Page 50 - 《中国药房》2024年23期

表2 不同质量浓度地菍石油醚提取物对细胞存活率的 表3 各组细胞培养液中 NO 含量和 NO 抑制率的测定
影响（x±s，n＝6，%%） 结果（x±s，n＝4）
编号 2.5 μg/mL 5 μg/mL 10 μg/mL 20 μg/mL 40 μg/mL NO含量/ NO抑制 NO含量/ NO抑制
组别 组别
S1 98.32±0.09 108.04±0.05 99.50±0.19 44.97±0.17 11.42±0.09 （mmol/mL） 率/% （mmol/mL） 率/%
S2 110.81±0.07 113.18±0.08 94.25±0.14 49.14±0.52 20.38±0.04 正常组 0.29±0.10 － 地菍石油醚提取物S10组 35.21±2.26 b 33.18
S3 79.37±0.09 83.02±0.12 44.51±0.14 7.11±0.04 11.73±0.03 模型组 52.70±4.95 a － 地菍石油醚提取物S11组 36.19±1.31 b 31.33
S4 99.03±0.06 103.75±0.17 99.11±0.10 72.10±0.14 34.17±0.04 地菍石油醚提取物S1组 29.73±1.83 b 43.59 地菍石油醚提取物S12组 32.99±1.23 b 37.41
S5 72.71±0.07 105.13±0.07 106.19±0.03 67.69±0.04 55.35±0.12 地菍石油醚提取物S2组 33.16±2.08 b 37.08 地菍石油醚提取物S13组 33.65±1.08 b 36.14
S6 95.01±0.06 83.32±0.08 81.05±0.06 57.42±0.15 35.35±0.08 地菍石油醚提取物S3组 34.91±0.92 b 33.76 地菍石油醚提取物S14组 31.58±4.74 b 40.07
S7 107.03±0.07 97.90±0.10 98.01±0.10 79.35±0.14 39.98±0.06 地菍石油醚提取物S4组 33.94±2.33 b 35.61 地菍石油醚提取物S15组 33.25±2.66 b 36.91
S8 78.28±0.04 93.14±0.08 88.46±0.10 49.94±0.12 25.14±0.04 地菍石油醚提取物S5组 33.00±2.22 b 37.38 地菍石油醚提取物S16组 33.99±2.11 b 35.51
S9 105.36±0.11 100.50±0.10 91.79±0.13 56.56±0.02 29.30±0.26 地菍石油醚提取物S6组 32.84±1.52 b 37.69 地菍石油醚提取物S17组 33.38±0.83 b 36.66
S10 110.10±0.18 98.41±0.09 38.09±0.07 54.52±0.06 37.66±0.06 地菍石油醚提取物S7组 37.95±0.65 b 27.98 地菍石油醚提取物S18组 33.66±6.30 b 36.13
S11 107.48±0.07 97.69±0.10 102.81±0.10 69.56±0.14 35.31±0.05 地菍石油醚提取物S8组 35.34±2.88 b 32.94 地菍石油醚提取物S19组 35.15±1.91 b 33.30
S12 92.80±0.07 101.30±0.04 77.78±0.15 68.40±0.14 37.23±0.01 地菍石油醚提取物S9组 34.50±1.23 b 34.53 地菍石油醚提取物S20组 32.89±5.25 b 37.59
S13 92.62±0.04 96.80±0.04 93.11±0.04 77.01±0.08 39.38±0.05 a：与正常组相比，P＜0.01；b：与模型组相比，P＜0.01。
S14 63.98±0.07 110.95±0.08 123.73±0.09 101.76±0.07 40.08±0.11 2.2.5 地菍石油醚提取物对细胞TNF-α释放量的影响
S15 92.56±0.04 99.67±0.05 91.45±0.09 71.05±0.11 39.26±0.03
S16 109.39±0.13 108.99±0.23 78.93±0.10 64.33±0.30 42.27±0.07 取对数生长期 RAW264.7 细胞，调整细胞密度为
S17 107.79±0.08 101.81±0.14 94.83±0.15 69.22±0.13 28.12±0.07 2×10 个/mL 并 接 种 于 24 孔 板 中 ，每 孔 500 μL，于
5
S18 88.98±0.08 91.71±0.07 119.19±0.06 56.40±0.12 41.30±0.06 37 ℃、5%CO2培养箱中培养24 h。按“2.2.4”项下方法分
S19 116.81±0.23 91.53±0.11 89.32±0.22 50.85±0.07 23.11±0.04
