Page 46 - 《中国药房》2025年1期

以柠檬酸盐缓冲液热修复 8 min；待切片温度降至室温
后用 H2O2孵育 10 min，以磷酸盐缓冲液浸洗后，以山羊
血清孵育30 min，滴加NLRP3（稀释度为1∶3 000）、ASC

（稀释度为1∶1 000）、caspase-1（稀释度为1∶3 000）一抗，
4 ℃孵育过夜；次日，将切片复温至37 ℃后滴加二抗（稀
A. NLRP3与甘草苷 B. ASC与甘草苷
释度为1∶1 000）孵育20 min，以磷酸盐缓冲液浸洗后，以
DAB 显色 10 min，自来水冲洗终止；再以苏木素复染 3
min，经盐酸乙醇分化后，以自来水再次冲洗；经乙醇梯
度脱水、二甲苯透明、中性树胶封片后镜检。每只大鼠
子宫切片在 400 倍镜下随机选取 1 个视野，以棕黄色为
阳性染色，采用Image-Pro Plus 6.0软件测定每个视野中 C. pro-caspase-1与甘草苷
注：黑色实线代表氢键；黑色虚线代表疏水作用；黄色虚线代表
的积分光密度（integrated optical density，IOD）值表示目
盐桥。
的蛋白表达水平。 图2 庞氏安胎止血汤中甘草苷与 NLRP3、ASC、pro-
2.7 统计学方法 caspase-1蛋白分子对接模拟图
采用SPSS 22.0软件进行统计分析，计量资料以x±s
表1 各组大鼠流产率、子宫系数比较（x±s，n＝10）
表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较 组别 流产率/% 子宫系数/（×10 ）
－3
采用LSD-t检验。检验水准α＝0.05。 正常组 6.66±0.35 57.74±11.64
模型组 27.74±4.49 a 35.61±3.14 a
3 结果 地屈孕酮组 8.20±0.57 b 63.49±8.44 b
3.1 分子对接结果 庞氏安胎止血汤低剂量组 8.60±0.50 b 53.35±6.64 b
庞氏安胎止血汤中剂量组 8.61±0.50 b 57.00±2.55 b
由图 1 可知，庞氏安胎止血汤 13 种活性成分与 庞氏安胎止血汤高剂量组 8.52±0.64 b 57.73±10.87 b
NLRP3、ASC、pro-caspase-1蛋白的结合能均小于－5 kJ/ a：与正常组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。
mol，表明这13种活性成分与NLRP3、ASC、pro-caspase- 3.3 大鼠血清中T3、T4水平检测结果
1 蛋白结合稳定。另外，这 3 种蛋白与甘草苷的结合能 与正常组比较，模型组大鼠血清中T3、T4水平均显
在同类蛋白与活性成分对接中最低，表明这3种蛋白与 著升高（P＜0.05）。与模型组比较，地屈孕酮组和庞氏
甘草苷结合较为牢固。甘草苷与 NLRP3、ASC、pro- 安胎止血汤各剂量组大鼠血清中 T3、T4 水平均显著降

caspase-1蛋白的分子对接模拟图见图2。 低（P＜0.05）。结果见表2。
－5 表2 各组大鼠血清中 T3、T4 水平比较（x±s，n＝10，
－6 ng/mL）
－8.10 －5.70 －8.70 －8.10 －8.10 －6.80 －8.40 －8.00 －7.80 －7.70 NLRP3
－7
组别 T3 T4
－8
正常组 0.43±0.05 209.93±4.33
－9 a a
－8.20 －6.40 －9.30 －8.40 －8.10 －8.20 －8.20 －8.70 －8.50 －7.70 ASC 模型组 0.90±0.06 243.68±5.99
－10
地屈孕酮组 0.51±0.02 b 225.41±2.61 b
庞氏安胎止血汤低剂量组 0.59±0.04 b 224.56±4.30 b
庞氏安胎止血汤中剂量组 0.44±0.03 b 217.79±4.47 b
－6.80 －5.70 －8.40 －7.10 －7.70 －6.60 －7.60 －7.30 －7.80 －6.90 caspase-1
庞氏安胎止血汤高剂量组 0.37±0.04 b 214.35±1.74 b
a：与正常组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。
芒果苷 异阿魏酸 甘草苷 菊苣酸 迷迭香酸 荷叶碱 黄芩苷 木犀草素 芹菜素 白术内酯Ⅲ 3.4 大鼠血清中 IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ 水平检

图1 分子对接结合能热图（部分） 测结果
与正常组比较，模型组大鼠血清中IL-2、IFN-γ水平
3.2 大鼠流产率及子宫系数计算结果 均显著升高（P＜0.05），IL-4、IL-6、IL-10 水平均显著降

与正常组比较，模型组大鼠流产率显著升高（P＜ 低（P＜0.05）。与模型组比较，地屈孕酮组和庞氏安胎
0.05），子宫系数显著降低（P＜0.05）。与模型组比较，地 止血汤各剂量组大鼠血清中 IL-2、IFN-γ 水平均显著降
屈孕酮组和庞氏安胎止血汤各剂量组大鼠流产率均显 低（P＜0.05），IL-4、IL-10 水平均显著升高（P＜0.05）；地
著降低（P＜0.05），子宫系数均显著升高（P＜0.05）。结 屈孕酮组和庞氏安胎止血汤中、高剂量组大鼠血清中
果见表1。 IL-6水平均显著升高（P＜0.05）。结果见表3。

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