Page 58 - 《中国药房》2025年2期
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（cytochrome P450，CYP）酶受到抑制是导致 DDIs 的常                001，纯度99.8%）均由海思科制药（眉山）有限公司提供；
          见机制，通常分为可逆（竞争性或非竞争性结合）和不可                           环泊酚注射液（批号20220207，规格20 mL∶50 mg）购自
                                     [3]
          逆（自杀性或机理性灭活）两类 。其中，机理性灭活后                           辽宁海思科制药有限公司；硫酸氢氯吡格雷片[批号
          的 CYP 酶活性无法恢复，必须重新合成，因此机理性酶                         DHG0555，规格75 mg（按C16H16ClNO2S计）]购自赛诺菲
          灭活剂比可逆性酶抑制剂更容易导致明显且严重的                             （杭州）制药有限公司；羧甲基纤维素钠（CMC-Na，批号
              [4]
          DDIs 。氯吡格雷在 2004 年被证实为潜在的 CYP2B6                    20181019）购自国药集团化学制药有限公司；乙酸铵、乙
          酶机理性灭活剂，提示该药可能与该酶底物发生DDIs，                          腈为色谱纯，氨水等其余试剂均为分析纯，水为蒸馏水。
                              [5]
          从而影响临床用药安全 。                                        1.3 实验动物
              环泊酚是我国自主研发的新型短效静脉麻醉药，现                              SPF 级健康雄性 SD 大鼠 18 只，体重（200±20）g，7
          已被批准用于非气管插管手术/操作的镇静和麻醉、全身                           周龄，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，生产许
                                                        [6]
          麻醉的诱导和维持以及重症监护机械通气时的镇静 。                            可证号为 SCXK（京）2019-0008。所有动物均饲养于温
          研究表明，环泊酚在体内主要经Ⅰ相和Ⅱ相代谢，其中                            度（22±2）℃、相对湿度为（55±10）%、12 h 光照/12 h 黑
          Ⅰ相代谢主要经 CYP2B6 酶氧化生成单氧化葡萄糖醛                         暗的实验室内，自由摄食、饮水。动物操作和实验方案
          酸结合物，而Ⅱ相代谢主要经尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转                            均符合河北医科大学第二医院实验动物管理要求，并经
          移 酶 1A9（uridine  diphosphate  glucuronyl  transferase   该院科研伦理委员会批准（审查决议编号2023-AE285）。
                                                [7]
          1A9，UGT1A9）作用生成葡萄糖醛酸结合物 。随着环                        2 方法与结果
          泊酚临床应用的日益广泛，其与其他药物相互联用的情                            2.1 色谱与质谱条件
          况也逐渐增多。长期服用氯吡格雷的患者在进行纤维                             2.1.1 色谱条件
          支气管镜、胃镜和结肠镜诊疗以及接受机械通气期间，                                以 Symmetry C18 （4.6 mm × 150 mm，3.5 μm）为色
                                                              谱柱；以含 5 mmol/L 乙酸铵的 0.01% 氨水为流动相 A、
          可能需要同时应用环泊酚进行镇静或麻醉。《抗血栓药
          物围手术期管理多学科专家共识》建议，对于缺血性脑                            乙腈为流动相 B 进行梯度洗脱（0～1.0 min，75%B→
          卒中/短暂性脑缺血发作等存在血栓高风险、出血低风险                           99%B；1.0～5.5  min，99%B；5.5～6.5  min，99%B→
                                                              75%B）；流速为 0.70 mL/min；柱温为 40 ℃；自动进样器
                                              [8]
          的患者，应在围手术期坚持应用氯吡格雷 ；此外，国外
                                                              温度为4 ℃；进样量为10 μL。
          多项研究证实了接受胃肠道手术、尿道/前列腺电切术以
                                                              2.1.2 质谱条件
          及髋膝关节置换术等手术的患者在围手术期继续应用
                                                                  采用电喷雾离子源，以多反应监测模式进行负离子
          氯吡格雷的安全性         [9―11] 。鉴于这些研究成果，本课题组
                                                              扫描；碰撞气压力为 9 psi；气帘气压力为 30 psi；离子源
          认为环泊酚和氯吡格雷在接受紧急或择期手术的患者
                                                              喷射电压为－4 500 V，离子源温度为 500 ℃；雾化气压
          中存在联合使用的可能。当前证据显示，CYP2B6 酶的
                                                              力为 50 psi；辅助气压力为 60 psi；环泊酚和内标的碰撞
          强诱导剂/弱抑制剂以及UGT1A9酶的强诱导剂/抑制剂
                                                              电压分别为－28、－30 V，去簇电压分别为－85、－83
          均不会对环泊酚在人体内的代谢产生具有临床意义的
                                                              V，用于定量分析的离子对分别为 m/z 203.2→175.1、m/z
              [12]
          影响 。然而，目前尚不清楚 CYP2B6 酶灭活剂是否会
                                                              209.3→181.3。
          影响环泊酚的代谢。为此，本研究采用液相色谱-串联
                                                              2.2 对照品溶液和内标溶液的配制
          质谱（LC-MS/MS）法检测血浆中环泊酚的质量浓度，拟
                                                                  分别精密称定环泊酚和内标对照品适量，加乙腈溶
          通过考察氯吡格雷对大鼠体内环泊酚药动学和药效学
                                                              解、定容，得到质量浓度均为 2 mg/mL 的环泊酚储备液
          的影响来探讨两药的相互作用，以期为CYP2B6酶灭活
                                                              和内标储备液，于－40 ℃下保存，备用。精密吸取环泊
          剂与环泊酚的临床合理联用提供参考。                                   酚储备液适量，用50%乙腈依次稀释成质量浓度分别为
          1 材料                                                40  000、20  000、10  000、5  000、2  500、1  200、600、300
          1.1 主要仪器                                            ng/mL 的系列环泊酚对照品溶液和 32 000、5 000、600、
              本研究所用主要仪器有 LC-20AD 型高效液相色谱                      300 ng/mL 的高、中、低、定量下限质量浓度环泊酚质控
                                        +
          仪（日本 Shimadzu 公司）、API 4000 型三重四极杆质谱                 工作液；另精密吸取内标储备液适量，用 50% 乙腈稀释
          仪（美国 AB Sciex 公司）、XW-80A 型涡旋混合仪（上海                  成质量浓度为5 000 ng/mL的内标溶液。
          医大仪器有限公司）、CPA225D 型电子分析天平（德国                        2.3 样品处理
          Sartorius公司）等。                                          将冷冻的血浆样品自然解冻，取 100 μL，加入内标
          1.2 主要药品与试剂                                         溶液5 μL，涡旋1 min混匀，加入乙腈300 μL，涡旋2 min
              环泊酚对照品（批号 11220202，纯度 99.9%）、氘代                 混匀，以 10 900 r/min 离心 15 min，取上清液，应用 LC-
          环泊酚对照品（内标 ，批号 cc-HSK23287-202005006-                MS/MS法进样分析。


          · 180 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 2                               中国药房  2025年第36卷第2期
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