下方法处理
                                                                                          氯吡格雷正常剂量组
          并按“2.1”项下条件进样测定，考察样品的短期稳定性、                                                     氯吡格雷高剂量组
                                                                      1 500
          长期稳定性和冻融稳定性。结果显示，在上述条件下 3
          个质量浓度的质控血浆样品溶液中，环泊酚峰面积的                                     （ ng/mL ）  1 000
          RSD 均小于 9%（n＝5），符合 2020 年版《中国药典》（四                          c/
                       [13]
          部）的相关要求 。                                                    500
          2.5 大鼠体内环泊酚药动学和药效学研究
          2.5.1 药动学研究                                                    0 0                10           20           30          40                  50           60             70
                                                                                       t/min
              将18只健康雄性SD大鼠，随机分为对照组、氯吡格
                                                                图2 各组大鼠体内环泊酚的药时曲线（x±s，n＝6）
          雷正常剂量组、氯吡格雷高剂量组，每组6只。给药方案
          如下：对照组大鼠每天灌胃0.5%CMC-Na溶液（每200 g                     表3 各组大鼠体内环泊酚的药动学参数（x±s，n＝6）
          体重予1 mL）；氯吡格雷正常剂量组和氯吡格雷高剂量                          药动学参数         对照组       氯吡格雷正常剂量组    氯吡格雷高剂量组
                                                              AUC 0－t/（μg·h/L）  255.92±38.85  310.56±32.24 a  309.23±45.56 a
          组 大 鼠 分 别 每 天 灌 胃 氯 吡 格 雷 7.5、15  mg/kg（以           AUC 0－∞/（μg·h/L）  261.87±39.47  337.10±30.19 a  336.51±52.89 a
          0.5%CMC-Na溶液为溶剂，每200 g体重予1 mL；剂量分                   MRT 0－t/min  10.59±0.78   12.53±1.33 a  13.51±1.31 a
          别参考硫酸氢氯吡格雷片药品说明书的推荐及维持剂                             MRT 0－∞/min  12.14±1.13   19.85±7.39 a  19.58±2.02 a
                                                              t 1/2/min    12.80±0.94   23.15±15.11  20.10±2.59
          量经换算而得）；每天 1 次，连续 14 d。于末次给药 12 h
                                                              CL/[L/（h·kg）]  9.33±1.28   7.16±0.63 a  7.27±1.08 a
          后，经大鼠尾静脉注射环泊酚注射液 2.4 mg/kg（剂量参                      V d/（L/kg）    2.87±0.43    3.92±2.31   3.50±0.56
          考环泊酚注射液药品说明书的推荐剂量经换算而得），                            c max/（ng/mL）  1 538.62±198.18  1 541.85±267.60  1 542.37±200.02
          并在注射后2、4、8、12、16、20、30、45、60 min于眼内眦取                  a：与对照组比较，P＜0.05。
          血约300 μL，分别置于肝素化离心管中，以10 900 r/min                  2.5.2 药效学研究
          离心 10 min，取上层血浆于－40 ℃冻存，备用。取大鼠                          将“2.5.1”项下尾静脉注射环泊酚注射液后的各组
          血浆样品，按“2.3”项下方法处理并按“2.1”项下条件进                       大鼠迅速放置于平整柔软的保温垫上，从其处于仰卧位
          样测定，记录峰面积，以内标法计算血浆中环泊酚的质                            并失去翻正反射时开始计时，至其能够成功翻转至俯卧
          量浓度。采用GraphPad Prism 8.0.2软件绘制药时曲线，                 位时结束计时，统计每只大鼠的翻正反射消失（loss of
                                                                                         [14]
          应用DAS 2.0软件的非房室模型对各组大鼠体内环泊酚                         righting reflex，LORR）持续时间 。采用 SPSS 27 软件
          的药动学参数进行分析。采用SPSS 27软件对药时曲线                         对 LORR 持续时间进行单因素方差分析，并使用 LSD-t
          下 面 积（area  under  the  drug  concentration  time  curve，  检验进行多重比较，检验水准α＝0.05。3组大鼠经尾静
          AUC）、平均驻留时间（mean residence time，MRT）、消除             脉注射环泊酚注射液后，均迅速失去翻正反射；对照组
          半衰期（elimination half-life，t1/2 ）、血浆清除率（plasma       大鼠的 LORR 持续时间为（674.5±65.0）s，而氯吡格雷
          clearance，CL）、表观分布容积（apparent volume of distri‐     正常剂量组和氯吡格雷高剂量组大鼠的 LORR 持续时
          bution，Vd ）、峰浓度（peak concentration，cmax ）等进行统计      间分别为（806.0±105.8）s、（835.7±124.4）s，均显著长于
          分析（MRT、t1/2、CL、Vd采用单因素方差分析进行多组间                     对照组（P＜0.05），但后两组之间比较差异无统计学意
          比较，并使用LSD-t检验进行多重比较；AUC和cmax经对                      义（P＞0.05）。


          · 182 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 2                               中国药房  2025年第36卷第2期
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