Page 29 - 《中国药房》2024年24期
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表1 引物序列及片段大小 表2 各组大鼠24 h-UTP、尿红细胞计数及肝肾功能指
基因 引物序列 片段大小/bp 标比较(x±s,n=12)
PINK1 正向:5′-TGCAATGCCGCTGTGTATGA-3′ 113 24 h-UTP/ 尿红细胞计数/ ALB/ ALT/ BUN/ Scr/
组别
反向:3′-TCTGCTCCCTTTGAGACGAC-5′ mg μL -1 (g/L) (U/L) (mmol/L) (μmol/L)
Parkin 正向:5′-GGAAGTGGTTGCTAAGCGACAG-3′ 173 正常对照组 6.74±1.62 7.27±0.88 33.28±2.27 33.21±2.83 5.10±0.37 55.10±5.10
反向:3′-TCTGCTCCCTTTGAGACGAC-5′ 模型组 18.31±3.21 a 20.58±2.03 a 22.08±1.06 a 54.22±5.75 a 7.81±0.50 79.18±3.28 a
a
LC3-Ⅰ 正向:5′-TTCGCCGACCGCTGTAAG-3′ 124 醋酸泼尼松组 11.13±1.90 b 10.43±1.26 b 27.24±2.62 b 43.10±3.54 b 6.06±0.65 64.57±4.63 b
b
b
反向:3′-TGGTCTTATCCAGGACAGGCAG-5′ 肾必宁等剂量组 11.44±1.95 b 11.35±1.29 b 26.45±2.46 b 44.75±4.69 b 6.31±0.53 66.54±2.98 b
b
LC3-Ⅱ 正向:5′-TCCGAGAAGACCTTCAAACAGC-3′ 233 肾必宁高剂量组 11.34±1.82 b 11.01±1.25 b 25.63±1.80 b 42.22±2.94 b 5.91±0.33 62.57±2.50 b
反向:3′-TCCGAGAAGACCTTCAAACAGC-5′ a:与正常对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。
Drp1 正向:5′-AATTTGCTAGATGTGCCAGTTCC-3′ 303 3.2 大鼠肾组织病理变化
反向:3′-ACTGGCTCCTTGTAATGCCTTCA-5′
Mfn2 正向:5′-CACCGTCAAGAAGGATAAGCG-3′ 127 正常对照组大鼠肾小球内细胞及基质均匀分布,肾
反向:3′-CAGTTCTGTATTCCTGTGGGTGTC-5′ 小管上皮细胞圆润、饱满,细胞结构正常;模型组大鼠可
GAPDH 正向:5′-CTGGAGAAACCTGCCAAGTATG-3′ 138 见系膜基质增多,肾小球炎症细胞浸润,伴少量肾小管
反向:3′-GGTGGAAGAATGGGAGTTGCT-5′
萎缩、肾小管上皮细胞坏死,细胞结构消失,伴少量淋巴
白(β-actin)的灰度值比值表示目的蛋白的表达水平,以 细胞灶性浸润;与模型组比较,醋酸泼尼松组、肾必宁等
LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值表示LC3蛋白的表达水平。 剂量组和肾必宁高剂量组大鼠肾小管上皮细胞圆润、饱
2.8 统计学方法 满,刷状缘排列整齐、规则,病理形态均明显改善。结果
采用 SPSS 25.0 软件进行统计分析。计量资料以 见图1。
x±s 表示,方差齐性时多组间比较采用单因素方差分 3.3 大鼠肾脏系膜区IgA沉积变化
析,进一步两两比较采用Tukey检验;方差不齐时采用非 正常对照组大鼠肾脏系膜区未见明显IgA 沉积;模
参数检验。检验水准α=0.05。 型组大鼠肾脏系膜区IgA沉积呈强阳性(绿色荧光);与
3 结果 模型组比较,醋酸泼尼松组、肾必宁等剂量组和肾必宁
3.1 大鼠 24 h-UTP、尿红细胞计数及肝肾功能指标 高剂量组大鼠肾脏系膜区 IgA 沉积均明显减少。结果
变化 见图2。
与正常对照组比较,模型组大鼠 24 h-UTP、尿红细 3.4 大鼠肾组织中 PINK1、Parkin、LC3、Drp1、Mfn2
胞计数及 ALT、BUN、Scr 水平均显著升高,ALB 水平显 mRNA表达水平比较
著降低(P<0.05);与模型组比较,醋酸泼尼松组、肾必 与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织中 PINK1、
宁等剂量组和肾必宁高剂量组大鼠24 h-UTP、尿红细胞 Parkin、Mfn2 mRNA表达水平均显著降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ
计数及 ALT、BUN、Scr 水平均显著降低,ALB 水平均显 mRNA 比值和 Drp1 mRNA 表达水平均显著升高(P<
著升高(P<0.05)。结果见表2。 0.05);与模型组比较,醋酸泼尼松组、肾必宁等剂量组和
A.正常对照组 B.模型组 C.醋酸泼尼松组 D.肾必宁等剂量组 E.肾必宁高剂量组
蓝色箭头:肾小管;橙色箭头:肾小球。
图1 各组大鼠肾组织病理图(HE染色)
A.正常对照组 B.模型组 C.醋酸泼尼松组 D.肾必宁等剂量组 E.肾必宁高剂量组
红色箭头:IgA沉积。
图2 各组大鼠肾脏系膜区IgA沉积的显微图
中国药房 2024年第35卷第24期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 24 · 2987 ·