Page 59 - 《中国药房》2025年1期
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期运动速度之比（ratio of early-diastolic and late-diastolic   Em/Am 均较模型组显著升高（P＜0.05），且益母草碱-H
          motion velocity of the mitral ring，Em/Am）。LVFS＝（左  组上述指标变化均较益母草碱-L 组更明显（P＜0.05）；
          心室的舒张末期内径－左心室的收缩末期内径）/左心室                          益母草碱-H+R428 组大鼠 LVEF、LVFS、Em/Am 均较益
          的舒张末期内径×100%。                                      母草碱-H组显著降低（P＜0.05）。结果见表1。
          2.4 大鼠血清中炎症因子及心肌损伤标志物水平检测
                                                                   表1 各组大鼠心功能比较（x±s，n＝12）
              心功能检测结束后，各组大鼠腹主动脉取血，静置
                                                              组别               LVEF/%     LVFS/%      Em/Am
          后离心，取血清，按照相应ELISA试剂盒说明书操作，检                         对照组             82.54±8.51  56.48±6.11  1.28±0.13
          测血清中炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）及心肌损伤标                    模型组             44.67±3.37 a  31.76±2.46 a  0.71±0.08 a
                                                              益母草碱-L组         50.79±5.22 b  36.41±3.82 b  0.93±0.10 b
          志物（CK-MB、cTnⅠ、Mb）水平。
                                                              益母草碱-H组         77.63±7.98 bc  53.22±5.54 bc  1.19±0.12 bc
          2.5 大鼠心肌组织病理形态观察                                    益母草碱-H+R428组    55.29±5.83 d  38.65±4.02 d  0.97±0.10 d
              取血结束，处死大鼠，取心肌组织。每组选择6只大                           a：与对照组相比，P＜0.05；b：与模型组相比，P＜0.05；c：与益母草
          鼠的心肌组织，制成石蜡切片（厚 5 μm），行常规 HE 染                     碱-L组相比，P＜0.05；d：与益母草碱-H组相比，P＜0.05。
          色，显微镜下观察心肌组织病理形态。其余心肌组织置                           3.2 大鼠血清中炎症因子水平测定结果
          于－20 ℃冰箱中冷冻保存。                                         模型组大鼠血清中 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平均较对
          2.6 大鼠心肌组织细胞凋亡率检测                                  照组显著升高（P＜0.05）；益母草碱各剂量组大鼠血清
              取“2.5”项下各组大鼠的心肌组织石蜡切片，常规脱                      中 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平均较模型组显著降低（P＜
          蜡至水后进行 TUNEL 染色、DAPI 染色，具体操作参照                     0.05），且益母草碱-H 组上述指标变化均较益母草碱-L
          试剂盒说明书；脱水后透明密封，显微镜下观察心肌组
                                                             组更明显（P＜0.05）；益母草碱-H+R428 组大鼠血清中
          织细胞凋亡情况（凋亡细胞呈红色）。计算心肌组织细
                                                             TNF-α、IL-1β、IL-6 水平均较益母草碱-H 组显著升高
          胞凋亡率：细胞凋亡率（%）＝TUNEL 阳性细胞数/DAPI
                                                            （P＜0.05）。结果见表2。
          阳性细胞数×100%。
          2.7 大鼠心肌组织中凋亡及 GAS6/Axl 信号通路相关                     表2 各组大鼠血清中炎症因子水平比较（x±s，n＝12，
                                                                  pg/mL）
          蛋白表达检测
                                                              组别               TNF-α      IL-1β       IL-6
              取各组剩余 6 只大鼠的心肌组织，研碎后加入蛋白
                                                              对照组            55.26±6.92  12.69±1.45  24.85±2.73
          裂解液在冰上充分裂解，提取总蛋白并进行定量，沸水                            模型组            224.51±23.48 a  57.83±5.97 a  106.79±1.15 a
          浴变性。取变性蛋白，在电压 60 V 下电泳分离 4～5 h，                     益母草碱-L组        163.28±18.76 b  36.47±3.82 b  71.58±7.79 b
                                                              益母草碱-H组        105.74±13.22 bc  16.54±1.91 bc  33.26±3.64 bc
          然后在电压 60 V 下湿转 2 h 至硝酸纤维素膜，封闭液室
                                                              益母草碱-H+R428组   147.56±16.51 d  32.71±3.45 d  65.72±6.85 d
          温摇床封闭 1 h。将膜与 cleaved-caspase-3、caspase-3、            a：与对照组相比，P＜0.05；b：与模型组相比，P＜0.05；c：与益母草
          Bcl-2、Bax、GAS6、p-Axl、Axl、β-actin一抗（其中cleaved-      碱-L组相比，P＜0.05；d：与益母草碱-H组相比，P＜0.05。
          caspase-3、caspase-3 抗体的稀释比例均为 1∶1 000，其余           3.3 大鼠血清中心肌损伤标志物水平测定结果
          一抗的稀释比例均为1∶2 000）在4 ℃下共孵育8 h；洗膜                        模型组大鼠血清中CK-MB、cTnⅠ、Mb水平均较对
          后，将膜与 HRP 标记的二抗（稀释比例 1∶10 000）在
                                                             照组显著升高（P＜0.05）；益母草碱各剂量组大鼠血清
          37 ℃下共孵育 1 h。经可视化处理后，凝胶成像系统采
                                                             中 CK-MB、cTnⅠ、Mb 水平均较模型组显著降低（P＜
          集图像，并使用Image软件分析条带灰度值，以目的蛋白
                                                             0.05），且益母草碱-H 组上述指标变化均较益母草碱-L
          与内参蛋白（β-actin）条带灰度值的比值表示目的蛋白的
                                                             组更明显（P＜0.05）；益母草碱-H+R428 组大鼠血清中
          相对表达量，并计算 cleaved-caspase-3/caspase-3、Bcl-2/
                                                             CK-MB、cTnⅠ、Mb 水平均较益母草碱-H 组显著升高
          Bax、p-Axl/Axl比值。
                                                            （P＜0.05）。结果见表3。
          2.8 统计学方法
              采用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。实验数                     表3 各组大鼠血清中心肌损伤标志物水平比较（x±s，
          据均符合正态分布，以 x±s 表示，多组间比较采用单因                             n＝12）
          素方差分析，进一步组间两两比较采用 LSD-t 检验。检                        组别              CK-MB/（U/L）  cTnⅠ/（ng/mL）  Mb/（ng/mL）
                                                              对照组             15.39±1.74  0.17±0.02  33.74±3.48
          验水准α＝0.05。                                          模型组             56.84±5.88 a  0.58±0.06 a  128.56±13.14 a
          3 结果                                                益母草碱-L组         37.63±3.92 b  0.39±0.04 b  89.37±9.27 b
                                                              益母草碱-H组         18.25±2.01 bc  0.19±0.02 bc  48.25±5.11 bc
          3.1 大鼠心功能测定结果
                                                              益母草碱-H+R428组    34.52±3.65 d  0.35±0.04 d  83.16±8.64 d
              模型组大鼠 LVEF、LVFS、Em/Am 均较对照组显著
                                                                a：与对照组相比，P＜0.05；b：与模型组相比，P＜0.05；c：与益母草
          降低（P＜0.05）；益母草碱各剂量组大鼠 LVEF、LVFS、                   碱-L组相比，P＜0.05；d：与益母草碱-H组相比，P＜0.05。

          中国药房  2025年第36卷第1期                                                  China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 1    · 53 ·
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