Page 56 - 《中国药房》2024年24期

表3 各组小鼠心肌组织中Bcl-2、p-AMPKα、MIF蛋白 白的表达水平，提示 PHC 的心肌保护作用可能与激活
表达水平比较（x±s，n＝8） MIF/AMPK 信号通路有关 。为验证 MIF/AMPK 信号
[17]
组别 Bcl-2 p-AMPKα MIF 通路在 I/R 损伤及 PHC 干预中的作用，本研究同时设置
假手术组 0.78±0.07 0.31±0.05 0.81±0.04 了 I/R+ISO-1 组和 I/R+PHC+ISO-1 组。结果显示，单用
I/R组 0.74±0.07 0.52±0.19 a 0.83±0.06
I/R+PHC组 1.19±0.34 b 1.16±0.29 b 1.13±0.37 b ISO-1 时，ISO-1 对小鼠各指标的干预作用普遍与 PHC
I/R+ISO-1组 0.59±0.06 b 0.58±0.06 0.56±0.05 b 相反；而联用 PHC 和 ISO-1 时，ISO 可逆转 PHC 对多数
I/R+PHC+ ISO-1组 0.81±0.05 c 0.96±0.13 c 0.84±0.14 c
指标的改善作用，提示 PHC 可能通过激活 MIF/AMPK
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与I/R组比较，P＜0.05；c：与I/R+
PHC组比较，P＜0.05。 信号通路来发挥心肌保护作用。需要注意的是，单用
ISO-1 时，并未发现 p-AMPKα 蛋白表达的变化，提示可
MIF 13 kDa
能存在多个影响 AMPK 蛋白磷酸化的因素或存在其他
65 kDa
p-AMPKα
62 kDa 信号通路；此外，单用或加用 ISO-1 后，小鼠心率均明显
Bcl-2 26 kDa 升高，可能与抑制剂进一步加重心肌I/R损伤，进而诱发
[2]
室性心动过速等再灌注性心律失常有关 。
β-actin 42 kDa
PHC 属于选择性抗胆碱药，主要作用于 M1 和 M3
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
[3]
Ⅰ：假手术组；Ⅱ：I/R组；Ⅲ：I/R+PHC组；Ⅳ：I/R+ISO-1组；Ⅴ：I/R+ 受体，对 M2 受体无明显作用，且不影响患者心率 。冠
PHC+ ISO-1组。 状动脉内皮细胞主要表达 M3 受体，而冠状动脉平滑肌
图3 各组小鼠心肌组织中MIF、p-AMPKα、Bcl-2蛋白 则同时表达M2、M3受体，这为PHC改善冠脉血供、减轻
表达的电泳图
[6]
心肌 I/R 损伤奠定了理论基础 。当然，PHC 对心肌 I/R
子，可促进心肌细胞凋亡；IL-10具有拮抗炎症反应的作 损伤的保护作用还可能涉及其他通路 [19―20] ，仍需要更多
[12]
用，可有助于减轻I/R损伤 。本研究结果显示，与假手 研究进一步探索。
术组比较，I/R 组小鼠血清中 IL-6、TNF-α 水平均显著升
综上所述，PHC可改善I/R小鼠心功能，减轻其心肌
高，IL-10 水平显著降低，HE 染色和电子显微镜观察可 组织炎症，恢复其心肌组织超微结构，上述作用可能是
见炎症细胞浸润、线粒体受损等典型的心肌 I/R 损伤病 通过激活MIF/AMPK信号通路来实现的。

理特征；而PHC可显著降低I/R小鼠血清中IL-6、TNF-α 参考文献
水平，显著升高 IL-10 水平，并可减轻上述心肌 I/R 损伤 [ 1 ] 颜红兵，向定成，刘红梅，等. ST段抬高型急性心肌梗死
病理改变，提示该成分可一定程度上减轻 I/R 所导致的 院前溶栓治疗中国专家共识[J]. 中国介入心脏病学杂
心肌炎症损伤。 志，2018，26（4）：181-190.
抗凋亡蛋白Bcl-2在凋亡的发生过程中起着门控开 YAN H B，XIANG D C，LIU H M，et al. China expert con‐
关的作用，是调控心肌I/R损伤致细胞凋亡的重要分子， sensus on pre-hospital thrombolytic therapy for ST-
其表达上调可有助于减轻心肌I/R损伤 。本研究通过 segment elevation acute myocardial infarction[J]. Chin J
[13]
Western blot检测发现，I/R小鼠心肌组织中Bcl-2蛋白的 Interv Cardiol，2018，26（4）：181-190.
表达虽较假手术组无明显变化，但PHC可使该蛋白的表 [ 2 ] 洪名扬，富路. 冠心病心肌缺血再灌注损伤机制研究的
达显著上调，提示该成分可能通过上调 Bcl-2 蛋白的表 进展[J]. 心血管康复医学杂志，2022，31（2）：241-245.
达来发挥心肌保护作用。 HONG M Y，FU L. Research progress on mechanism of
myocardial ischemia-reperfusion injury in coronary heart
研究指出，MIF的表达水平与心肌损伤的严重程度
disease[J]. Chin J Cardiovasc Rehabil Med，2022，31（2）：
密切相关，MIF/AMPK信号通路激活可增加葡萄糖转运
241-245.
蛋白活性和葡萄糖代谢，从而减轻I/R损伤 ；此外，MIF
[17]
[ 3 ] MARIN W，MARIN D，AO X，et al. Mitochondria as a
还可通过激活下游 AMPK 信号通路来抑制氧化应激和
therapeutic target for cardiac ischemia-reperfusion injury：
Jun激酶介导的细胞凋亡，从而发挥改善心肌I/R损伤的
review[J]. Int J Mol Med，2021，47（2）：485-499.
[18]
作用 。AMPK 信号通路在维持机体能量代谢平衡和
[ 4 ] 孙芳芳，崔哲，张富洋，等. 心室负荷卸载防治心肌缺血
调控氧化应激、内质网应激、细胞凋亡方面具有重要作 再灌注损伤的应用及机制[J]. 心脏杂志，2023，35（6）：
用，其中 p-AMPKα 是 AMPK 信号通路激活的重要标 700-704.
[12]
志 。 与 假 手 术 组 比 较 ，I/R 组 小 鼠 心 肌 组 织 中 p- SUN F F，CUI Z，ZHANG F Y，et al. Application and
AMPKα蛋白的表达显著上调，提示I/R损伤后AMPK信 mechanism of ventricular unloading in prevention and
号通路被激活；而PHC可进一步增加MIF、p-AMPKα蛋 treatment of myocardial ischemia-reperfusion injury[J].

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