Page 27 - 《中国药房》2024年24期
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count， ALT， BUN and Scr levels， LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ mRNA ratio， mRNA and protein expressions of Drp1 were reduced significantly
          in prednisone acetate group， Shenbining equal-dose group and Shenbining high-dose group （P＜0.05）； ALB level， LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ
          protein ratio， mRNA and protein expressions of PINK1， Parkin and Mfn2 were increased significantly （P＜0.05）； the pathological
          morphology  of  kidney  tissue  in  rats  was  significantly  improved，  and  IgA  deposition  was  significantly  reduced.  CONCLUSIONS
          Shenbining  granule  may  reduce  renal  pathological  injury  in  IgAN  rats  and  protect  renal  function  by  activating  the  PINK1/Parkin
          pathway， enhancing mitochondrial autophagy， and correcting mitochondrial kinetic disorders.
          KEYWORDS    Shenbining granule； IgA nephropathy； mitochondrial quality control system； mitochondrial homeostasis； autophagy



              免疫球蛋白 A（immunoglobulin A，IgA）肾病（IgA            丁樱教授拟定，经河南中医药大学第一附属医院多年临
          nephropathy，IgAN）是全球发病率最高的原发性肾小球                   床实践证实，其能够降低多种肾病引起的蛋白尿，具有
              [1]
          疾病 ，早期常表现为无症状血尿或伴不同程度蛋白尿，                          健脾固肾、益气养阴、清热化瘀的功效，切合IgAN“气阴
          病情呈渐进性、不可逆性，30%～45% 的患者在确诊后                        两虚、湿热瘀血”的核心病机。本课题组前期已证实，肾
          20～25 年内发展为终末期肾病（end-stage renal disease，          必宁颗粒可以降低 IgAN 大鼠尿蛋白，减轻血尿并改善
                                                                                                      [8]
                [2]
          ESRD） 。IgAN的发病机制尚不明确，近年来有研究表                       肾功能，从而起到保护肾脏、防治肾损伤的作用 ，但其
          明，线粒体内稳态失衡会影响多种肾脏疾病的发生                             治疗机制尚不明确。本研究基于线粒体质量控制系统，
              [3]
          发展 。                                               探讨肾必宁颗粒对 IgAN 大鼠的肾脏保护作用机制，旨
              线粒体质量控制系统是机体监测和维持线粒体内                          在为阐明肾必宁颗粒治疗IgAN的作用机制提供参考。
          环境稳态及功能，反映线粒体质量的一个网络系统，其                           1 材料
                                                       [4]
          中包括线粒体的生物合成、分裂与融合及线粒体自噬 。                          1.1 主要仪器
          若上述过程出现任何异常均可能造成线粒体功能紊乱，                               本研究所用主要仪器包括RT-6100型全自动酶标仪
          进 而 导 致 细 胞 的 损 伤 或 凋 亡 。 动 力 相 关 蛋 白 1           （深圳雷杜生命科学股份有限公司）、KZ-Ⅲ-FP型低温研
         （dynamin-related protein 1，Drp1）作为调控线粒体分裂           磨仪（武汉赛维尔生物科技有限公司）、D3024R 型台式
                                             [5]
                    [3]
          的关键蛋白 ，可促进受损线粒体的降解 ；线粒体融合                          高速冷冻离心机[大龙兴创实验仪器（北京）股份公司]、
          蛋白 2（mitofusin 2，Mfn2）是一种定位于线粒体外膜的                 6100 系列化学发光成像仪（上海勤翔科学仪器有限公
          跨膜蛋白，通过与其同系物 Mfn1 结合形成高分子复合                        司）、Eclipse Ci-L 型正置显微镜（日本 Nikon 公司）、Al‐
          物，共同介导线粒体外膜融合，修复受损线粒体；当线粒                          phaEaseFC 型灰度分析软件（美国 ProteinSimple 公司）、
          体分裂和融合失衡，机体会诱导线粒体自噬，PTEN诱导                         CFX Connect 型荧光定量聚合酶链式反应（PCR）仪[伯
                                                             乐生命医学产品（上海）有限公司]、BS-2000型全自动生
          假定激酶 1（PTEN-induced putative kinase 1，PINK1）/E3
          泛素连接酶（E3 ubiquitin ligase，Parkin）通路是介导线粒           化分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）、
          体自噬的经典途径，两者在病理条件下发生磷酸化而活                           ETC821 型 PCR 仪（北京东胜创新生物科技有限公司）、

          化，促使线粒体移位，激活线粒体自噬；微管相关蛋白 1                         NanoDrop OneC 型微量紫外-可见光分光光度计（美国
          轻 链 3（microtubule-associated  protein  1  light  chain-3，  Thermo Fisher Scientific公司）等。
          LC3）是检测自噬的常用指标，LC3-Ⅰ型转变为 LC3-Ⅱ                     1.2 主要药品与试剂
                              [6]
          是反映自噬发生的标志 。上述蛋白在调控线粒体功能                               肾 必 宁 颗 粒 [ 豫 药 制 字 Z20120721（郑），批 号
          完整性中均发挥重要作用。                                       0064771793，规格 10 g/袋]由河南中医药大学第一附属
              肾脏作为高代谢器官，需要线粒体提供大量腺苷三                         医院提供；醋酸泼尼松片（批号2211192，规格5 mg/片）购
          磷酸（adenosine triphosphate，ATP）以满足肾小管主动转            自安徽金太阳生化药业有限公司；牛血清白蛋白（批号
          运营养物质及机体能量需求，维持水-电解质平衡；若线                          B2064）、脂多糖（批号0000223032）均购自美国Sigma公
          粒体功能受损势必导致肾小管上皮细胞供能不足，产生                           司 ；四 氯 化 碳 、蓖 麻 油（批 号 分 别 为 C14404678、
          过量线粒体活性氧并促进近端肾小管细胞的炎症反                             C14854610）均购自上海麦克林生化科技股份有限公司；
            [3]
          应 ，累积的活性氧进一步损伤线粒体，进而诱发其自噬                          兔源PINK1一抗（批号a7131）购自武汉爱博泰克生物科
          和细胞凋亡 ，加重肾损伤。目前针对恢复线粒体稳态                           技有限公司；兔源 Mfn2 一抗（批号 ab205236）购自英国
                    [7]
          的干预措施已成为预防和治疗肾损伤的新兴治疗策略。                           Abcam 公司；鼠源 IgA 一抗（批号 PAA546Ra01）购自武
          肾必宁颗粒是由河南中医药大学儿科医学院国医大师                            汉云克隆科技股份有限公司；异硫氰酸荧光素标记的山


          中国药房  2024年第35卷第24期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 24    · 2985 ·
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