Page 30 - 《中国药房》2024年24期

肾必宁高剂量组大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、Mfn2 量组大鼠 24 h-UTP、尿红细胞计数及 ALT、BUN、Scr 水
mRNA 表达水平均显著升高，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ mRNA 比 平均显著降低，ALB 水平均显著升高，病理形态均明显
值和Drp1 mRNA表达水平均显著降低（P＜0.05）。结果 改善，肾脏系膜区IgA沉积均明显减少，可见肾必宁颗粒
见表3。 能有效改善IgAN大鼠的肾损伤。

表3 各组大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、LC3、Drp1、 近年来，肾小管损伤和线粒体紊乱在慢性肾脏病中
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Mfn2 mRNA表达水平比较（x±s，n＝3） 的重要性逐渐引起关注 。肾脏作为人体第二大耗氧
组别 PINK1 Parkin LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ Drp1 Mfn2 器官，肾小管细胞中含有丰富的线粒体，源源不断产生
正常对照组 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 大量 ATP 以驱动葡萄糖、离子和其他营养物质的转运，
模型组 0.57±0.06 a 0.56±0.06 a 1.69±0.07 a 2.44±0.23 a 0.47±0.10 a
醋酸泼尼松组 0.84±0.08 b 0.84±0.05 b 1.15±0.08 b 1.35±0.10 b 0.72±0.04 b 因此维持线粒体的稳态对于肾脏正常细胞功能至关重
肾必宁等剂量组 0.85±0.07 b 0.78±0.06 b 1.20±0.04 b 1.29±0.18 b 0.84±0.07 b 要。线粒体是一类高度可塑的动态细胞器，具有自身完
肾必宁高剂量组 0.85±0.08 b 0.88±0.06 b 1.33±0.24 b 1.33±0.08 b 0.86±0.08 b
备的质量控制系统以维持稳态，即线粒体动力学和线粒
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。
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体自噬 。前者通过在融合和分裂之间不断转换以维
3.5 各组大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、LC3、Drp1、 持线粒体数量、形态和分布 ，当线粒体受到外界刺激
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Mfn2蛋白表达水平比较 发生过度分裂或融合时，受损的线粒体又可经自噬途径
与正常对照组比较，模型组大鼠肾组织中 PINK1、 被清除或转化为能量及基础物质为机体所用，这种双重
Parkin、Mfn2 蛋白表达水平和 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值 调控的过程，共同维持线粒体功能正常发挥 。张旭
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均显著降低，Drp1蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）；与 等 研究发现，IgAN 小鼠肾组织中 Drp1 mRNA 表达水
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模型组比较，醋酸泼尼松组、肾必宁等剂量组和肾必宁 平明显升高，而 Mfn2 mRNA 表达水平明显降低。小鼠
高剂量组大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、Mfn2 蛋白表达 特异性敲除Drp1基因后线粒体自噬减少 ，若敲除或突
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水平和 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值均显著升高，Drp1 蛋白 变 Parkin 基因，线粒体中 Drp1 增多，线粒体过度分裂产
表达水平均显著降低（P＜0.05）。结果见图3和表4。 生的活性氧显著增加，从而促进细胞凋亡 。本研究结
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果显示，与模型组比较，肾必宁等剂量组和肾必宁高剂
PINK1 60 kDa
量组大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、Mfn2 mRNA 及蛋白
Parkin 52 kDa
表达水平均显著升高，Drp1 mRNA 及蛋白表达水平均
LC3-Ⅰ 17 kDa
LC3-Ⅱ 16 kDa 显著降低。由此可见，调控线粒体质量平衡有可能作为
治疗 IgAN 的作用靶点，为延缓肾脏疾病发展提供新
Mfn2 86 kDa
思路。
Drp1 84 kDa
自噬是一种细胞自我降解和循环利用胞内组分的
β-actin 45 kDa
过程。当自噬发生时，LC3蛋白合成后立即在其羧基端
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
被 Atg4 所剪切，产生 LC3-Ⅰ，同时 LC3-Ⅰ会被 Atg7 及
Ⅰ：正常对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：醋酸泼尼松组；Ⅳ：肾必宁等剂量
组；Ⅴ：肾必宁高剂量组。 其他在内的泛素样体系所修饰和加工，产生 LC3-Ⅱ，并
图3 各组大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、LC3、Drp1、 定位到自噬小体中，故 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的大小可进
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Mfn2蛋白表达的电泳图 一步反映自噬水平的高低 。本研究结果显示，与模型
组比较，肾必宁等剂量组和肾必宁高剂量组大鼠肾组织
表4 各组大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、LC3、Drp1、
中LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA比值均显著降低，LC3-Ⅱ/LC3-
Mfn2蛋白表达水平比较（x±s，n＝3）
组别 PINK1 Parkin LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ Drp1 Mfn2 Ⅰ蛋白比值均显著升高。LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的mRNA和蛋
正常对照组 0.90±0.03 1.08±0.04 14.49±2.02 0.42±0.03 0.75±0.03 白水平变化趋势不一致，与真核基因表达的转录、翻译、
模型组 0.37±0.02 a 0.27±0.05 a 0.54±0.05 a 0.83±0.03 a 0.33±0.02 a 加工及修饰、检测的时间点等多个层面有关，然而机体
醋酸泼尼松组 0.61±0.02 b 0.48±0.03 b 3.30±0.07 b 0.61±0.03 b 0.56±0.04 b
肾必宁等剂量组 0.60±0.02 b 0.50±0.02 b 3.09±0.12 b 0.64±0.01 b 0.53±0.02 b 发挥作用的是目的蛋白，因此本研究最终以 LC3-Ⅱ/
肾必宁高剂量组 0.62±0.03 b 0.52±0.04 b 3.05±0.20 b 0.61±0.03 b 0.55±0.03 b LC3-Ⅰ蛋白比值为准，提示自噬活性程度。由此得出，
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05。
肾必宁颗粒可能通过调控肾脏线粒体质量平衡、纠正线
4 讨论 粒体紊乱、激活PINK1/Parkin通路、增强线粒体自噬，从
IgAN 是以 IgA 沉积于肾小球系膜区为主要特征的 而发挥肾脏保护作用。泼尼松是治疗 IgAN 的一线用
原发性慢性肾小球疾病，其进展期预后不佳。本研究结 药，该药作为本研究的阳性对照，肾必宁等/高剂量组与
果显示，与模型组比较，肾必宁等剂量组和肾必宁高剂 其比较差异均无统计学意义，但肾必宁颗粒能有效避免

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