Page 57 - 《中国药房》2024年22期

片后，置于荧光显微镜下观察各切片的染色情况（凋亡 表2 各组大鼠DAI、CMDI评分比较（x±s，n＝16，分）
细胞呈绿色荧光，正常细胞呈蓝色荧光），计算细胞凋亡 组别 DAI评分 CMDI评分
对照组 0 0
率[细胞凋亡率＝绿色荧光细胞数/（绿色荧光细胞数+蓝
模型组 3.35±0.41 a 4.03±0.51 a
色荧光细胞数）×100％]。 ASP低剂量组 2.19±0.36 b 2.70±0.39 b
2.5 大鼠结肠组织中 TNF-α、IFN-β、IL-4、IL-10 水平 ASP高剂量组 1.04±0.19 bc 1.65±0.27 bc
ASP高剂量+STING激活剂组 3.20±0.37 d 3.64±0.42 d
检测
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与ASP低
取各组剩余 8 只大鼠的结肠组织适量，以磷酸盐缓
剂量组比较，P＜0.05；d：与ASP高剂量组比较，P＜0.05。
冲液匀浆后分成 2 份，其中一份置于－70 ℃下保存；另
3.2 ASP 对 UC 大鼠结肠组织病理学形态及组织病理
一份于 4 ℃下以 5 000 r/min 离心 5 min，收集上清液，按
学评分的影响
ELISA试剂盒说明书方法操作，使用酶标仪检测上清液
中TNF-α、IFN-β、IL-4、IL-10水平。 对照组大鼠结肠组织黏膜完整，隐窝和腺体排列正
2.6 大鼠结肠组织中 STING/TBK1/IRF3 信号通路相 常，无溃疡形成。与对照组比较，模型组大鼠结肠组织
关蛋白表达检测 黏膜及腺体结构严重受损，黏膜上皮磨损，隐窝缺失，可
取“2.5”项下冻存的各组大鼠结肠组织，以 RIPA 裂 见明显的炎症细胞浸润，组织病理学评分显著升高（P＜
解液提取总蛋白，定量后进行变性处理。取变性蛋白适 0.05）。与模型组比较，ASP 低、高剂量组大鼠结肠组织
量，经电泳分离、转膜后，以牛血清白蛋白封闭2 h；加入 黏膜结构相对完整，腺体排列有序，充血和水肿减轻，炎
STING/TBK1/IRF3 信号通路相关蛋白一抗（TBK1、p- 症细胞浸润及溃疡明显减少，组织病理学评分均显著降
TBK1、IRF3、p-IRF3的稀释比例均为1∶500，STING、NF-
低（P＜0.05）；且 ASP 高剂量组的改善较 ASP 低剂量组
κB p65、p-NF-κB p65 的稀释比例均为 1∶1 000，GAPDH
明显，组织病理学评分更低（P＜0.05）。与 ASP 高剂量
的稀释比例为1∶2 000），4 ℃下孵育过夜；加入相应二抗
组比较，ASP 高剂量+STING 激活剂组大鼠结肠组织损
（稀释比例为 1∶3 000），室温下孵育 1 h；以 ECL 试剂显
伤和炎症细胞浸润加重，组织病理学评分显著升高（P＜
影，在蛋白凝胶成像系统下成像。以GAPDH为内参，通
过 Image J 软件分析各目的蛋白的表达水平，并分别以 0.05）。结果见图1、表3。
p-TBK1 与 TBK1、p-IRF3 与 IRF3、p-NF-κB p65 与 NF- 表3 各组大鼠结肠组织病理学评分和细胞凋亡率比较
κB p65的灰度值比值表示TBK1、IRF3、NF-κB p65蛋白 （x±s，n＝8）
的磷酸化水平。 组别 组织病理学评分/分 细胞凋亡率/％
对照组 0 3.74±0.49
2.7 统计学方法
模型组 3.51±0.34 a 35.67±4.61 a
采用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析。实验数 ASP低剂量组 2.44±0.28 b 21.85±3.27 b
据以 x±s 表示，使用单因素方差分析进行多组间比较， ASP高剂量组 1.27±0.22 bc 9.14±1.48 bc
ASP高剂量+STING激活剂组 3.26±0.31 d 31.43±4.20 d
随后使用 SNK-q 检验进行两组间多重比较。检验水准
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与ASP低
α＝0.05。
剂量组比较，P＜0.05；d：与ASP高剂量组比较，P＜0.05。
3 结果
3.3 ASP对UC大鼠结肠组织细胞凋亡率的影响
3.1 ASP对UC大鼠DAI和CMDI评分的影响
与对照组比较，模型组大鼠结肠组织的细胞凋亡率
与对照组比较，模型组大鼠的DAI、CMDI评分均显
显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，ASP 低、高剂量组
著升高（P＜0.05）；与模型组比较，ASP 低、高剂量组大
大鼠结肠组织的细胞凋亡率均显著降低，且ASP高剂量
鼠的DAI、CMDI评分均显著降低，且ASP高剂量组显著
低于 ASP 低剂量组（P＜0.05）；与 ASP 高剂量组比较， 组显著低于 ASP 低剂量组（P＜0.05）；与 ASP 高剂量组
ASP高剂量+STING激活剂组大鼠的DAI、CMDI评分均 比较，ASP 高剂量+STING 激活剂组大鼠结肠组织的细
显著升高（P＜0.05）。结果见表2。 胞凋亡率显著升高（P＜0.05）。结果见图2、表3。

50
50 50 μμmm 50 50 μμmm 50 50 μμmm 50 μμmm 50 50 μμmm
A.对照组 B.模型组 C. ASP低剂量组 D. ASP高剂量组 E. ASP高剂量+STING激活剂组
黑色箭头：腺体；红色箭头：炎症细胞浸润。
图1 各组大鼠结肠组织病理学变化的显微图（HE染色）

中国药房 2024年第35卷第22期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 22 · 2759 ·