Page 31 - 《中国药房》2025年1期
P. 31

formula  can  regulate glucose  and  lipid  metabolism，  inflammation  factor  and  oxidative stress  levels，  and  alleviate  insulin  resistance
          in T2DM rats. Its mechanism of action may be related to the inhibition of the PERK/FOXO1 signaling pathway.
          KEYWORDS    Qingxue xiaozhi jiangtang formula； type 2 diabetes mellitus； insulin resistance； protein kinase R-like endoplasmic
          reticulum kinase； forkhead box O1


              2 型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）是以胰       1.2 主要药品与试剂
          岛素抵抗（insulin resistance，IR）和胰岛 β 细胞功能不足                黄连、虎杖、大黄、姜黄、泽泻、萆薢、茵陈、白术、石
                                                       [1]
          导致血糖调节失常为主要特征的慢性代谢紊乱疾病 。                           菖蒲、红花中药饮片（批号分别为 23052405、20221106、
          在T2DM中，IR导致的高胰岛素血症和高血糖会通过负                         230513001、21061003、20231024、20221116、20230731、
          反馈机制加剧 IR；同时胰岛素反应性降低，无法有效抑                         23101202、20230727、20230922）均购于北京同仁堂制药
          制肝葡萄糖输出，导致肝脏发生 IR，从而进一步加剧糖                         有限公司，经首都医科大学附属北京中医医院药学部韩
                    [2]
          脂代谢紊乱 。故改善IR是治疗T2DM的关键策略。                          旭阳副主任药师鉴定均为真品；盐酸二甲双胍片（规格
              IR、慢性低度炎症与氧化应激之间关系复杂。慢性                        250 mg/片，批号H37020550）购于蓬莱诺康药业有限公司；
          炎症反应及氧化应激可通过损害胰岛素信号传导等途                            总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，
          径诱发或加重IR；同时，IR可导致糖脂代谢紊乱，进而加                        TG）、低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇（low-density  lipoprotein
                                            [3]
          剧炎症反应和氧化应激，形成恶性循环 。内质网应激                           cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density
         （endoplasmic reticulum stress，ERS）在 IR 的发生发展中       lipoprotein cholesterol，HDL-C）、天冬氨酸转氨酶（aspar‐
                                                             tate transaminase，AST）、丙氨酸转氨酶（alanine transami‐
          起着重要作用，当机体处于持续应激状态时，内质网无
                                        [4]
          法正确折叠蛋白质，从而引发 ERS 。蛋白激酶 R 样内                       nase，ALT）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）生
          质网激酶（protein kinase R-like endoplasmic reticulum ki‐  化试剂盒（批号分别为 20240123、20240123、20240123、
                                                             20240123、20230714、20240120、20240120）均购于南京
          nase，PERK）作为关键传感器，在肝脏糖代谢中扮演着
                                                             建 成 生 物 工 程 研 究 所 ；链 脲 佐 菌 素（streptozotocin，
          重要角色。当发生 ERS 时，肝脏 PERK 信号通路被激
                                                             STZ）、柠 檬 酸 钠 缓 冲 液 及 丙 二 醛（malondialdehyde，
          活，进而调节下游叉头框蛋白 O1（forkhead box O1，
                                                             MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）检
          FOXO1）活性，促进糖异生，增加肝糖输出，最终加重IR
                                                             测试剂盒（批号分别为S8085、C1013、BC0025、BC5165）
                      [5]
          引起的高血糖 。此外，PERK信号通路可通过抑制胰岛
                                                             均购于北京索莱宝科技有限公司；白细胞介素 6（inter‐
          素受体酪氨酸激酶活性、促进胰岛素受体降解、抑制葡
                                                             leukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，
          萄糖转运和促进脂质合成等，进一步抑制胰岛素信号传
                                                             TNF-α）、C 反应蛋白（C-reactive protein，CRP）酶联免疫
                   [6]
          导，加剧IR 。
                                                             吸 附 测 定（ELISA）试 剂 盒（批 号 分 别 为 A30640321、
              清血消脂降糖方是在首都医科大学附属北京中医
                                                             A38240412、A39440151）均购于杭州联科生物技术股份
          医院名老中医临床经验方清血消脂方的基础上继承和
                                                             有限公司；胰岛素 ELISA 试剂盒（批号 BSI2405141864）
          创新而成，具有清热泻火、健脾化痰、活血消瘀的功效，
                                                             购于上海爱萌优宁生物技术有限公司；鼠源β-肌动蛋白
          临床用于治疗T2DM收效颇佳，但其具体作用机制尚不
                                                            （β-actin）单克隆抗体（批号TA-09）购于北京中杉金桥生
          明确。本研究拟构建T2DM大鼠模型，初步探讨清血消
                                                             物技术有限公司；兔源PERK多克隆抗体（批号24390-1-
          脂降糖方对 T2DM 大鼠 IR 的影响，并从 PERK/FOXO1
                                                             AP）购于武汉三鹰技术有限公司；兔源磷酸化 PERK（p-
          信号通路出发初步探讨其潜在作用机制，为该方防治
                                                             PERK）多克隆抗体（批号 3179S）、兔源磷酸化 FOXO1
          T2DM提供科学依据。                                       （p-FOXO1）单克隆抗体（批号 84192S）均购于美国 CST
          1 材料                                               公司；兔源FOXO1单克隆抗体、辣根过氧化物酶（HRP）
          1.1 主要仪器                                           标记的山羊抗鼠 IgG 二抗、HRP 标记的山羊抗兔 IgG 二
              本研究所用的主要仪器有 ACCU-CHEK Active 型                 抗（批号分别为 ab179450、ab6789、ab6721）均购于英国
          血糖仪[罗氏诊断产品（上海）有限公司]、Synergy H1 型                   Abcam公司。
          多功能酶标仪（美国Bio-Tek公司）、3-18K型高速冷冻离                    1.3 动物
          心机（美国 Sigma 公司）、Aperio CS2 型玻片扫描仪、                     本研究所用动物为 SPF 级 SD 雄性大鼠，共 84 只，6
          Autostainer  XL 型 全 自 动 染 色 机（德 国 Leica 公 司）、      周龄，体重（200±30） g，购自北京维通利华实验动物技
          MM400 型高通量组织研磨系统（德国 Retsch 公司）、                    术有限公司[生产许可证号为SCXK（京）2021-0006]。大
          Tanon 4600型全自动化学发光图像分析系统（上海天能                      鼠购入后，饲养于首都医科大学附属北京中医医院北京
          科技有限公司）等。                                          市中医药研究所 SPF 级动物房内，饲养环境为 12 h 明/


          中国药房  2025年第36卷第1期                                                  China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 1    · 25 ·
   26   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36