S20 98.66±0.16 94.15±0.14 90.57±0.07 75.94±0.11 35.45±0.12 组、给药及干预，每组设置4个复孔。干预24 h后，取各
平均值 96.35 99.05 90.13 62.17 33.10 组细胞上清液，按照ELISA试剂盒说明书方法检测细胞
由表 2 可知，当地菍石油醚提取物给药质量浓度为 培养液中TNF-α含量，并计算TNF-α抑制率。TNF-α抑
2.5、5、10、20、40 μg/mL 时，细胞平均存活率分别为 制率＝（模型组细胞培养液中TNF-α含量－给药组细胞
96.35%、99.05%、90.13%、62.17%、33.10%；当给药质量 培养液中 TNF-α 含量）/模型组细胞培养液中 TNF-α 含
浓度为10 μg/mL时，细胞平均存活率虽达90.13%，但在 量×100%。数据按“2.2.4”项下统计学方法处理。结果
该给药质量浓度下，编号 S3、S10 样品提取物作用后的 见表4。由表4可知，与正常组比较，模型组细胞培养液
中TNF-α含量显著升高（P＜0.01）；与模型组比较，地菍
细胞存活率均较低，分别为 44.51%、38.09%。综合考虑
石油醚提取物各给药组（地菍石油醚提取物S3组除外）
20批石油醚提取物对细胞存活率的影响，选择给药质量
细胞培养液中 TNF-α 含量均显著降低（P＜0.05 或 P＜
浓度5 μg/mL进行后续实验。
0.01）。TNF-α抑制率在18.15%～82.83%之间。
2.2.4 地菍石油醚提取物对细胞NO释放量的影响
表4 各组细胞培养液中 TNF-α 含量和 TNF-α 抑制率
取对数生长期 RAW264.7 细胞，调整细胞密度为
的测定结果（x±s，n＝4）
5
6×10 个/mL 并 接 种 于 96 孔 板 中 ，每 孔 100 μL，于
TNF-α含量/ TNF-α TNF-α含量/ TNF-α
37 ℃、5%CO2培养箱中培养 24 h。实验设置正常组、模 组别 （ng/mL） 抑制率/% 组别 （ng/mL） 抑制率/%
型组、给药组（分别命名为地菍石油醚提取物 S1～S20 正常组 0.09±0.02 － 地菍石油醚提取物S10组 41.49±13.12 b 52.86
模型组 89.07±13.65 a － 地菍石油醚提取物S11组 30.53±5.48 b 65.73
组）。正常组仅加入细胞培养基，模型组加入 1 μg/mL
地菍石油醚提取物S1组 24.68±3.01 b 72.29 地菍石油醚提取物S12组 34.13±13.65 b 61.68
的 LPS，给药组加入 1 μg/mL 的 LPS 和 5 μg/mL 的地菍 地菍石油醚提取物S2组 33.81±18.79 c 62.04 地菍石油醚提取物S13组 44.13±8.66 b 50.47
石油醚提取物，每组设置 4 个复孔。药物/培养基干预 地菍石油醚提取物S3组 72.91±20.41 18.15 地菍石油醚提取物S14组 26.85±6.54 b 69.86
地菍石油醚提取物S4组 25.44±9.04 b 71.44 地菍石油醚提取物S15组 35.84±9.60 b 59.77
24 h后，取细胞培养液，按照NO试剂盒说明书方法检测
地菍石油醚提取物S5组 17.32±4.27 b 80.56 地菍石油醚提取物S16组 21.01±5.49 b 76.41
细胞培养液中 NO 含量，并计算 NO 抑制率。NO 抑制 地菍石油醚提取物S6组 22.91±8.00 b 74.28 地菍石油醚提取物S17组 25.17±8.96 b 71.74
率＝（模型组细胞培养液中 NO 含量－给药组细胞培养 地菍石油醚提取物S7组 20.39±3.90 b 82.83 地菍石油醚提取物S18组 32.71±9.96 b 63.28
地菍石油醚提取物S8组 47.11±8.86 b 60.33 地菍石油醚提取物S19组 37.68±15.46 b 57.70
液中 NO 含量）/模型组细胞培养液中 NO 含量×100%。 地菍石油醚提取物S9组 28.07±12.71 b 68.49 地菍石油醚提取物S20组 15.68±3.83 b 82.39
采用SPSS 26.0软件进行统计分析，数据以x±s表示，多 a：与正常组相比，P＜0.01；b：与模型组相比，P＜0.01；c：与模型组
组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 相比，P＜0.05。
LSD-t 检验，检验水准 α＝0.05。结果见表 3。由表 3 可 2.3 地菍石油醚提取物抗炎谱效关系分析
知，与正常组比较，模型组细胞培养液中NO含量显著升 2.3.1 灰色关联度分析
高（P＜0.01）；与模型组比较，各地菍石油醚提取物给药 灰色关联度分析是一种衡量事物或因素间关联程
组细胞培养液中NO含量均显著降低（P＜0.01）。NO抑 度的方法，在谱效关系研究中可反映共有峰对应成分对
[7]
制率在27.98%～43.59%之间。 药效的贡献 。本研究以 NO、TNF-α 抑制率为参考序

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